Оставьте ссылку на эту страницу в соцсетях:

Поиск по базе документов:

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

 

ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАКОПЕЯ СССР

ОДИННАДЦАТОЕ ИЗДАНИЕ

 

ВЫПУСК 2

ОБЩИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА

ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ

 

РЕДАКЦИОННАЯ КОЛЛЕГИЯ

ГОСУДАРСТВЕННОЙ ФАРМАКОПЕИ СССР

XI ИЗДАНИЯ (ВЫПУСК 2)

 

МАШКОВСКИЙ М.Д., БАБАЯН Э.А.,

ОБОЙМАКОВА А.Н., БУЛАЕВ В.М.,

СЕВЕРЦЕВ В.А., ЛЮБИМОВ Б.И.,

СОКОЛОВ С.Д., ТЕНЦОВА А.И.

 

СОСТАВ РЕДАКЦИОННОГО СОВЕТА

ТОМА 2 ГФ XI

 

МАШКОВСКИЙ М.Д. - председатель

БАБАЯН Э.А. - заместитель председателя

ОБОЙМАКОВА А.Н. - ответственный секретарь

 

ЧЛЕНЫ СОВЕТА:

 

ВЗОРОВА Л.Н., ГРИЦЕНКО С.В., ГРИШИНА Т.В.,

ГРАКОВСКАЯ Л.К., ЕГОРОВА Г.Г.,

ЗАЙЦЕВА Е.Ю., ИВАНОВА С.Д., КУРАКИНА И.О.,

ОРЛОВА Ю.Д., САВЕЛЬЕВА В.В.

 

ПРЕДИСЛОВИЕ

 

Подготовка Государственной фармакопеи СССР XI издания (ГФ XI) выпуска 2 "Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье" осуществлялась Фармакопейным комитетом Министерства здравоохранения СССР. В работе принимали участие члены следующих экспертных комиссий Фармакопейного комитета.

 

Химическая комиссия

 

Председатель - Тубина И.С., кандидат химических наук.

Заместитель председателя - Чичиро В.Е., доктор

фармацевтических наук, профессор.

Секретарь - Егорова Г.Г., провизор.

Члены: Арзамасцев А.П., доктор фармацевтических наук,

профессор; Брутко Л.И., доктор фармацевтических наук,

профессор; Гольникова О.А., инженер - технолог; Грешных Р.Д.,

кандидат фармацевтических наук; Козлов Э.И., кандидат

химических наук; Маркова И.Г., кандидат химических наук;

Митрягина С.Ф., кандидат фармацевтических наук; Некрасов В.И.,

кандидат фармацевтических наук; Петрова Э.А., доктор

биологических наук; Полиевктов М.К., кандидат химических наук;

Рябцева И.М., кандидат фармацевтических наук; Шемерянкина

М.И., кандидат технических наук.

 

Фармацевтическая комиссия

 

Председатель - Кулешова М.И., кандидат фармацевтических наук.

Заместители председателя - Шаназаров К.С., кандидат химических

наук; Сунозова Е.В., кандидат технических наук.

Секретари - Гриценко С.В., кандидат фармацевтических наук,

Орлова Ю.Д., кандидат фармацевтических наук.

Члены: Алтухова Л.Б., кандидат химических наук; Волкова Н.С.,

кандидат фармацевтических наук; Граковская Л.К., доктор

фармацевтических наук; Граник Е.М., кандидат химических наук;

Грядунова Г.Н., кандидат фармацевтических наук; Карпова Л.К.,

кандидат фармацевтических наук; Карчевская В.В., кандидат

фармацевтических наук; Львова М.Ш., кандидат химических наук;

Никульшина Н.И., кандидат фармацевтических наук; Прохорова

Л.В., кандидат химических наук; Успенская С.И., кандидат

фармацевтических наук.

 

Фармакогностическая комиссия

 

Председатель - Иванова С.Д., кандидат фармацевтических наук,

доцент.

Заместитель председателя - Самылина И.А., кандидат

фармацевтических наук.

Секретарь - Взорова Л.Н., провизор.

Члены: Быханова М.Ф., инженер - технолог; Вандышев В.В.,

кандидат фармацевтических наук; Гаевский А.В., кандидат

биологических наук; Долгова А.А., кандидат фармацевтических

наук; Клименко В.Е., инженер - технолог; Ладыгина Е.Я.,

кандидат фармацевтических наук; Петрова С. В., провизор;

Просвирина Т.А., провизор; Сало Л.П., кандидат

фармацевтических наук.

 

Фармакологическая комиссия

 

Председатель - Любимов Б.И., доктор медицинских наук.

Секретарь - Савельева В.В., провизор.

Члены: Альтшулер Р.А., доктор медицинских наук; Брякова И.И.,

биолог; Ладинская М. Ю.,кандидат медицинских наук; Смирнов

П.А., кандидат медицинских наук; Смольникова Н.М., кандидат

медицинских наук; Шварц Г.Я., доктор медицинских наук.

 

Комиссия по антибиотикам

 

Председатель - Преображенская Т.П., доктор медицинских наук.

Заместитель председателя - Григорьева В.М., доктор медицинских

наук.

Секретарь - Зайцева Е.Ю., провизор.

Члены: Бережинская В.В., доктор медицинских наук; Бражникова

М.Г., доктор медицинских наук; Гольдберг Л.Е., доктор

медицинских наук; Зак А.Ф., доктор медицинских наук; Корчагин

В.Б., кандидат биологических наук; Ламакина Н.Н., доктор

медицинских наук; Макарова Р.А., кандидат биологических наук;

Пчелина О.И., микробиолог.

 

Комиссия по микробиологии

 

Председатель - Силин В.А., кандидат медицинских наук.

Заместитель председателя - Кивман Г.Я., доктор медицинских

наук.

Секретарь - Гришина Т.В., провизор.

Члены: Бережинская В.В., доктор медицинских наук; Дигилова

В.С., микробиолог; Зажирей В.Д., кандидат медицинских наук;

Каграманова К.А., кандидат биологических наук; Кашинцева И.А.,

врач - бактериолог; Павлов Е.П., кандидат медицинских наук;

Падейская Е.Н., доктор медицинских наук; Прохоров Б.С.,

кандидат медицинских наук; Сафонова Т.В., кандидат медицинских

наук; Смольникова Н.М., кандидат медицинских наук; Чайковская

С.М., доктор медицинских наук.

 

Комиссия по медицинским ферментным препаратам

и природным ядам

 

Председатель - Торчилин В.П., доктор химических наук,

профессор.

Заместитель председателя - Каган З.С., доктор биологических

наук.

Секретарь - Взорова Л.Н., провизор.

Члены: Игнатова А.С., инженер - технолог; Муратова Г.Л.,

кандидат биологических наук; Савицкая Е.М., доктор

биологических наук; Селезнева А.А., кандидат химических наук;

Скуя А.Ж., технолог; Шувалова Т.И., кандидат биологических

наук.

 

Комиссия по препаратам крови

и кровезаменителям

 

Председатель - Андреенко Г.В., доктор биологических наук,

профессор.

Заместители председателя: Холчев Н.В., профессор; Розенберг

Г.Я., профессор.

Секретарь - Куракина И.О., кандидат химических наук.

Члены: Домбровский В.А., кандидат химических наук; Кошевая

В.П., кандидат медицинских наук; Крохина М.А., кандидат

медицинских наук; Пахомов В.П., кандидат химических наук;

Прохорова Н.И., кандидат химических наук; Русанов В.М., доктор

медицинских наук; Суздалева В.В., кандидат биологических наук;

Шарова Ю.А., доктор биологических наук.

 

Комиссия по гормональным (эндокринным)

препаратам

 

Председатель - Панков Ю.А., академик АМН СССР.

Заместитель председателя - Гасанов С.Г., доктор медицинских

наук.

Секретарь - Цимберова С.В., провизор.

Члены: Алексеев В.В., кандидат химических наук; Исаева И.В.,

кандидат биологических наук; Воронцова Г.С., инженер - химик;

Коротаев Г.К., кандидат биологических наук; Федотов В.П.,

доктор медицинских наук; Черненко Г.Т., доктор медицинских

наук.

 

В работе по подготовке к изданию ГФ XI выпуска 2 были привлечены также следующие специалисты: Александрова Н.Н., кандидат медицинских наук; Гойзман М.С., кандидат химических наук; Еникеева З.Н., кандидат биологических наук; Ковалева С.В., кандидат биологических наук; Недобора А.Ф., инженер - технолог; Николаев Г.М., кандидат химических наук; Пахомов В.П., кандидат химических наук; Пименова М.Е., кандидат биологических наук; Романенко Э.Е., кандидат медицинских наук; Харитонова Л.А., провизор; Тетдоева М.Т., кандидат медицинских наук; Хромачева Р.П., кандидат биологических наук; Чернявский М.Н., профессор; Штанчаева С.М., кандидат биологических наук.

В составлении фармакопейных статей ГФ XI выпуска 2 принимали участие следующие учреждения:

- Всесоюзный институт лекарственных растений (ВИЛР) Министерства медицинской и микробиологической промышленности;

- Всесоюзный научно - исследовательский институт химии и технологии лекарственных средств (ВНИИХТЛС) Министерства медицинской и микробиологической промышленности;

- Всесоюзный научно - исследовательский институт фармации (ВНИИФ) Министерства здравоохранения СССР;

- Государственный научно - исследовательский институт по стандартизации и контролю лекарственных средств (ГНИИСКЛС) Министерства здравоохранения СССР;

- Государственный научно - исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л. А. Тарасевича Министерства здравоохранения СССР;

- Всесоюзный научно - исследовательский институт антибиотиков (ВНИИА) Министерства медицинской и микробиологической промышленности;

- Всесоюзный научно - исследовательский институт технологии кровезаменителей и гормональных препаратов (ВНИИТКГП) Министерства медицинской и микробиологической промышленности;

- Первый Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. И. М. Сеченова (I ММИ) Министерства здравоохранения СССР;

- Всесоюзный научно - исследовательский институт биотехнологии Министерства медицинской и микробиологической промышленности;

- Научно - производственное объединение "Витамины" Министерства медицинской и микробиологической промышленности;

- Всесоюзный научно - исследовательский институт дезинфекции и стерилизации (ВНИИДиС) Министерства здравоохранения СССР;

- ордена Ленина Институт биофизики Министерства здравоохранения СССР;

- Всесоюзный научно - исследовательский институт медицинских полимеров Министерства медицинской и микробиологической промышленности;

- Ленинградский химико - фармацевтический институт;

- Харьковский фармацевтический институт;

- Пермский Государственный фармацевтический институт;

- Томский ордена Трудового Красного Знамени государственный медицинский институт;

Пятигорский государственный фармацевтический институт.

 

ВВЕДЕНИЕ

 

Выпуск 2 ГФ XI включает 2 раздела: "Общие методы анализа" и "Лекарственное растительное сырье".

В раздел "Общие методы анализа" включено 40 статьей, из них 6 - впервые: "Определение активности ферментных препаратов", "Определение белка в ферментных препаратах", "Методы количественного определения витаминов в лекарственных формах", "Аэрозоли", "Суспензии" и "Испытание на микробиологическую чистоту".

Остальные статьи переработаны и дополнены с учетом современных достижений в области анализа лекарственных средств. Так, в статью "Стерилизация" впервые дополнительно введен метод стерилизации через мембранные и глубинные фильтры, а также радиационный метод.

В статье "Определение измельченности порошков и сита" впервые наряду с шелковой тканью для сит предусмотрено использование капроновой ткани. В статье дается характеристика сит, используемых для проведения анализа при определении измельченности лекарственного растительного сырья.

В статье "Определение цинка в препаратах инсулина" вместо фотоколориметрического метода с дитизоном введен спектрофотометрический метод с цинконом и атомно - абсорбционный. В статье "Определение консервантов в гормональных препаратах" для определения фенола и нипагина впервые введен метод газовой хроматографии.

В статье "Стандартные образцы" даны определения терминов "Государственные стандартные образцы" (ГСО), "Рабочие стандартные образцы" (РСО) и "Стандартные образцы веществ - свидетелей" с указанием областей их применения и требований к их качеству.

Статья "Титрованные растворы" переработана в связи с введением в действие системы СИ и рекомендациями ИЮПАК. Основной единицей количества вещества в системе СИ является моль, поэтому "нормальные" растворы переведены в "молярные". В этой статье в разделе "Общие замечания" приведены определения молярности, титра, моля, расшифровка термина "условная частица" (УЧ), основные указания по приготовлению и хранению молярных растворов.

Статья "Индикаторы" переработана и уточнена: введено определение понятия "индикаторы", требования к приготовлению и хранению растворов индикаторов и сухих индикаторных смесей, правила техники безопасности при работе с индикаторами. Введен раздел "Индикаторная бумага"; приведена документация на индикаторы.

Статья "Реактивы" переработана и уточнена. Введено "Примечание", в котором указано, какую квалификацию реактива следует использовать при анализе лекарственных средств. Приведена документация на реактивы.

В связи с тем, что статьи "Титрованные растворы", "Индикаторы" и "Реактивы" 2-го выпуска Государственной фармакопеи СССР XI издания включают и титрованные растворы, индикаторы и реактивы, приведенные в 1-м выпуске, но в уточненном варианте, следует при пользовании частными фармакопейными статьями руководствоваться соответствующими статьями, помещенными во 2-м выпуске.

В общую статью "Гранулы" включено описание гранул, покрытых оболочкой; введено требование об определении влаги (в соответствии с частными статьями). Распадаемость и растворение гранул предусмотрено определять с использованием приборов, указанных в статье "Таблетки".

В статье "Инъекционные лекарственные формы" введено требование об изготовлении лекарственных средств для парентерального применения в условиях, максимально предотвращающих загрязнение готового продукта микроорганизмами и посторонними веществами.

Введено требование об изогидричности и изотоничности отдельных инъекционных растворов; уточнен вид вспомогательных веществ. Для некоторых вспомогательных веществ предусмотрены допустимые количества; например, для веществ, подобных хлорбутану, крезолу, фенолу, - до 0,5%; сульфитов - до 0,2%.

Включено требование о недопустимости наличия консервантов в лекарственных средствах для внутриполостных, внутрисердечных, внутриглазных введений или в инъекционных лекарственных формах, вводимых в спинномозговой канал, а также при разовой дозе, превышающей 15 мл. Запрещено введение суспензии в кровеносные и лимфатические сосуды, а также введение суспензий и эмульсий в спинномозговой канал.

В статье "Инъекционные лекарственные формы" предусмотрено определение прозрачности по сравнению с водой для инъекций или соответствующим растворителем.

Введены дополнительные требования к проведению испытания на токсичность, а также на пирогенность при объеме одноразовой дозы 10 мл и более, а также при меньшей дозе, если есть указание в частной статье.

Введены требования, касающиеся точности дозирования и допустимых отклонений массы вещества в дозе сухих лекарственных средств для парентерального применения. При массе содержимого 0,05 г и менее предусмотрено испытание однородности дозирования.

Для суспензий, вводимых парентерально, указано время седиментационной устойчивости, дано указание о прохождении в шприц через иглу N 0840.

Впервые введено требование об обязательном нанесении номера серии на ампулу (сосуд) любой вместимости.

В статью "Капли глазные" введен метод стерилизации и проверки стерильности; расширен перечень вспомогательных веществ. Приведены дополнительные требования к упаковке капель.

В статью "Капсулы" включено определение средней массы для капсул, содержащих 0,05 г и менее лекарственного вещества. Предусмотрено также испытание однородности дозирования, уточнено определение распадаемости и включено определение растворения (высвобождения).

Общая статья "Мази" предусматривает собственно мази, пасты, кремы, гели и линименты. Приведена классификация мазевых основ; при отсутствии указаний на основу рекомендовано выбирать ее с учетом физико - химической совместимости компонентов мази. В статью введено указание о стерильности глазных мазей. Введен микроскопический метод определения степени дисперсности твердой фазы в суспензионных мазях.

В статье "Суппозитории" предусмотрено нормирование массы суппозиториев для детей (от 0,5 до 1,5 г) и их размер (диаметром не более 1 см). Для суппозиториев, изготовленных на гидрофильных основах, введен новый показатель "растворение". Уточнены требования, касающиеся определения отклонения массы суппозитория от средней величины. Для суппозиториев, изготовленных на полиэтиленоксидных основах, включено требование о необходимости смачивания суппозиториев перед введением в полость тела.

Статья "Таблетки" дополнена требованиями к таблеткам для парентерального применения и указанием о стерильности таблеток для имплантации. Уточнен перечень вспомогательных веществ. Введена допустимая норма содержания аэросила.

Уточнены требования к колебаниям средней массы таблеток и к содержанию лекарственных веществ. Включено испытание однородности дозирования для таблеток без оболочки с содержанием 0,05 г и менее лекарственного вещества и для таблеток, покрытых оболочкой, с содержанием лекарственного вещества 0,01 г и менее. Введено определение прочности таблеток без оболочки на истирание.

Уточнено определение распадаемости и включено определение растворения (высвобождения).

В статье "Биологические методы оценки активности лекарственных растений и препаратов, содержащих сердечные гликозиды" дано общее описание методов биологической оценки на лягушках, кошках и голубях, а детальное описание методик определения биологической активности каждого из лекарственных растений и препаратов, содержащих сердечные гликозиды, дается в частных фармакопейных статьях.

Статистическая обработка результатов биологических испытаний проводится с учетом требований ГФ XI, вып. 1, ст. "Статистическая обработка результатов химического эксперимента и биологических испытаний".

В статью "Определение биологической активности инсулина" наряду с феррицианидным методом впервые введен глюкозооксидазный метод определения глюкозы в крови как наиболее специфичный и широко распространенный.

В статью "Испытание на токсичность" по сравнению со статьей ГФ Х внесены некоторые изменения и дополнения, связанные с постоянно возрастающими требованиями к качеству лекарственных средств и соответственно стандартизации условий их испытания. Увеличена масса животных, на которых проводят испытание (и первоначальное, и повторное). Для более строгой стандартизации результатов испытаний указаны условия содержания животных, а также срок наблюдения за ними (48 ч). В статью включен раздел "Отбор проб".

В статью "Испытание на пирогенность" введено указание на недопустимость использования кроликов - альбиносов. Введена проверка на реактивность кроликов, впервые предназначаемых для испытания лекарственных средств. Уточнен раздел о возможности повторного использования кроликов для определения пирогенности.

Раздел "Методы микробиологического контроля лекарственных средств" включает статьи "Испытание на стерильность", "Питательные среды", "Испытание на микробиологическую чистоту" и

"Количественное определение микроорганизмов". В статьях унифицированы отбор проб для анализа, температура инкубации, методы определения антимикробного действия препаратов, учет результатов и т. д.

Введен метод мембранной фильтрации при определении стерильности лекарственных средств, обладающих выраженным антимикробным действием, и лекарственных средств, выпускаемых в емкостях более 100 мл.

Существенно переработана и дополнена статья "Испытание на стерильность". Для определения этого показателя внесены две питательные среды (тиогликолевая и Сабуро), увеличено время инкубации посевов до 14 сут.

В статье "Испытание на микробиологическую чистоту" предусмотрено определение в нестерильных лекарственных средствах общего числа бактерий и грибов, а также выявление контаминирующей флоры - представителей кишечной палочки и стафилококка, наличие которых исключается. Приведены пределы допустимой микробной загрязненности в отношении бактерий и грибов.

Переработана и дополнена статья "Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар", в которой приведены два метода (трехдозовый и с использованием стандартной кривой) и даны условия определения.

Во второй раздел "Лекарственное растительное сырье" включены одна общая и 83 частных статьи на лекарственное растительное сырье, широко используемое в медицинской практике для приготовления настоев трав и отваров, а также для получения лекарственных средств в промышленном производстве.

По сравнению с Х изданием Государственной фармакопеи СССР значительно расширена номенклатура лекарственного растительного сырья, включены виды, не вошедшие в предыдущие издания, а также новые виды, разрешенные к медицинскому применению: корневища с корнями родиолы розовой, побеги багульника болотного, шишки ели обыкновенной, морская капуста, корневища с корнями марены и др.

По некоторым видам лекарственного растительного сырья наряду с применяемыми включены другие ботанические виды этого же рода, разрешенные к медицинскому применению (например, различные виды боярышника, шиповника).

Название сырья дано во множественном числе (листья, корни и т. д.).

Номенклатура названий производящих растений унифицирована и приведена в соответствие с их современными научными русскими и латинскими названиями (ст. 3 правил "Международного Кодекса ботанической номенклатуры, издания 1980 г.). В ряде случаев изменилась трактовка таксономического объема некоторых родов и видов: крупные полиморфные таксоны рассматриваются как более узкие (Padus avium = P. avium + Р. asiatica) и, наоборот, ранее понимавшиеся как обособленные близкородственные таксоны объединены в виды или роды укрупненного объема (Aralia mandshurica) --> A. elata). Вместе с тем, учитывая сложившиеся традиционные названия сырья, в настоящем издании фармакопеи принято решение в основном не изменять их, а в ряде случаев давать второе латинское название по роду и виду производящего растения.

Названия семейств Gramineae, Cruciferae, Leguminosae, Umbelliferae, Labiatae, Compositae заменены соответственно названиями Poaceae, Brassicaceae, Fabaceae, Apiaceae, Lamiaceae, Asteraceae (ст. 185 МКБН).

В целях унификации требований к лекарственному растительному сырью на основании проведенных исследований в ряд статей впервые включен раздел "Микроскопия" с описанием основных диагностических признаков сырья (цветки липы, цветки василька синего, семена тыквы и др.). Для остальных статей раздел "Микроскопия" переработан и уточнен.

В некоторые статьи ("Корни ревеня", "Корневища и корни марены" и др.) впервые включен метод люминесцентной микроскопии.

Впервые во многие статьи включены методики качественной идентификации и методы количественного определения действующих веществ (например, алкалоидов в траве чистотела, флавоноидов - в плодах и цветках боярышника, полисахаридов - в траве череды, эфирного масла и ледола - в побегах багульника болотного и др.).

Включена общая статья "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья", устанавливающая общие требования как к упаковке сырья "ангро", так и фасованной продукции. В связи с этим в частных статьях на сырье, упакованное в мешки и тюки, указаны только масса и упаковочный материал, а для фасованного сырья указаны его масса, номер и тип пачки, тип бумажного пакета, номер полиэтиленового пакета.

По сравнению с выпуском 1 ГФ XI издания в выпуске 2 вместо двух терминов "резаное" и "дробленое" сырье используется один - "измельченное сырье".

Кроме того, в выпуск 2 включены статьи: "Таблица капель" и "Таблица изотонических эквивалентов по натрия хлориду".

 

ОБЩИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА

 

ОТБОР ПРОБ (ВЫБОРОК) ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

 

Заключение о качестве лекарственных средств производится на основании анализа пробы (выборки), отобранной в соответствии с приведенными ниже требованиями, если нет специальных указаний в частных статьях.

 

Общие правила

 

Пробы (выборки) отбирают от отдельных серий (партий) лекарственного средства.

Упаковочную тару (ящики, бутыли, барабаны, коробки и т. д.) подвергают наружному осмотру для проверки соответствия требованиям нормативно - технической документации.

Пробы (выборки) отбирают только из неповрежденных, укупоренных и упакованных согласно нормативно - технической документации упаковочных единиц.

При отборе проб (выборок) необходимо принимать меры предосторожности, учитывая токсичность, взрывоопасность, огнеопасность, гигроскопичность и другие свойства лекарственных средств, а также предохранять их от загрязнений.

При отборе проб (выборок) ядовитых и наркотических лекарственных средств следует руководствоваться правилами работы, предусмотренными соответствующими приказами, инструкциями и положениями, утвержденными Министерством здравоохранения СССР, а также с учетом требований частных статей на эти лекарственные средства.

Для проведения испытания лекарственных средств на соответствие требованиям нормативно - технической документации проводят многоступенчатый отбор проб (выборок).

При многоступенчатом отборе пробу (выборку) образуют по ступеням и продукцию в каждой ступени отбирают случайным образом в пропорциональных количествах из единиц, отобранных в предыдущей ступени. Число ступеней определяется видом упаковки.

I ступень: отбор единиц упаковочной тары (ящиков, коробок, мешков и др.).

II ступень: отбор упаковочных единиц, находящихся в упаковочной таре (коробок, флаконов, банок и др.).

III ступень: отбор продукции в первичной упаковке (ампул, флаконов, туб, контурных упаковок и др.).

    Для расчета отбора  количества  продукции  на  каждой  ступени

                         ---

используют формулу 0,4 \/ n,   где  n - количество     упаковочных

единиц данной  ступени  одной   серии   (партии).   Полученное   в

результате  подсчета  по формуле дробное число округляют в сторону

увеличения до целого числа,  оно должно быть не менее 3 и не более

30.

В случае недостаточного количества упаковочных единиц для проведения испытания повторно отбирают упаковочные единицы, как указано выше.

Из отобранных на последней ступени упаковочных единиц после контроля по внешнему виду берут пробу (выборку) для исследования препарата на соответствие требованиям нормативно - технической документации в количестве, необходимом для 4 полных физико - химических анализов (для контролирующих организаций - на 6 полных физико - химических анализов).

Порядок отбора проб (выборок) для контроля лекарственных средств на стерильность, пирогенность, токсичность, наличие веществ гистаминного действия и на другие специальные виды контроля указан в частных и соответствующих общих статьях ГФ XI.

Отобранную пробу (выборку) упаковывают и хранят в соответствии с требованиями нормативно - технической документации на лекарственное средство.

 

Отбор проб лекарственных средств

в расфасовке "ангро"

 

Проба лекарственных средств из расфасовки "ангро" должна представлять собой объединенные точечные пробы, взятые примерно в равных количествах.

Отбор точечных проб производят из верхнего, среднего и нижнего слоев каждой упаковочной единицы. Убеждаются в однородности точечных проб (внешний осмотр), затем смешивают их.

Отдельными точечными пробами следует пользоваться при проверке однородности сыпучих, вязких и гетерогенных препаратов.

При отборе проб сыпучих и вязких лекарственных средств точечные пробы отбирают пробоотборником, изготовленным из материала, не реагирующего с данным лекарственным средством.

Для отбора пробы жидких лекарственных средств их сначала тщательно перемешивают. Точечные пробы отбирают с помощью трубок, изготовленных из жесткого материала, не реагирующего с данным лекарственным средством.

В случае, если перемешивание жидкости затруднено (большие емкости), точечные пробы отбирают без перемешивания из разных слоев.

 

Отбор выборок готовых лекарственных

средств (штучной продукции)

 

Выборка готовых лекарственных средств должна состоять из ненарушенных заводских упаковочных единиц.

Отбор выборок готовых лекарственных средств для инъекций на отсутствие в них механических включений должен производиться согласно соответствующей документации, утвержденной Министерством здравоохранения СССР.

Отбор выборки аэрозолей, азота закиси проводят в соответствии с требованиями частных статей.

 

Примечание. Серия (партия) - количество продукции одного наименования, произведенной в одном технологическом цикле или в течение определенного интервала времени, в одних и тех же условиях и одновременно представленной на контроль. Качество серии (партии) должно быть удостоверено одним документом.

Проба - количество нештучной продукции, отобранной из контролируемой серии (партии), состоящее из нескольких точечных проб.

Выборка - количество штучной продукции, отобранной из контролируемой серии (партии).

Упаковочная единица - упаковка, содержащая установленное количество продукции.

Точечная проба - количество нештучной продукции, отобранной одномоментно.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИЗМЕЛЬЧЕННОСТИ ПОРОШКОВ И СИТА

 

Измельченность порошков определяется соответствующим размером отверстия сита, через которое полностью проходит измельченный порошок.

По измельченности порошки различают:

- крупные;

- среднекрупные;

- среднемелкие;

- мелкие;

- мельчайшие;

- наимельчайшие.

Порошки, для которых не указана измельченность, должны иметь размер частиц не более 0,150 мм.

Для определения измельченности порошков проводят ситовой анализ с помощью сит с размерами отверстий, указанными в табл. 1.

 

Таблица 1

 

Классификация измельченных порошков и сита

 

┌───────────────┬────────────────┬────────────────┬───────────────┬──────────┐

│ Наименование  │Номер материала,│   Материал,      Номинальный    Форма  

   порошка       из которого     из которого       размер     │отверстий │

               │изготовлено сито│изготовлено сито│  отверстий,            

                                 и номер НТД         мм                

├───────────────┼────────────────┼────────────────┼───────────────┼──────────┤

│Крупный порошок│20              │Полотна решетные│2,0 +/- 0,070  │Круглая  

                               │ГОСТ 214-83                             

│То же          │10              │То же           │1,0 +/- 0,070       >>  

│>> >>          │05              │>> >>           │0,5 +/- 0,050       >>  

                               │Сетка тканая   с│                        

                               │квадратными                             

                               │ячейками                                

│>> >>          │1,898           │ТУ 14-4-1063-80 │1,898 +/- 0,171│Квадратная│

│>> >>          │0,990           │То же           │0,990 +/- 0,089│    >>   

│>> >>          │0,472           │>> >>           │0,472 +/- 0,043│    >>   

│Среднекрупный  │21 (облегченная)│Ткани   шелковые│0,310 +/- 0,040│Много-   

│порошок                        │для сит                        │угольная 

                               │ГОСТ 4403-77                            

│То же          │210   (утяжелен-│То же           │0,300 +/- 0,040│То же    

               │ная)                                                    

│>> >>          │250   (утяжелен-│>> >>           │0,250 +/- 0,035│    >>   

               │ная)                                                    

│Среднекрупный  │23              │Ткани капроновые│0,329 +/- 0,032│Квадратная│

│порошок                        │для сит                                 

                               │ОСТ 17-46-82                            

│То же          │25              │То же           │0,294 +/- 0,031│    >>   

│Среднемелкий   │32 (облегченная)│Ткани   шелковые│0,200 +/- 0,030│Много-   

│порошок                        │для сит                        │угольная 

                               │ОСТ 4403-77                             

│То же          │35              │Ткани капроновые│0,219 +/- 0,022│Квадратная│

                               │ для сит                                

                               │ГОСТ 17-46-82                           

│>> >>          │38              │То же           │0,195 +/- 0,021│    >>   

│Мелкий порошок │35 (облегченная)│Ткани   шелковые│0,160 +/- 0,025│Много-   

                               │для сит                        │угольная 

                               │ОСТ 4403-77                             

│То же          │38 (облегченная)│То же           │0,150 +/- 0,025│    >>   

│>> >>          │46              │Ткани капроновые│0,156 +/- 0,016│Квадратная│

                               │для сит                                 

                               │ОСТ 17-46-82                            

               │49,490          │То же           │0,143 +/- 0,015│    >>   

│Мельчайший     │46 (облегченная)│Ткани   шелковые│0,120 +/- 0,020│Много-   

│порошок                        │для  сит                       │угольная 

                               │ГОСТ 4403-77                            

│То же          │58,580          │Ткани капроновые│0,122 +/- 0,013│Квадратная│

                               │для сит                                 

                               │ОСТ 17-46-82                             

│Наимельчайший  │61 (облегченная)│Ткани   шелковые│0,090 +/- 0,015│Много-   

│порошок                        │для сит                        │угольная 

                               │ГОСТ 4403-77                            

│То же          │76 (облегченная)│То же           │0,065 +/- 0,015│    >>   

               │73,730          │Ткани капроновые│0,093 +/- 0,009│Квадратная│

                               │для сит                                 

                               │ГОСТ 17-46-82                           

└───────────────┴────────────────┴────────────────┴───────────────┴──────────┘

 

Таблица 2

 

Характеристика сит, используемых при анализе

лекарственного растительного сырья

 

┌─────────────────┬────────────────┬───────────────┬─────────────┐

│Номер материала, │   Материал,      Номинальный     Форма    

  из которого      из которого        размер      отверстий 

│изготовлено сито │изготовлено сито│ отверстий, мм │            

├─────────────────┼────────────────┼───────────────┼─────────────┤

│100              │Полотна решетные│10,0 +/- 0,110 │Круглая     

                 │ГОСТ 214-83                                

│90               │То же           │9,0   +/- 0,110│     >>     

│80               │>> >>           │8,0   +/- 0,110│     >>     

│70               │>> >>           │7,0   +/- 0,110│     >>     

│60               │>> >>           │6,0   +/- 0,090│     >>     

│50               │>> >>           │5,0   +/- 0,090│     >>      

│40               │>> >>           │4,0   +/- 0,090│     >>     

│30               │>> >>           │3,0   +/- 0,070│     >>     

│20               │>> >>           │2,0   +/- 0,070│     >>     

│10               │>> >>           │1,0   +/- 0,070│     >>     

│0,5              │>> >>           │0,5   +/- 0,050│     >>     

│21 (облегченная) │Ткани шелковые  │0,310 +/- 0,040│Многоугольная│

                 │для сит                                    

                 │ГОСТ 4403-77                               

│250 (утяжеленная)│То же           │0,250 + 0,035       >>     

│32 (облегченная) │                │0,200 + 0,030       >>     

│35 (облегченная) │                │0,160 + 0,025       >>     

└─────────────────┴────────────────┴───────────────┴─────────────┘

 

Крупные, среднекрупные и среднемелкие порошки в количестве 25-100 г помещают на соответствующее сито, снабженное плотно пригнанными приемным лотком и крышкой, встряхивают в течение 10 мин, периодически постукивая по ситу. Для мелких, мельчайших и наимельчайших порошков навеска образца не должна превышать 25 г, сито встряхивают в течение 20 мин.

Если порошки закупоривают отверстия во время просеивания, допускается осторожно прочищать нижнюю поверхность сита.

Могут быть использованы механические сита.

При просеивании крупные порошки должны полностью проходить сквозь сито с размером отверстии 2 мм и не более 40% их частиц должно проходить сквозь сито с размером отверстий 0,310 мм.

Среднекрупные, среднемелкие, мелкие, мельчайшие и наимельчайшие порошки должны полностью проходить сквозь сито с указанным размером отверстий.

В случае необходимости в частных статьях указывают сито с размером отверстий, соответствующим измельченности порошка.

 

СТЕРИЛИЗАЦИЯ

 

Стерилизация - это процесс умерщвления в объекте или удаления из него микроорганизмов всех видов, находящихся на всех стадиях развития.

Для стерилизации используют следующие методы:

- термические - паровой и воздушный;

- химические - газовый и стерилизацию растворами;

- стерилизация фильтрованием;

- радиационный метод стерилизации.

Изделия из стекла, фарфора, металла, полимерных материалов перед стерилизацией подвергают предстерилизационной очистке.

 

Термические методы стерилизации

 

Паровой метод стерилизации осуществляют насыщенным водяным паром при избыточном давлении 0,11 МПа (1,1 кгс/кв. см) и температуре 120 град. С; 0,20 МПа (2 кгс/кв. см) и температуре 132 град. С.

Стерилизацию проводят в паровых стерилизаторах. Для достижения максимальной эффективности процесса стерилизации необходимо полное удаление воздуха из стерилизационной камеры и обрабатываемых объектов, а также правильное размещение последних, обеспечивающее свободное проникновение к ним пара.

Стерилизация паром при температуре 120 град. С рекомендуется для растворов лекарственных веществ. Время стерилизационной выдержки зависит от физико - химических свойств препарата, объема раствора и используемого оборудования.

 

       Объем образца, мл               Минимальное время

                                       стерилизационной

                                         выдержки, мин

 

              До 100                         8

       От 100 до 500                        12

       >> 500 >> 1000                       15

 

Стерилизацию растворов лекарственных веществ для инъекций проводят в герметично укупоренных, предварительно простерилизованных флаконах или ампулах.

Жиры и масла в герметично укупоренных сосудах стерилизуют при 120 град. С в течение 2 ч.

Этим методом стерилизуют также изделия из стекла, фарфора, металла, перевязочные и вспомогательные материалы (вата, марля, бинты, фильтровальная бумага, пергамент, спецодежда и др.). Время стерилизационной выдержки при температуре 120 град. С - 45 мин, при 132 град. С - 20 мин. Для стерилизации изделий из резины следует использовать первый из указанных режимов.

Стерилизацию перечисленных объектов проводят в стерилизационных коробках или в двухслойной упаковке из бязи, пергамента и др.

В исключительных случаях допускается стерилизация при температуре ниже 120 град. С. Конкретизация отдельных режимов применительно к определенному объекту стерилизации должна быть обоснована и указана в нормативно - технической документации.

Воздушный метод стерилизации осуществляют сухим горячим воздухом в воздушных стерилизаторах при температуре 160, 180 или 200 град. С.

Эффективность этого метода стерилизации зависит от температуры, времени, степени теплопроводности стерилизуемых объектов и правильности расположения их внутри стерилизационной камеры для обеспечения свободной циркуляции горячего воздуха.

Воздушный метод используют для стерилизации термостойких порошкообразных веществ (натрия хлорида, окиси цинка, талька, белой глины и др.).

 

   Масса образца, г       Температура,       Минимальное время

                            град. С          стерилизационной

                                             выдержки, мин

 

          До 25               180                   30

                              200                   10

   От 25  до 100              180                   40

                              200                   20

   >> 100 >> 200              180                   60

                              200                   30

 

   Масса образца, г       Температура,       Минимальное время

                            град. С          стерилизационной

                                             выдержки, мин

 

           До 100             180                   30

                              200                   15

    От 100 до 500             180                   40

                              200                   20

 

Изделия из стекла, металла, силиконовой резины, фарфора, установки для стерилизующего фильтрования с фильтрами и приемники фильтрата стерилизуют при 180 град.С в течение 60 мин или при 160 град. С в течение 2,5 ч.

Допускается использование более высоких температур нагрева при соответствующем уменьшении времени стерилизационной выдержки, обеспечивающих стерильность и сохранность объекта. Режим должен быть обоснован и указан в нормативно - технической документации.

Контроль параметров и эффективности термических методов стерилизации осуществляют с помощью контрольно - измерительных приборов, химических и биологических тестов.

В качестве химического теста стерилизации используют вещества, изменяющие свой цвет или физическое состояние при определенных параметрах стерилизации.

Бактериологический контроль осуществляют с помощью биотеста стерилизации. Биотест стерилизации - объект из установленного материала, обсемененный тест - микроорганизмами, предназначенный для контроля эффективности стерилизации определенным стерилизующим средством.

Для приготовления биотестов могут быть использованы тест - микроорганизмы: чистые культуры спорообразующих микроорганизмов В. subtilis, В. stearothermophilus и др.

 

Химические методы стерилизации

 

Для газовой стерилизации используют окись этилена или ее смесь с различными флегматизаторами: бромистым метилом, двуокисью углерода, хладонами (фреонами) и др. Стерилизацию проводят в газовых стерилизаторах или микроанаэростатах (портативный аппарат) при следующих режимах:

- окись этилена - стерилизующая доза 1200 мг/куб. дм, температура стерилизации не менее 18 град. С, относительная влажность 80%, время стерилизационной выдержки - 16 ч (портативный аппарат);

- смесь ОБ (смесь окиси этилена и бромистого метила в весовом соотношении 1:2,5):

а) стерилизующая доза 2000 мг/куб. дм, температура стерилизации 55 град. С, относительная влажность 80%, время стерилизационной выдержки - 4 ч;

б) стерилизующая доза 2000 мг/куб. дм, температура стерилизации не менее 18 град. С, время стерилизационной выдержки - 16 ч при той же относительной влажности (портативный аппарат).

Допускается использование других режимов газовой стерилизации, обеспечивающих стерильность и сохранность объекта. Режим должен быть обоснован и указан в нормативно - технической документации.

Стерилизуемые изделия упаковывают в пакеты из полиэтиленовой пленки толщиной от 0,06 до 0,2 мм, пергамента и др. Метод рекомендован для изделий из резины, полимерных материалов, стекла, металла.

В связи с токсичностью окиси этилена и бромистого метила применение стерилизованных этими газами изделий допускается только после их дегазации, т. е. выдержки в вентилируемом помещении до допустимых остаточных количеств, указанных в нормативно - технической документации.

Условия дегазации зависят от назначения, способа применения, размеров изделий, материала изделия и упаковки и указываются в нормативно - технической документации на изделие.

Контроль параметров и эффективности газовой стерилизации осуществляют с помощью контрольно - измерительных приборов, химических и биологических тестов.

Для химической стерилизации растворами используют перекись водорода и надкислоты.

Эффективность стерилизации растворами зависит от концентрации активно действующего вещества, времени стерилизационной выдержки и температуры стерилизующего раствора.

При стерилизации 6% раствором перекиси водорода температура стерилизующего раствора должна быть не менее 18 град.С, время стерилизационной выдержки - 6 ч; при температуре 50 град. С - 3 ч.

При стерилизации 1% раствором дезоксона-1 (по надуксусной кислоте) температура стерилизующего раствора должна быть не менее 18 град.С, время стерилизационной выдержки-45 мин.

Допускается использование других стерилизующих средств, обеспечивающих стерильность и сохранность объекта. Режим должен быть обоснован и указан в нормативно - технической документации.

Химическую стерилизацию растворами проводят в закрытых емкостях из стекла, пластмассы или емкостях, покрытых неповрежденной эмалью, при полном погружении изделия в раствор на время стерилизационной выдержки. После этого изделие должно быть промыто стерильной водой в асептических условиях.

Метод рекомендуется для изделий из полимерных материалов, резины, стекла, коррозионно - стойких металлов.

Контроль параметров стерилизации растворами химических препаратов проводят химическим и физическим методами, определяя содержание активного действующего вещества в исходном и рабочем растворах, а также температуру рабочего раствора.

 

Стерилизация фильтрованием

 

Растворы термолабильных веществ стерилизуют фильтрованием с помощью мембранных и глубинных фильтров, задерживающих микроорганизмы и их споры. Мембранные фильтры характеризуются ситовым механизмом задержания и постоянным размером пор при эксплуатации. Максимальный диаметр пор стерилизующего мембранного фильтра не превышает 0,3 мкм.

Глубинные фильтры характеризуются сложным механизмом задержания (ситовым, адсорбционным, инерционным) и в большинстве случаев непостоянным размером пор. Для мембранных фильтров указывается в паспорте "точка пузырька" (минимальное давление газа, необходимое для вытеснения жидкости из фильтра) - величина, непосредственно связанная с максимальным диаметром пор в фильтре.

При стерилизации фильтрованием перед стерилизующим фильтром помещают один или несколько префильтров. Поры префильтрата больше пор фильтра или равны им.

Глубинные фильтры и префильтры, содержащие асбестовые и стеклянные волокна, как правило, не должны применяться для стерилизации лекарственных средств, вводимых парентерально. В случае их использования после них должен быть установлен стерилизующий мембранный фильтр.

Перед началом фильтрования и после него проверяют герметичность собранной установки и целостность мембранного фильтра, например, путем определения "точки пузырька".

Глубинные фильтры с помощью этого теста не проверяют. Фильтрование проводят, применяя положительное давление (до 0,7 МПа для мембранных фильтров) с нестерильной стороны установки. При использовании глубинных фильтров необходимо строго соблюдать указанные в паспорте температуру, рН, давление. Следует избегать гидравлических ударов. Продолжительность фильтрования не должна превышать 8 ч.

Стерилизацию фильтрованием и розлив раствора проводят в асептических условиях. Эффективность стерилизации фильтрованием проверяют прямым посевом пробы фильтрата в питательную среду.

 

Радиационный метод стерилизации

 

Облучение объектов в конечной упаковке производят на гамма - установках, ускорителях электронов и других источниках ионизирующего излучения дозой 25 кГр (2,5 Мрад) или другими дозами в зависимости от конкретных условий (микробная обсемененность продукции до стерилизации, радиорезистентность контаминантов, величина коэффициента надежности стерилизации). Стерилизацию проводят в соответствии со "Сводом правил, регламентирующих проведение в странах - членах СЭВ радиационной стерилизации материалов и изделий медицинского назначения" и "Сводом правил, регламентирующих проведение в странах - членах СЭВ радиационной стерилизации лекарственных средств" и утвержденными инструкциями на каждый вид изделия.

Радиационный метод стерилизации может быть рекомендован для изделий из пластмасс, изделий одноразового использования в упаковке, перевязочных материалов, некоторых лекарственных средств и других видов медицинской продукции.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЗОЛЫ

 

Около 1 г препарата или 3-5 г измельченного лекарственного растительного сырья (точная навеска) помещают в предварительно прокаленный и точно взвешенный фарфоровый, кварцевый или платиновый тигель, равномерно распределяя вещество по дну тигля. Затем тигель осторожно нагревают, давая сначала веществу сгореть или улетучиться при возможно более низкой температуре. Сжигание оставшихся частиц угля надо тоже вести при возможно более низкой температуре; после того как уголь сгорит почти полностью, увеличивают пламя.

При неполном сгорании частиц угля остаток охлаждают, смачивают водой или насыщенным раствором аммония нитрата, выпаривают на водяной бане и остаток прокаливают. В случае необходимости такую операцию повторяют несколько раз.

Прокаливание ведут при слабом красном калении (около 500 град. С) до постоянной массы, избегая сплавления золы и спекания ее со стенками тигля. По окончании прокаливания тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают.

 

Определение золы,

нерастворимой в хлористоводородной кислоте

 

К остатку в тигле, полученному после сжигания препарата или лекарственного растительного сырья, прибавляют 15 мл 10% раствора хлористоводородной кислоты, тигель накрывают часовым стеклом и нагревают 10 мин на кипящей водяной бане. К содержимому тигля прибавляют 5 мл горячей воды, обмывая ею часовое стекло. Жидкость фильтруют через беззольный фильтр, перенося на него остаток с помощью горячей воды. Фильтр с остатком промывают горячей водой до отрицательной реакции на хлориды в промывной воде, переносят его в тот же тигель, высушивают, сжигают, прокаливают, как указано выше, и взвешивают.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУЛЬФАТНОЙ ЗОЛЫ

 

Точную навеску препарата (около 1 г, если в соответствующей частной статье нет других указаний) помещают в предварительно прокаленный и точно взвешенный фарфоровый, кварцевый или платиновый тигель, смачивают 1 мл концентрированной серной кислоты и осторожно нагревают на сетке или песчаной бане до удаления паров серной кислоты. Затем прокаливают при слабом калении (около 500 град. С) до постоянной массы, избегая сплавления золы и спекания ее со стенками тигля. По окончании прокаливания тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают.

В случае трудного сгорания прибавление концентрированной серной кислоты и прокаливание повторяют.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ

 

Фермент - это белок, обладающий каталитическими свойствами.

Принцип, положенный в основу всех методов определения активности фермента (Е), заключается в регистрации скорости исчезновения субстрата (S) (т.е. вещества, на которое действует фермент) или скорости образования продуков реакции ([Р]).

 

Требования к условиям проведения ферментативной реакции

 

Ферментативная реакция должна проводиться в строго определенных условиях с учетом следующих факторов.

1. Начальная скорость реакции (V0). Типичная кинетическая кривая ферментативной реакции приведена на рис. 1. <*> Для каждой ферментативной реакции могут быть подобраны условия, при которых начальный участок кривой линеен, т.е. зависимость концентрации образовавшегося продукта или израсходованного субстрата от времени наблюдения (t) имеет прямо пропорциональный характер.

--------------------------------

<*> Рис. 1. Типичная кинетическая кривая.

На оси абсцисс - время наблюдения, на оси ординат - концентрация образовавшегося продукта. (Рисунок не приводится).

 

Под начальной скоростью реакции в этих условиях понимают скорость, соответствующую линейному участку, и определяют ее как тангенс угла наклона этого участка.

Поскольку длительность прямолинейного участка кинетической кривой от опыта к опыту несколько изменяется, время инкубации должно составлять не более 70% и не менее 20% времени соответствующего прямолинейного участка.

2. Концентрация субстрата ([S]). Скорость реакции зависит от концентрации субстрата вплоть до его насыщающей концентрации. Под насыщающей концентрацией понимают такую концентрацию субстрата, при которой скорость реакции перестает повышаться при дальнейшем увеличении концентрации субстрата (Рис. 2, а). <*> При проведении ферментативной реакции реакционная смесь должна содержать такое количество субстрата, которое обеспечит насыщение фермента в течение всего хода определения (количество субстрата, взятого для проведения ферментативной реакции, должно быть примерно на 30% выше значения точки насыщения).

После выбора насыщающей концентрации субстрата необходимо проверить, сохраняется ли при ней линейная зависимость [Р] от t.

В случае фермента, для которого характерно ингибирование субстратом (Рис. 2, б), <*> оптимальной концентрацией субстрата является та концентрация, при которой скорость реакции максимальна (точка перегиба на экспериментальной кривой зависимости скорости реакции от концентрации субстрата).

--------------------------------

<*> Рис. 2. Зависимость скорости реакции v от концентрации субстрата (S).

а - концентрация субстрата; б - фермент, для которого характерно ингибирование субстратом. (Рисунок не приводится).

 

3. Концентрация фермента ([Е]). Выбор необходимой концентрации фермента осуществляется экспериментально при помощи построения кривой зависимости скорости реакции от концентрации фермента. Используется участок прямолинейности так, чтобы выбранная точка отстояла не менее чем на 30% как от нижней, так и от верхней концентрации фермента, ограничивающих прямолинейный участок кривой (рис. 3). <*>

--------------------------------

<*> Рис. 3. Зависимость скорости реакции v от концентрации фермента (Е).

Используется участок прямолинейности так, чтобы выбранная точка отстояла не менее чем на 30% как от нижней (а), так и от верхней (б) концентрации фермента, ограничивающих прямолинейный участок кривой. (Рисунок не приводится).

 

После выбора концентрации фермента необходимо проверить, сохраняется ли при ней линейная зависимость [Р] от t при выбранном значении насыщающей концентрации субстрата.

4. Температура. Ферментативную реакцию рекомендуется проводить в термостате при температуре (37 +/-0,1) град. С. Предварительно каждый из реагентов необходимо прогреванием довести до 37 град. С.

5. рН. Типичная кривая, описывающая зависимость скорости ферментативной реакции от рН, для большинства ферментов приведена на рис. 4 <*>. Активность следует определять при оптимальном значении рН. Оптимальное значение рН должно быть определено при выбранных значениях концентрации фермента и насыщающей концентрации субстрата, температуре (37 +/-0,1) град. С и использовании буферного раствора того состава, который не ингибирует фермент.

--------------------------------

<*> Рис. 4. Зависимость скорости реакции v от значения рН. (Рисунок не приводится).

 

После выбора оптимального значения рН необходимо проверить, сохраняется ли при этом рН линейная зависимость [Р] от t при выбранных значениях концентрации фермента и насыщающей концентрации субстрата.

6. Кофакторы. Существуют ферменты, для проявления каталитических свойств которых необходимо присутствие кофакторов, например, коферментов - производных витаминов, ионов металлов и др.

Для определения оптимальной концентрации кофактора следует построить кривую зависимости скорости реакции от концентрации кофактора, аналогичную зависимости скорости реакции от концентрации субстрата, и по этой кривой выбрать насыщающую концентрацию кофактора.

После выбора насыщающей концентрации кофактора необходимо проверить, сохраняется ли при ней линейная зависимость [Р] от t.

Конкретные параметры ферментативной реакции указываются в частных статьях.

 

МЕТОДЫ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ РЕГИСТРАЦИИ

СКОРОСТИ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ РЕАКЦИИ

 

Скорость ферментативной реакции количественно можно измерить по убыли субстрата или по образованию продукта реакции. Предпочтительнее регистрировать скорость образования продукта, поскольку это обеспечивает большую точность определения.

Для количественной регистрации скорости ферментативной реакции используют методы, связанные с отбором проб из реакционной смеси, и регистрирующие методы, основанные чаще всего на спектральных свойствах субстрата или продукта реакции.

 

Определение белка

 

Определение содержания белка в препарате проводят одним из методов, приведенных в общей статье "Определение белка".

 

ЕДИНИЦЫ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ

 

Активность ферментов выражается в Международных единицах (ME) или единицах действия (ЕД).

ME - это такое количество фермента, которое при заданных условиях катализирует превращение одного микромоля субстрата за 1 мин (или одного микроэквивалента затронутых реакцией групп в тех случаях, когда атакуется более одной группы в каждой молекуле субстрата).

ЕД - это условная единица, величина которой указывается в частных статьях.

Нормируются:

Удельная активность препарата - выражается в единицах ферментативной активности фермента (ME или ЕД) на 1 мг препарата и на 1 мг белка (вторая величина характеризует чистоту препарата).

Доза выражается в единицах ферментативной активности (ME или ЕД) на единицу лекарственной формы.

 

Определение активности ферментных препаратов

в сравнении со стандартным образцом

 

С целью снижения погрешности методов определения ферментативной активности необходимо проводить определение ферментативной активности препарата в сравнении со стандартным образцом. Стандартным образцом является высокоочищенный ферментный препарат, качество которого отвечает требованиям соответствующей нормативно - технической документации.

Определение ферментативной активности испытуемого препарата и стандартного образца проводят в одинаковых условиях опыта.

Активность препарата (А) в соответствующих единицах (ME или ЕД) вычисляют по формуле:

 

                             Ас х Пс х К

                       А = ---------------

                                 Пр

 

где Ac - ферментативная активность стандартного образца в единицах (ME или ЕД) на миллиграмм белка или препарата; Пс - величина измеряемого параметра для стандартного образца; Пр - величина измеряемого параметра для испытуемого препарата; К - коэффициент, выравнивающий концентрации растворов испытуемого препарата и стандартного образца.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА В ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТАХ

 

Белки - высокомолекулярные природные органические вещества, построенные из L-аминокислот.

Для количественного определения белка используют колориметрические и спектрофотометрические методы, в некоторых случаях пользуются определением белка по содержанию общего азота в препарате.

 

1. Колориметрические методы определения белка

 

При определении белка в лекарственных препаратах при помощи колориметрических методов предварительно строят калибровочный график с использованием стандартного образца белка, указанного в частных статьях (бычьего сывороточного альбумина, сывороточного альбумина человека или аминокислоты тирозина).

При определении белка в испытуемых пробах соблюдают те же условия проведения реакций и измерения поглощения растворов, что и при построении калибровочного графика.

 

1. Определение белка с биуретовым реактивом

 

Метод основан на образовании в щелочной среде окрашенного в фиолетовый цвет комплекса ионов двухвалентной меди с пептидными связями молекулы белка.

Биуретовую реакцию нельзя проводить в присутствии солей аммония из-за образования медно - аммиачных комплексов.

1 мл раствора препарата, содержащего 1-10 мг испытуемого белка, помещают в пробирку, прибавляют 4 мл биуретового реактива, перемешивают и оставляют на 30 мин при комнатной температуре. Оптическую плотность раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны в диапазоне от 540 до 650 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь этих же реактивов без препарата.

Калибровочный график строят в пределах концентраций от 1 до 10 мг стандартного образца белка, измеряя оптическую плотность растворов при выбранной длине волны.

 

2. Микроопределение белка с реактивом Бенедикта

 

Принцип метода тот же, что и при определении белка с биуретовым реактивом.

2 мл раствора препарата, содержащего 0,1-2 мг испытуемого белка, помещают в пробирку, прибавляют 2 мл 6% раствора натра едкого, 0,2 мл реактива Бенедикта, перемешивают и оставляют на 15 мин при комнатной температуре. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при длине волны 330 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь этих же реактивов без препарата.

Калибровочный график строят в пределах концентраций от 0,1 до 2 мг стандартного образца белка, измеряя оптическую плотность раствора при 330 нм.

 

3. Определение белка по методу Лоури

 

Метод основан на образовании окрашенных продуктов ароматических аминокислот и цистеина с реактивом Фолина в сочетании с биуретовой реакцией на пептидные связи.

1 мл раствора препарата, содержащего 0,025-0,250 мг испытуемого белка, помещают в пробирку, прибавляют 2 мл реактива 1 и оставляют при комнатной температуре на 10 мин. Затем прибавляют 0,5 мл реактива Фолина, перемешивают и через 30-40 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 750 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь этих же реактивов без препарата.

Калибровочный график строят в пределах концентраций от 0,025 до 0,250 мг стандартного образца белка, измеряя оптическую плотность растворов при 750 нм.

 

4. Определение белка по методу Лоури

в модификации Сяткина

 

Метод Лоури в модификации Сяткина используют для определения содержания белка в препаратах с повышенным содержанием липо- и гликопротеидов.

0,1 мл раствора препарата, содержащего 0,5-2,5 мг испытуемого белка, помещают в пробирку, прибавляют 0,8 мл раствора натра едкого (1 моль/л) и 0,1 мл 1% раствора натрия дезоксихолата, затем прибавляют 4 мл реактива II, смесь перемешивают. После просветления раствора прибавляют 0,5 мл реактива Фолина, немедленно перемешивают и оставляют на 30 мин в темном месте при комнатной температуре. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при длине волны 750 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь этих же реактивов без препарата.

Калибровочный график строят в пределах концентраций от 0,5 до 2,5 мг стандартного образца белка, измеряя оптическую плотность растворов при 750 нм.

 

5. Определение белка по методу Бредфорд

 

Метод основан на образовании окрашенного в синий цвет комплекса красителя кумасси ярко - голубого G-250 с белком.

0,1 мл раствора препарата, содержащего 0,01-0,10 мг испытуемого белка, помещают в пробирку, прибавляют 5 мл реактива Бредфорд, перемешивают и оставляют при комнатной температуре в течение одинакового времени в интервале от 2 до 60 мин. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при длине волны 595 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь этих же реактивов без препарата.

Калибровочный график строят в пределах концентраций от 0,01 до 0,10 мг стандартного образца белка, измеряя оптическую плотность растворов при 595 нм.

 

6. Определение белка по методу Седмака

 

Принцип метода тот же, что и в методе Бредфорд. Метод применим для определения суммарного количества белков и полипептидов с молекулярной массой более 3000 дальтон.

1,5 мл раствора препарата, содержащего 0,010-0,150 мг испытуемого белка, помещают в пробирку, прибавляют 1,5 мл раствора кумасси ярко - голубого G-250, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре в течение одинакового времени в интервале от 5 мин до 3 ч. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при двух длинах волн: 620 и 465 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь этих же реактивов без препарата и кумасси ярко - голубого G-250.

Калибровочный график строят в пределах концентраций от 0,005 до 0,150 мг стандартного образца белка, измеряя оптическую плотность растворов при 620 и 465 нм и откладывая по оси ординат отношение оптических плотностей (D620/D465), по оси абсцисс - соответствующие значения концентрации растворов стандартного образца белка.

 

7. Определение белка по методу Флореса

 

Метод основан на образовании окрашенного в синий цвет комплекса белка с красителем бромфеноловым синим.

Комплекс устойчив в течение 8 ч.

0,1 мл раствора препарата, содержащего 0,01-0,08 мг испытуемого белка, помещают в пробирку, прибавляют 0,9 мл раствора бромфенолового синего, выдерживают при комнатной температуре в течение одинакового времени в интервале от 10 мин до 8 ч. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при длине волны 610 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь этих же реактивов без препарата.

Калибровочный график строят в пределах концентраций от 0,01 до 0,08 мг стандартного образца белка (почти прямолинейная зависимость), измеряя оптическую плотность растворов при 610 нм.

 

II.Спектрофотометрический метод определения белка

 

Спектрофотометрический метод определения белка основан на способности ароматических аминокислот (триптофан, тирозин и в меньшей степени фенилаланин) поглощать ультрафиолетовый свет с максимумом поглощения при 280 нм.

Условно принято считать, что при концентрации белка в растворе, равной 1 мг/мл, величина оптической плотности при 280 нм равна 1 при использовании кюветы с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют растворитель препарата.

Концентрация испытуемого белка в растворе должна быть от 0,05 до 2 мг/л.

Определению белка данным методом мешают присутствие нуклеиновых кислот и нуклеотидов (более 20%). В этом случае оптическую плотность одного и того же раствора измеряют при двух длинах волн - 260 и 280 нм; содержание белка Х (мг/мл) рассчитывают по формуле Калькара:

 

Х = 1,45 х D280 - 0,74 х D260.

 

III. Определение белка по содержанию общего азота

 

Определение белка по содержанию общего азота основано на том, что содержание азота в большинстве белков практически одинаково и может быть принято равным 16%. В том случае, если лекарственный препарат, кроме белка, содержит другие вещества, в состав которых входит азот, белок предварительно осаждают трихлоруксусной или хлорной кислотой. При нагревании органического соединения с концентрированной серной кислотой происходит его минерализация, азот превращается в аммония сульфат, и его можно определить количественно.

 

1. Микрометод Кьельдаля

 

Определение проводят в соответствии со статьей "Определение азота в органических соединениях" (ГФ XI, вып. 1, с. 180) со следующими дополнениями: навеску препарата, содержащую 10-20 мг испытуемого белка, помещают в колбу "в", затем осторожно прибавляют 0,25 г растертой смеси калия сульфата, меди сульфата и натрия селената, взятых в соотношении 20:5:8,5, и 2 мл концентрированной серной кислоты. Проводят минерализацию, нагревая колбу на горелке или плитке, пока раствор не станет прозрачным. После этого продолжают нагревание еще в течение 30 мин. В конце минерализации, когда вся вода испарится, прибавляют 1-2 капли пергидроля и продолжают нагревание в течение 10 мин до обесцвечивания раствора. Отгон титруют раствором хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Разность между количеством миллилитров раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) в испытуемом и контрольном опытах, умноженная на 0,14 г, соответствует количеству миллиграммов азота во взятой навеске. Принимая содержание азота в белке равным 16%, по количеству найденного азота рассчитывают количество белка в опытной пробе.

 

2. Определение белка с реактивом Несслера

 

Навеску препарата, содержащую около 10 мг белка, минерализуют по способу, описанному в микрометоде Кьельдаля. После минерализации пробу количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора водой до метки.

0,5-1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл воды, 2 мл реактива Несслера и доводят объем раствора водой до метки. Через 15 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь этих же реактивов без препарата.

Калибровочный график строят в пределах концентраций от 30 до 60 мкг азота с использованием в качестве стандартного образца аммония сульфата, высушенного до постоянной массы в эксикаторе над серной кислотой.

Принимая содержание азота в белке равным 16%, по количеству найденного азота рассчитывают количество белка в опытной пробе.

 

Примечания. Приготовление биуретового реактива: 0,75 г меди сульфата и 3 г натрия - калия тартрата растворяют в 250 мл воды в мерной колбе вместимостью 1 л, затем при энергичном перемешивании прибавляют 150 мл 10% раствора натра едкого, свободного от углекислоты, 1 г калия йодида, перемешивают и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор хранят в емкости из полиэтилена.

Приготовление реактива Бенедикта. 17,3 г натрия цитрата и 10 г натрия карбоната безводного растворяют при нагревании в 50 мл воды (не доводя до кипения), прибавляют 10 мл 17,3% раствора меди сульфата, перемешивают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Приготовление 17,3% раствора меди сульфата: 17,3 г меди сульфата растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Приготовление реактива I: состоит из двух растворов.

1. 4 г натра едкого растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, прибавляют 20 г натрия карбоната и доводят объем раствора водой до метки.

2. 1 г меди сульфата растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки; 2 г натрия тартрата (ГОСТ 5845-79, ч. д. а.) или натрия цитрата растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. Оба раствора сливают при перемешивании.

Реактивом I служит смесь 49 мл раствора 1 и 1 мл раствора

2. Готовят перед употреблением.

Приготовление реактива II. 1 мл раствора 2 помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят 2% раствором натрия карбоната до метки.

Приготовление 2% раствора натрия карбоната: 2 г натрия карбоната помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора до метки водой.

Приготовление 1% раствора натрия дезоксихолата:

1 г натрия дезоксихолата (ТУ 6-09-10-1292-78) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Приготовление реактива Бредфорд: 0,05 г кумасси ярко - голубого G-250 растворяют в мерной колбе вместимостью 500 мл в 25 мл 95% спирта, прибавляют 50 мл 85% раствора кислоты ортофосфорной и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор хранят в сосуде из оранжевого стекла не более 10 сут.

Приготовление раствора кумасси ярко - голубого G-250: 0,06 г кумасси ярко - голубого G-250 растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в растворе хлористоводородной кислоты (0,6 моль/л) и доводят объем раствора той же кислотой до метки, фильтруют. Оптическая плотность полученного раствора при длине волны 465 нм должна быть не менее 1,3 и не более 1,5.

Приготовление раствора бромфенолового синего:

0,0075 г бромфенолового синего водорастворимого (ТУ 6-09-3719-83) растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 15 мл 95% спирта, прибавляют 2,5 мл ледяной уксусной кислоты, перемешивают и доводят объем раствора водой до метки.

Приготовление натрий - цитратного буферного раствора рН 5,0: в колбу вместимостью 1 л помещают 400 мл воды, 5 мл кислоты хлористоводородной концентрированной, 41,7 г натрия цитрата, перемешивают при нагревании до полного растворения, затем прибавляют 1 г фенола, перемешивают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор хранят при температуре от 4 до 10 град. С в течение 15 сут.

Приготовление нингидринового реактива: в сосуд из оранжевого стекла вместимостью 1 л помещают 375 мл монометилового эфира этиленгликоля (ТУ 6-09-08-4398-77), прибавляют 125 мл натрий - ацетатного буферного раствора рН 5,5, при перемешивании на магнитной мешалке пропускают азот в течение 10 мин, затем прибавляют 10 г нингидрина и вновь пропускают азот в течение 10 мин, продолжая перемешивание на магнитной мешалке до полного растворения нингидрина. После этого прибавляют 0,19 г олова двухлористого 2-водного и перемешивают.

Хранят реактив в сосуде из оранжевого стекла при температуре от 4 до 10 град. С не более 15 сут.

Приготовление натрий - ацетатного буферного раствора рН 5,5: 82 г натрия ацетата плавленого (ТУ 6-09-246-70) растворяют при перемешивании в мерной колбе вместимостью 250 мл в 140 мл воды, прибавляют 25 мл ледяной уксусной кислоты и доводят объем раствора водой до метки.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИНКА В ПРЕПАРАТАХ ИНСУЛИНА

 

Спектрофотометрический метод. В две мерные колбы вместимостью 50 мл помещают: в одну - 5 мл препарата или раствора инсулина, или 1,5 мл надосадочной жидкости (для суспензии инсулина), в другую - 5 мл разбавленного раствора стандартного образца цинка. В каждую колбу прибавляют по 10 мл буферного раствора (рН 9,0), 3 мл раствора цинкона и доводят объем растворов водой до метки. Растворы перемешивают и через 1 ч измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 620 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм по сравнению с контрольным раствором, приготовленным с теми же реактивами.

Содержание цинка (X) в препарате или надосадочной жидкости в миллиграммах на 100 ЕД инсулина вычисляют по формуле:

 

                        D1 х 0,001 х 50 х 2,5

                    Х = ----------------------

                               D0 х V

 

где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора препарата или надосадочной жидкости; D0 - оптическая плотность разбавленного раствора стандартного образца цинка; 0,001 - содержание цинка в миллиграммах в 1 мл измеряемого разбавленного раствора стандартного образца цинка; 2,5 - количество препарата в миллилитрах, содержащего 100 ЕД инсулина (при содержании инсулина 40 ЕД в 1 мл препарата); V - объем препарата, раствора инсулина или надосадочной жидкости в миллилитрах, взятых для анализа.

 

Примечания. 1. Приготовление раствора инсулина: навеску инсулина, содержащую 400 ЕД, растворяют в растворе хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) в мерной колбе вместимостью 10 мл и доводят объем раствора этим же раствором хлористоводородной кислоты до метки.

2. Приготовление надосадочной жидкости суспензии: содержание флакона (5 мл) тщательно перемешивают, вносят в центрифужную пробирку и центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 4000-6000 об/мин.

3. Приготовление раствора стандартного образца цинка: 0,4400 г цинка сульфата растворяют в мерной колбе вместимостью 1 л в небольшом количестве свежепрокипяченной и охлажденной воды и доводят объем раствора этой же водой до метки. Раствор стандартного образца цинка содержит 0,1 мг цинка в 1 мл.

Срок годности раствора 14 сут, хранение при температуре 4 - 8 град. С.

4. Приготовление разбавленного раствора стандартного образца цинка: 10 мл раствора стандартного образца цинка помещают в колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до метки. Разбавленный раствор стандартного образца цинка содержит 0,01 мг цинка в 1 мл.

Раствор должен быть свежеприготовленным.

5. Приготовление раствора борной кислоты (0,2 моль/л) с калия хлоридом. 12,3670 г перекристаллизованной борной кислоты и 14,9110 г калия хлорида растворяют в свежепрокипяченной и охлажденной воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора этой же водой до метки.

Срок годности раствора 30 сут, хранение при температуре 4 - 8 град. С.

6. Приготовление буферного раствора рН 9,0 (потенциометрически): 50 мл раствора борной кислоты (0,2 моль/л) с калия хлоридом помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 21,3 мл раствора натра едкого (0,2 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до метки.

Раствор должен быть свежеприготовленным.

7. Приготовление раствора цинкона: 0,13 г цинкона (ТУ-6-0907-315-85 или фирмы "Хемапол", ЧССР) растирают в ступке с 2 мл раствора натра едкого (1 моль/л), количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до метки и фильтруют.

Раствор должен быть свежеприготовленным.

 

Определение цинка в препаратах инсулина с протамином. 5 мл тщательно перемешанного препарата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают; 5 мл полученного раствора и 5 мл разбавленного раствора стандартного образца цинка помещают в две другие мерные колбы вместимостью по 50 мл. В каждую колбу прибавляют по 1 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л), 10 мл буферного раствора (рН 9,0), 1 мл раствора натра едкого (0,1 моль/л) и 2 мл 0,01% раствора трипсина. Растворы перемешивают и выдерживают 10 мин при комнатной температуре, затем в каждую колбу приливают по 3 мл раствора цинкона и доводят объем раствора водой до метки. Полученные растворы перемешивают и через 1 ч измеряют оптическую плотность, как указано выше.

Содержание цинка (X) в препарате в миллиграммах на 100 ЕД инсулина вычисляют по формуле:

 

                      D1 х 0,001 х 50 х 2,5 х 50

                 Х = ----------------------------

                             D0 х 5 х 5

 

где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора препарата; Dо - оптическая плотность разбавленного раствора стандартного образца цинка; 0,001 - содержание цинка в миллиграммах в 1 мл измеряемого разбавленного раствора стандартного образца цинка; 2,5 - количество препарата в миллилитрах, содержащего 100 ЕД инсулина (при содержании инсулина 40 ЕД в 1 мл препарата).

 

Примечания. 1. Приготовление 0,01% раствора трипсина: 0,01 г трипсина растворяют в растворе хлористоводородной кислоты (0,001 моль/л) в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора этим же раствором хлористоводородной кислоты до метки.

Раствор должен быть свежеприготовленным.

2. Приготовление раствора хлористоводородной кислоты (0,001 моль/л): 100 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) точно отмеривают из бюретки в мерную колбу вместимостью 1 л. Объем раствора в колбе доводят водой до метки.

Срок годности раствора 6 мес.

 

Метод атомной абсорбции. Определение цинка в препаратах инсулина проводят на атомно - абсорбционных спектрофотометрах при длине волны 214 нм в соответствии с ГФ XI (вып. 1, с. 42).

Цинк в инсулине. Готовят раствор инсулина в хлористоводородной кислоте (0,01 моль/л) с содержанием 1 мг инсулина в 1 мл и проводят определение.

Цинк в растворе. 5 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора водой до метки и проводят определение.

Общий цинк в суспензиях: 2,5 мл хорошо перемешанной суспензии помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л), доводят объем раствора водой до метки и проводят определение.

Цинк в надосадочной жидкости. Содержимое флакона (5 мл) тщательно перемешивают, вносят в центрифужную пробирку и центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 4000-6000 об/мин. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,5 мл надосадочной жидкости, доводят объем раствора водой до метки и проводят определение.

Расчет содержания цинка в препаратах инсулина проводят по градуировочной кривой.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНСЕРВАНТОВ В ГОРМОНАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТАХ

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЕНОЛА

 

Метод броматометрического титрования. 5 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 150 мл с притертой пробкой, прибавляют раствор 0,25 г калия бромида в 25 мл воды. 15 мл (точный объем) раствора калия бромата (0,1 моль/л), 2,5 мл разведенной серной кислоты перемешивают, закрывают колбу пробкой и оставляют в темном месте на 15 мин. После этого к смеси прибавляют 1 г калия йодида, перемешивают, снова оставляют на 5 мин и титруют раствором натрия тиосульфата (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл раствора натрия тиосульфата (0,1 моль/л) соответствует 0,001568 г фенола.

Содержание фенола в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

 

                       (а - б) х 0,001569 х 100

                  Х = --------------------------

                                  в

 

где а - количество раствора натрия тиосульфата (0,1 моль/л), пошедшее на титрование в контрольном опыте, в миллилитрах, б - количество раствора натрия тиосульфата (0,1 моль/л), пошедшее на титрование испытуемого препарата, в миллилитрах, в - количество препарата, взятого для анализа, в миллилитрах.

Метод газовой хроматографии. Используют газовый хроматограф с пламенно - ионизационным детектором, хроматографическая колонка 100х0,3 см, заполненная сорбентом с 5% полиэтиленгликоля 6000 или 20 М на промытом кислотой и силанизированном носителе "Хроматон N" с размером частиц 0,125-0,250 мм (возможно применение других носителей типа "Хромосорб", "Инертон" тех же квалификаций). Температура колонки, узла ввода пробы, детектора 140, 200, 250 град. С соответственно. Скорость газа - носителя (азот) 20-50 мл/мин. Величина вводимой пробы (2-5 мкл) определяется чувствительностью детектора.

Содержание фенола в препарате определяют методом абсолютной калибровки или методом внутреннего стандарта, в качестве которого используют бензиловый спирт (ГОСТ 8751-72, ч. д. а.).

При использовании метода внутреннего стандарта к препарату в количестве около 2 г (точная навеска) прибавляют около 0,005 г бензилового спирта (точная навеска), смесь перемешивают и хроматографируют.

Содержание фенола в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

 

                              KS1P2 х 100

                         Х = ------------

                                 S2P1

 

где S1 - площадь пика фенола; S2 - площадь пика бензилового спирта; Р1 - навеска препарата в граммах; Р2 - навеска бензилового спирта в граммах; К - калибровочный коэффициент.

Калибровочный коэффициент определяют на 3-4 калибровочных смесях фенола и бензилового спирта.

Для метода абсолютной калибровки график строят по 4-5 калибровочным смесям с концентрацией фенола от 0,10 до 0,50%.

 

Примечание. 1. Определение калибровочного коэффициента (К): фенол и бензиловый спирт, взятые в количествах около 0,125 г (точные навески), помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют навески в 25-30 мл воды, доводят объем раствора водой до метки и хроматографируют. Рассчитывают среднее значение калибровочного коэффициента не менее чем из 3 определений по формуле:

 

                               S2 x Рх

                          К = ---------,

                               S1 x P2

 

где Рх - навеска фенола в граммах.

2. Приготовление калибровочных смесей: 0,050; 0,100; 0,150; 0,200; 0,250 г фенола (точные навески) вносят соответственно в 5 мерных колб вместимостью 50 мл. Навески растворяют в 20 мл воды и доводят объем раствора водой до метки. Срок годности растворов - 14 сут при хранении при температуре от 4 до 8 град. С.

3. Приготовление суспензий к анализу: во флакон с суспензией вносят 1-2 капли хлористоводородной кислоты и встряхивают.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИПАГИНА

 

Метод газовой хроматографии. Используют газовый хроматограф с пламенно - ионизационным детектором, хроматографическую колонку 50 х 0,3 см, заполненную сорбентом 5% неопентилгликольсукцината на промытом кислотой и силанизированном носителе "Хроматон N" с размером частиц 0,125-0,250 мм (возможно применение других носителей типа "Хромосорб", "Инертон" тех же квалификаций). Температура колонки, узла ввода пробы и детектора 170, 220, 240 град. С соответственно. Скорость газа - носителя (азот) 20-50 мл/мин. Пробу вводят непосредственно в хроматографическую колонку; ее величина определяется чувствительностью детектора (2-5 мкл).

Содержание нипагина в препарате определяют методом абсолютной калибровки или методом внутреннего стандарта, в качестве которого используют нипазол (ТУ 6-09-4727-79).

При использовании метода внутреннего стандарта к препарату или к подготовленной к анализу суспензии в количестве около 5 мл (точная навеска) прибавляют 1 мл раствора внутреннего стандарта, раствор тщательно перемешивают, отбирают пробу и хроматографируют.

Содержание нипагина в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

 

                            KS1 x P2

                       Х = --------- x 100,

                            S2 x P1

 

где S1 - площадь пика нипагина; S2 - площадь пика нипазола; Р1 - навеска препарата в граммах; Р2 - навеска нипазола в граммах; К - калибровочный коэффициент.

Калибровочный коэффициент определяют на 3-4 искусственных смесях нипагина и нипазола с равными концентрациями компонентов.

Для метода абсолютной калибровки график строят по 4-5 искусственным смесям с концентрацией нипагина от 0,05 до 0,15%.

 

Примечания. 1. Определение калибровочного коэффициента: нипагин и нипазол, взятые в количествах по 0,050 г (точные навески), помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 5 мл спирта, растворяют и доводят объем раствора водой до метки и хроматографируют. Рассчитывают среднее значение калибровочного коэффициента не менее чем из 3 определений по формуле:

 

                               S2 x Рх

                          К = ---------,

                               S1 x P2

 

где Рх - навеска нипагина в граммах.

Раствор должен быть свежеприготовленным.

2. Приготовление калибровочных смесей: 0,025; 0,040; 0,050; 0,060; 0,075 г нипагина (точные навески) вносят соответственно в 5 мерных колб вместимостью 50 мл. В каждую колбу прибавляют по 2,5 мл 95% спирта, растворяют навеску и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор должен быть свежеприготовленным.

3. Приготовление раствора внутреннего стандарта: около 0,125 г нипазола (точная навеска) вносят в мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл 95% спирта, растворяют и доводят объем раствора 95% спиртом до метки.

Срок годности раствора 14 сут при хранении при температуре от 4 до 8 град. С.

4. Приготовление суспензий к анализу: во флакон с суспензией вносят 1-2 капли хлористоводородной кислоты и встряхивают.

 

МЕТОДЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

ВИТАМИНОВ В ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ

 

1. Определение ретинола ацетата

и ретинола пальмитата (витамина А)

 

а) Точную навеску порошка растертых драже (не более 1 г) или 2 таблетки, покрытые оболочкой и растертые в порошок, количественно переносят 15 миллилитрами предварительно свежепрокипяченной и охлажденной до температуры 40 град. С воды в коническую колбу вместимостью 100 мл, нагревают на водяной бане при температуре от 60 до 70 град. С при перемешивании в течение 5 мин, прибавляют 8 мл раствора аммиака и нагревают при той же температуре в течение 15 мин. Затем прибавляют 30 мл 95% спирта, 3 мл 50% раствора едкого кали и нагревают в течение 30 мин на водяной бане с обратным холодильником при температуре кипения смеси. Содержимое колбы тотчас охлаждают до комнатной температуры, количественно переносят 50 мл воды в делительную воронку и извлекают 150 мл эфира для наркоза в течение 2 мин. В случае образования эмульсии проводят дополнительное извлечение эфиром 3 раза по 25 мл. Объединенные эфирные извлечения промывают сначала 30 мл воды, затем 50 мл 4% раствора едкого кали и снова водой по 50 мл до исчезновения щелочной реакции промывных вод (проба с фенолфталеином). Промытые эфирные извлечения количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора эфиром до метки и перемешивают; 5 мл полученного раствора помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл. Эфир отгоняют в токе азота или под вакуумом на водяной бане при температуре не выше 40 град. С. Остаток растворяют в пропаноле - 2 до получения концентрации витамина А около 2 мкг (6 ME) в 1 мл.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длинах волн 300, 310, 325, 334 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют пропанол - 2.

Отношение значения оптической плотности при длине волны 300 нм к значению оптической плотности при длине волны 325 нм не должно превышать 0,73.

Вычисляют оптическую плотность D325 (испр.) с поправкой на сопутствующие витамину А примеси по следующему уравнению:

 

D325 (испр.) = 6,185 х D325 - 2,555 х D310 - 4,260 х D334,

 

где D325, D310 и D334 - оптические плотности испытуемого раствора при соответствующих длинах волн.

Если D325 (испр.) не отличается от D325 больше чем на +/-5%, то содержание витамина А в ME в одной таблетке или драже (X) вычисляют по формуле:

 

           D325 х 250 х V х 3330000 х б   D325 х V х 915 х б

      Х = ---------------------------- = --------------------

               а х 5 х 100 х 1820                 а

 

где D325 - оптическая плотность  испытуемого  раствора  при  длине

волны 325 нм;  250;  5 и V - разведения в миллилитрах;   3330000 -

количество витамина А в ME,  соответствующее  одному  грамму  100%

ретинола; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток,

покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже в граммах; 1820

                                 1%

удельный показатель поглощения (Е    ) 100% ретинола в пропаноле -

                                 1 см

2 при длине волны 325 нм.

Если D325 (испр.) отличается от D325 больше чем на +/- 5%, содержание витамина А в ME в одном драже или таблетке вычисляют по вышеприведенной формуле, подставляя вместо D325 величину D325 (испр.).

б) При наличии в составе испытуемого препарата альфа - токоферола ацетата (витамина Е) дополнительно проводят гидрирование. Для этого промытые эфирные извлечения, полученные, как указано выше, упаривают в токе азота или под вакуумом на водяной бане при температуре не выше 40 град. С. Остаток тотчас растворяют в пропаноле - 2 до получения концентрации ретинола около 20 мкг (60 ME) в 1 мл (раствор А).

15 мл раствора А переносят в колбу для гидрирования вместимостью 50 мл, прибавляют около 0,2 г палладиевого катализатора, перемешивают и гидрируют в течение 15 мин в приборе, изображенном на рис. 5. <*>

--------------------------------

<*> Рис. 5. Прибор для гидрирования.

а - газометр с водородом; б - бюретка, снабженная тройным краном; в - колба для гидрирования; г - магнитная мешалка. (Рисунок не приводится).

 

При проведении гидрирования водород из газометра а забирают в бюретку б, снабженную тройным краном и заполненную водой. Сначала тройной кран поворачивают так, чтобы провести забор водорода из газометра, после чего кран газометра закрывают, а тройной кран бюретки поворачивают так, чтобы водород из бюретки поступал в колбу для гидрирования, снабженную небольшой вводной трубкой. Перемешивание раствора при гидрировании проводят с помощью магнитной мешалки.

Для вытеснения воздуха из колбы через всю систему 3 раза пропускают водород. После заполнения системы водородом колбу закрывают пробкой, включают магнитную мешалку и ведут гидрирование при комнатной температуре. Расход водорода на гидрирование наблюдают по уменьшению объема водорода в бюретке.

 

Примечание. Проба на полноту гидрирования: 1 мл фильтрата помещают в фарфоровую чашку и удаляют растворитель упариванием на закрытой водяной бане. Остаток растворяют в 1 мл хлороформа, прибавляют 5 мл раствора сурьмы хлорида; не должно появляться синего окрашивания. В случае появления окраски гидрирование продолжают в течение более длительного времени, прибавляя катализатор.

 

По окончании гидрирования в колбу прибавляют 0,3 г силикагеля марки КСМ или ШСМ, перемешивают и фильтруют; 3 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора пропанолом - 2 до метки и перемешивают (раствор Б).

3 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора пропанолом - 2 до метки и перемешивают (раствор В).

Измеряют оптическую плотность раствора В на спектрофотометре при длинах волн 300, 310, 325, 334 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют раствор Б.

Содержание витамина А в ME в одной таблетке или драже вычисляют, как описано выше, введя в формулу расчета разведение в пропаноле - 2.

 

Примечания. 1. При анализе таблеток, покрытых оболочкой, средняя масса таблетки в формуле не учитывается.

2. При анализе препаратов, не содержащих аскорбиновую кислоту, перед омылением прибавляют к испытуемой навеске 0,1 г аскорбиновой кислоты.

3. 1 г 100% ретинола ацетата соответствует 2907000 ME. 1 г 100% ретинола пальмитата соответствует 1817000 ME.

4. Пропанол-2 (изопропиловый спирт) (х. ч.) при измерении поглощения должен иметь величину оптической плотности, не превышающую 0,01 в области от 320 до 350 нм и 0,05 - от 280 до 300 нм по сравнению с водой в кювете с толщиной слоя 10 мм.

5. Очистка азота: азот газообразный (ос. ч.) пропускают последовательно через поглотители со щелочным раствором пирогаллола А [5 г пирогаллола А (ч. д. а.) на 100 мл 20% раствора едкого кали], концентрированной серной кислотой, стеклянной ватой и плавленым кальция хлоридом.

6. Приготовление палладиевого катализатора: в трехгорлую колбу вместимостью 1,5-2 л с мешалкой помещают 840 мл воды, 100 мл концентрированного раствора аммиака и 210 г аммония карбоната (х. ч. или ч. д. а.).

При непрерывном перемешивании реакционную массу нагревают до температуры 50 град. С и в течение 30 мин прибавляют раствор, полученный растворением 52,5 г кальция карбоната (ч. д. а.) в смеси 130 мл концентрированной кислоты хлористоводородной с 130 мл воды. Температуру реакционной массы поддерживают от 50 до 80 град. С. Выделившийся белый осадок отфильтровывают и тщательно промывают водой до исчезновения запаха аммиака. После этого осадок отжимают. В колбу с суспензией свежеосажденного кальция карбоната в 400 мл воды прибавляют при интенсивном перемешивании горячий раствор, полученный растворением 5 г палладия хлорида (ч. д. а. или ч.) в смеси 12 мл концентрированной хлористоводородной кислоты с 30 мл воды. Смесь перемешивают 10 мин, затем нагревают от 80 до 85 град. С и при этой температуре перемешивают в течение 15 мин. Горячую смесь насыщают водородом (марки А) в течение 6 ч. Приготовленный катализатор промывают водой до отсутствия ионов хлора. Получают около 43 г палладированного кальция карбоната, который сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Хранят в банке оранжевого стекла при комнатной температуре. Годен в течение 3 мес.

 

2. Определение содержания витамина А

в жирах рыб и морских млекопитающих

 

Около 1,5 г жира (точная навеска) помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 0,1 г аскорбиновой кислоты, 30 мл свежеприготовленного 10% спиртового раствора едкого кали и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин при температуре кипения смеси. Содержимое колбы тотчас охлаждают, прибавляют 50 мл воды, переносят в делительную воронку вместимостью 250 мл и трижды извлекают эфиром для наркоза: первый раз 50 мл, второй и третий раз по 30 мл. Объединенные эфирные извлечения промывают сначала 30 мл воды, затем 50 мл 4% раствора едкого кали и снова водой от 30 до 40 мл до исчезновения щелочной реакции промывных вод (проба с фенолфталеином). Промытые эфирные извлечения медленно фильтруют через бумажный фильтр с 8 г безводного натрия сульфата в колбу для отгона. Фильтр с натрия сульфатом 3 раза промывают эфиром по 10 мл, который фильтруют в ту же колбу. Эфир отгоняют в токе азота на водяной бане при температуре не выше 40 град. С. Остаток растворяют в небольшом объеме хлороформа для наркоза и разбавляют тем же хлороформом так, чтобы в 1 мл раствора содержалось около 30 ME витамина А; 0,4 мл полученного раствора переносят в кювету фотоэлектроколориметра с толщиной слоя 10 мм и быстро прибавляют 4 мл хлороформного раствора сурьмы хлорида, содержащего 2% уксусного ангидрида. Измеряют оптическую плотность раствора на фотоэлектроколориметре при длине волны около 620 нм. Показание прибора отмечают не позднее чем через 5 с после прибавления в кювету хлороформного раствора сурьмы хлорида.

По калибровочному графику находят содержание витамина А в международных единицах в 1 мл испытуемого раствора.

Содержание витамина А в 1 г жира в международных единицах (МЕ) (X) вычисляют по формуле:

 

                                 CV

                            Х = ----,

                                 а

 

где С - содержание витамина А в 1 мл раствора, найденное по калибровочному графику, в международных единицах (МЕ); V - разведение в миллилитрах; а - навеска в граммах.

 

Примечания. 1. Построение калибровочного графика: около 0,1 г (точная навеска) раствора ретинола ацетата в масле активностью 100000 ME в 1 мл для инъекций с учетом фактического содержания витамина А разводят в хлороформе для наркоза таким образом, чтобы получить раствор, содержащий 100 ME витамина А в 1 мл. Затем из него готовят последовательные разведения с содержанием витамина А от 5 до 50 ME в 1 мл с интервалом 5 ME. Из каждого разведения отбирают по 0,4 мл раствора и проводят колориметрическую реакцию так же, как при анализе испытуемого раствора. Для построения калибровочного графика откладывают по оси ординат найденные значения оптической плотности, а по оси абсцисс - соответствующие им количества витамина А в 1 мл раствора в международных единицах.

При смене реактивов (особенно раствора сурьмы хлорида) калибровочный график проверяют, используя для этого свежеприготовленные хлороформные растворы препарата витамина А, применяемого в качестве эталонного раствора.

2. Приготовление хлороформного раствора сурьмы хлорида, содержащего 2% уксусного ангидрида: 230 г сурьмы треххлорной помещают в колбу и растворяют в 1 л хлороформа для наркоза при нагревании на водяной бане при температуре около 40 град. С. Колбу закрывают притертой пробкой и оставляют на ночь. Прозрачную часть раствора сливают в мерный цилиндр вместимостью 1 л, прибавляют 2% (по объему) уксусного ангидрида, переносят в банку оранжевого стекла, перемешивают и закрывают притертой пробкой. Раствор годен для анализа через сутки после приготовления в течение 42 сут.

 

3. Определение содержания тиамина хлорида

и тиамина бромида (витамина B1)

 

Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанное в соответствующих частных статьях, количественно переносят 30 миллилитрами раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) в мерную колбу вместимостью 100 мл, взбалтывают, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят с использованием раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) раствор второго разведения так, чтобы содержание в нем витамина B1 (в пересчете на тиамина хлорид) было около 0,001 мг в 1 мл.

1 мл полученного раствора помещают в делительную воронку с притертой пробкой вместимостью 50 мл, во вторую делительную воронку помещают 1 мл раствора стандартного образца тиамина хлорида. В обе делительные воронки прибавляют по 4 мл подкисленного раствора калия хлорида и по 3 мл окислительной смеси; воронки одновременно встряхивают и оставляют стоять в течение 1 мин, затем прибавляют по 15 мл изобутилового или изоамилового спирта, или бутанола-1, одновременно энергично встряхивают в течение 2 мин и дают разделиться слоям. Водный слой удаляют, спиртовой фильтруют через бумажный фильтр с 1 г безводного натрия сульфата. Полученные фильтраты переносят в кювету флуориметра и измеряют флюоресценцию растворов при длине волны около 436 нм. Установку прибора проводят по раствору рабочего стандартного образца тиамина хлорида.

Содержание витамина B1 в пересчете на тиамина хлорид (C12H17ClN4OS х HCl) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

        А1 х 0,001 х 100 х V3 х б          А1 х V3 х б

   Х = --------------------------- =  ---------------------

           A2 х а х V2 х 1000          А2 х а х V2 х 10000

 

где А1 - показание флуориметра испытуемого раствора; А2 - показание флуориметра раствора рабочего стандартного образца тиамина хлорида; 0,001 - содержание тиамина хлорида в 1 мл раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2, V3 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки, г; 1000 - пересчет в граммы.

 

Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца тиамина хлорида: 0,1000 г тиамина хлорида, предварительно высушенного при температуре от 100 до 105 град. С в течение 2 ч, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, прибавляют 10 капель концентрированной хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора водой до метки (основной раствор). Раствор годен в течение 1 мес при хранении в банке оранжевого стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.

1 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,001 мг тиамина хлорида.

Раствор годен в день приготовления.

2. Окислительная смесь: 0,01 г калия феррицианида растворяют в 1 мл воды и доводят объем раствора 15% раствором едкого натра до 25 мл. Раствор готовят непосредственно перед употреблением.

3. Изобутиловый спирт (ч. д. а.) или изоамиловый спирт (ч. д. а.), или бутанол-1 (ч. д. а.) проверяют на отсутствие флюоресценции. В случае наличия флюоресценции спирт перед употреблением подвергают очистке следующим образом: к 1 л спирта прибавляют от 15 до 20 г активированного угля, энергично встряхивают в течение 30 мин, оставляют на сутки и отгоняют.

4. Приготовление подкисленного раствора калия хлорида: 125 г калия хлорида растворяют в 400 мл воды в мерной колбе вместимостью 500 мл, прибавляют 4,5 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора водой до метки.

5. Коэффициент пересчета тиамина хлорида на тиамина бромид-1,29.

 

4. Определение содержания рибофлавина (витамина В2)

 

Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, взбалтывают в горячей воде при подогревании на водяной бане, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл, охлаждают, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят раствор второго разведения с таким расчетом, чтобы содержание в нем рибофлавина было около 0,0004 мг в 1 мл. В кюветы флуориметра помещают: в одну - 10 мл испытуемого раствора, в другую - 10 мл раствора рабочего стандартного образца рибофлавина и измеряют флюоресценцию при длине волны около 440 нм. Параллельно в другие кюветы помещают: в одну - 10 мл испытуемого раствора и в другую - 10 мл раствора рабочего стандартного образца рибофлавина, в каждую прибавляют по 0,1 г натрия гидрокарбоната и натрия гидросульфита, перемешивают и измеряют флюоресценцию растворов.

Установку проводят по раствору рабочего стандартного образца рибофлавина.

Содержание C17H2ON4O6 (рибофлавина) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

                  (А - А1) х 0,0004 х 500 х V3 х б

              Х = -------------------------------- =

                      (В - В1) х а х V2 х 1000

 

                       (А - A1) х V3 х б

                 = --------------------------

                    (В - В1) х а х V2 х 5000

 

где А - показание флуориметра испытуемого раствора; А1 - то же после гашения флюоресценции; В - показание флуориметра раствора рабочего стандартного образца рибофлавина; В1 - то же после гашения флюоресценции; 500; V2 и V3 - разведения в миллилитрах; 0,0004 - содержание рибофлавина в 1 мл раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.

 

Примечание. Приготовление раствора рабочего стандартного образца рибофлавина: 0,0400 г рибофлавина, предварительно высушенного при температуре от 100 до 105 град. С в течение 2 ч, растворяют в горячей воде в мерной колбе вместимостью 1 л при подогревании на водяной бане, после охлаждения доводят объем раствора водой до метки (основной раствор). Раствор годен в течение 1 мес при хранении в банке оранжевого стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.

1 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки; 1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,0001 мг рибофлавина.

Раствор годен в день приготовления.

 

5. Определение содержания

пиридоксина гидрохлорида (витамина B6)

 

Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, количественно переносят водой в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят раствор второго разведения с таким расчетом, чтобы содержание в нем пиридоксина гидрохлорида было около 0,01 мг в 1 мл; 5 мл полученного раствора переносят в делительную воронку вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл фосфатного буферного раствора (0,2 моль/л), 1 мл 0,1% раствора диэтил-п-фенилендиамина сульфата, перемешивают, прибавляют 10 мл этилацетата, 2 мл 1% раствора калия феррицианида и немедленно тщательно перемешивают. Дают слоям разделиться, нижний водный слой сливают в колбу и оставляют для повторного извлечения, верхний этилацетатный слой фильтруют через сухой бумажный фильтр, на который помещено около 8 г безводного натрия сульфата, в мерную колбу вместимостью 25 мл. Нижний водный слой повторно извлекают 10 мл этилацетата, фильтруют, фильтр промывают этилацетатом, присоединяют его к первому извлечению в мерной колбе и доводят объем раствора этилацетатом до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора синего цвета на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре при длине волны 600 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют этилацетат.

Параллельно проводят опыт с раствором рабочего стандартного образца пиридоксина гидрохлорида. Для этого 5 мл раствора рабочего стандартного образца пиридоксина гидрохлорида помещают в делительную воронку и далее поступают так, как описано выше.

Содержание C8H11NO3 х HCl (пиридоксина гидрохлорида) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

           D1 х 0,01 х 100 х V3 х б        D1 х V3 х б

      Х = -------------------------- = --------------------,

              D0 х а х V2 х 1000        D0 х а х V2 х 1000

 

где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора; D0 - оптическая плотность раствора рабочего стандартного образца пиридоксина гидрохлорида; 0,01 - содержание пиридоксина гидрохлорида в 1 мл раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2 и V3 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.

 

Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца пиридоксина гидрохлорида: 0,0500 г пиридоксина гидрохлорида растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 250 мл и доводят объем раствора водой до метки (основной раствор). Раствор годен в течение месяца при хранении в склянке оранжевого стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.

5 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,01 мг пиридоксина гидрохлорида.

Раствор годен в день приготовления.

2. Приготовление фосфатного буферного раствора (0,2 моль/л) рН 6,9 - 7,1:

1) 71,64 г натрия фосфата двузамещенного (Na2HPO х 12Н2О) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем

раствора водой до метки;

2) 27,22 г калия фосфата однозамещенного (КН2РО4) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки;

3) 150 мл раствора натрия фосфата двузамещенного смешивают со 100 мл раствора калия фосфата однозамещенного.

рН полученного раствора 6,9-7,1 (потенциометрически).

Раствор годен в течение 5 сут при хранении при температуре от 5 до 10 град. С.

3. Приготовление раствора сульфата диэтил - п - фенилендиамина: 0,1 г сульфата диэтил - п - фенилендиамина (ч. д. а. или ч.) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед употреблением.

 

6. Определение цианокобаламина (витамина В12)

 

Содержание цианокобаламина определяют микробиологическим методом с Escherichia coli 113-3 в качестве тест - микроорганизма.

Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанное в соответствующих частных статьях, количественно переносят водой в мерную колбу определенной вместимости и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют. Из полученного раствора делают разведение 1% раствором натрия цитрата с таким расчетом, чтобы концентрация раствора для анализа была близкой к контрольной концентрации раствора Государственного стандартного образца - 0,05 мкг в 1 мл.

В чашки Петри (6 чашек для построения стандартной кривой и 3 чашки для раствора испытуемого препарата) одинакового диаметра с ровным и плоским дном, установленные на горизонтальном столе, отрегулированном по ватерпасу, разливают по 10-12 мл расплавленной и охлажденной до температуры 48-50 град. С основной среды, засеянной суспензией Е. coli 113-3 из расчета от 4 до 6 мл суспензии на 200 мл основной среды. После застывания среды на каждой чашке стерильным бором делают по трафарету под углом 60 град. С друг к другу 6 лунок диаметром 8 мм.

В три лунки (через одну) 6 чашек, используемых для построения стандартной кривой, и 3 чашек - для раствора испытуемого препарата, вносят по 0,1 мл раствора Государственного стандартного образца контрольной концентрации (0,05 мкг/мл). В три лунки (через одну) каждых 3 чашек вносят по 0,1 мл одной из концентрации остальных растворов Государственного стандартного образца, а также раствора испытуемого препарата. Чашки выдерживают в термостате при 37 град. С от 16 до 18 ч. После этого измеряют диаметры зон стимуляции роста тест - микроорганизма для каждой концентраций растворов Государственного стандартного образца.

После измерения зон роста для всех концентраций рассчитывают среднюю величину зоны, учитывая в каждом случае 3 чашки, т. е. 9 зон, затем рассчитывают среднюю величину зоны для контрольной концентрации, учитывая все чашки, т. е. 27 зон.

По разности между средней величиной зоны контрольной концентрации раствора (0,05 мкг/мл), выведенной из всех чашек, и средней величиной зоны контрольной концентрации раствора Государственного стандартного образца, выведенной из 3 чашек с каждой отдельной концентрацией, находят поправку к величине зоны данной концентрации. Найденную поправку прибавляют к средней величине зоны данной концентрации, если она положительная, и вычитают, если она отрицательная. Аналогичным образом делают поправку к концентрации раствора испытуемого препарата.

Содержание C63H88CoN14O14P (цианокобаламина) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

                           С х б х К

                     Х = -------------,

                         а х 1 000 000

 

где С - содержание цианокобаламина в 1 мл испытуемого раствора, найденное по стандартной кривой, в микрограммах; К - коэффициент разведения; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже в граммах; 1 000 000 - пересчет в граммы.

 

Примечания. 1. Приготовление раствора Государственного стандартного образца цианокобаламина: 0,0250 г Государственного стандартного образца цианокобаламина в пересчете на 100% вещество растворяют в 25% спирте в мерной колбе вместимостью 250 мл и доводят объем раствора тем же спиртом до метки.

1 мл полученного раствора содержит 100 мкг цианокобаламина (основной раствор).

Раствор годен в течение 2 мес при хранении при температуре 4-6 град. С в банке оранжевого стекла с притертой пробкой. 1 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки (рабочий раствор). Раствор годен в течение 5 сут при хранении при температуре от 12 до 15 град. С.

1 мл рабочего раствора содержит 1 мкг цианокобаламина. Из рабочего раствора Государственного стандартного образца в день определения готовят растворы, содержащие 0,025; 0,05 и 0,075 мкг цианокобаламина в 1 мл. Для этого соответственно 2,5; 5 и 7,5 мл рабочего раствора Государственного стандартного образца помещают в мерные колбы вместимостью 100 мл, доводят объемы растворов в колбах 1% раствором натрия цитрата до метки и перемешивают.

Раствор, содержащий 0,05 мкг цианокобаламина в 1 мл, принимают за раствор Государственного стандартного образца контрольной концентрации.

2. Построение стандартной кривой: по исправленным значениям величин зон приготовленных концентраций и средней величине зоны контрольной концентрации из всех чашек строят стандартную кривую, откладывая на оси абсцисс концентрации цианокобаламина в мкг/мл, а на оси ординат - соответствующие им величины диаметров зон роста. По полученным точкам вычерчивают кривую.

Применяемые для построения кривой концентрации не должны отличаться от контрольной концентрации более чем на -40 или +50%.

3. Хранение и подготовка тест - культуры для анализа: музейную культуру выращивают на скошенной агаровой среде и хранят в холодильнике. Один раз в месяц культуру пересеивают на свежую среду и после переноса выдерживают от 16 до 18 ч при 37 град. С.

Состав среды для хранения культуры:

    казеинового кислотного гидролизата 10%       6      мл

    калия фосфата двузамещенного (х. ч.)         0,02   г

    железа сульфата (х. ч.)                      0,0005 г

    магния сульфата (х. ч.)                      0,02   г

    L-аспарагина (ч.)                            0,02   г

    глицерина (ч.)                               0,2    г

    агара микробиологического                    1,5    г

    цианокобаламина                             10      мкг

    воды                                    до 100      мл

рН среды до стерилизации 7,0 (потенциометрически).

Ингредиенты растворяют последовательно в воде.

Аспарагин растворяют отдельно в 10 мл воды с прибавлением 2 капель раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л) при слабом подогревании и прибавляют к раствору солей; устанавливают рН полученной смеси до 7,0 15% раствором едкого натра, доводят объем среды водой до 100 мл, прибавляют 0,2 г глицерина и 1,5 г агара микробиологического. Смесь подогревают на водяной бане до полного растворения агара, затем прибавляют 10 мкг цианокобаламина. За сутки до проведения анализа тест - культуру пересевают на скошенный пептонно - солевой агар следующего состава:

    пептона ферментативного сухого                2   г

    натрия хлорида (х. ч.)                        0,5 г

    агара микробиологического                     1,8 г

    воды                                     до 100   мл

рН среды до стерилизации 7,0 (потенциометрически).

Обе среды разливают в пробирки по 5 мл, стерилизуют насыщенным паром под давлением в паровом стерилизаторе при 1 ати (0,1 МПа) 20 мин. Пробирки охлаждают в наклонном положении. На скошенный агар делают посев музейной культуры. Тест - культуру инкубируют от 16 до 18 ч при 37 град. С и используют для приготовления посевного материала.

4. Приготовление 10% казеинового кислотного гидролизата: 100 г казеина размолотого смешивают в колбе вместимостью 1 л с 500 мл 20% раствора хлористоводородной кислоты. Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 24 ч. Первые 5-8 ч до растворения казеина нагревание проводят на кипящей водяной бане, а затем на электроплитке с асбестовой сеткой. Из полученного гидролизата при пониженном давлении отгоняют хлористоводородную кислоту. К густому остатку прибавляют 300 мл воды, перемешивают и снова отгоняют до получения густого сиропа. Указанную операцию повторяют дважды, растворяют оставшуюся массу приблизительно в 100 мл воды, устанавливают рН 3,5 при помощи раствора едкого натра (5 моль/л) и объем раствора доводят водой до 1 л. К раствору прибавляют 20 г угля активированного осветляющего, встряхивают в течение 1 ч, затем фильтруют на воронке Бюхнера с отсасыванием. Обработку углем повторяют еще раз и получают бесцветный или светло - желтый раствор, который разливают в колбы по 100 мл и стерилизуют насыщенным паром под давлением в паровом стерилизаторе при 1 ати (0,1 МПа) 20 мин.

5. Приготовление 20% раствора хлористоводородной кислоты: 425 мл концентрированной хлористоводородной кислоты (d 1,19) разбавляют водой до 1 л.

6. Приготовление посевного материала: делают смыв суточной тест - культуры со скошенного пептонно - солевого агара раствором натрия хлорида изотоническим 0,9%. Плотность микробной взвеси должна быть от 1 до 2 млрд микробных клеток в 1 мл.

7. Приготовление основной питательной среды.

Состав среды:

    аммония хлорида (х. ч.)                            2   г

    натрия хлорида (х. ч.)                             3   г

    калия фосфата двузамещенного (х. ч.)               0,4 г

    натрия цитрата трехзамещенного (х. ч.)             3   г

    сахара молочного                                   3   г

    агара микробиологического                         15   г

    воды дистиллированной                           до 1   л

рН среды до стерилизации 7,0 (потенциометрически).

Среду разливают по 200 мл в колбы и стерилизуют насыщенным водяным паром в автоклаве при 1 ати (0,1 МПа) 20 мин. Хранят в прохладном месте не более 2 мес. Перед розливом в чашки Петри в расплавленную среду прибавляют по 5 мл стерильного 40% раствора глюкозы на каждые 200 мл среды.

Раствор глюкозы стерилизуют при 0,5 ати (0,05 МПа) в течение 15 мин.

7. Приготовление 1% раствора натрия цитрата: 10 г натрия цитрата растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор годен в течение 7 сут при хранении при температуре от 5 до 10 град. С.

 

7. Определение содержания

кислоты никотиновой (витамина РР)

 

Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, взбалтывают в горячей воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, охлаждают и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного фильтрата готовят раствор второго разведения с таким расчетом, чтобы содержание кислоты никотиновой в нем составляло около 0,005 мг в 1 мл.

В две конические колбы с притертой пробкой вместимостью 50 мл помещают по 5 мл испытуемого раствора, в третью колбу - 5 мл раствора рабочего стандартного образца кислоты никотиновой, в четвертую - 5 мл воды (контрольный опыт на реактивы).

Колбы помещают на 5 мин на водяную баню при температуре 50 град. С. Затем из бюретки (под тягой) во все колбы прибавляют по 2 мл роданобромидного раствора, перемешивают и оставляют на 10 мин на водяной бане при той же температуре. Затем колбы быстро охлаждают до комнатной температуры и выдерживают в защищенном от света месте в течение 1 ч. Одновременно проводят контрольный опыт на посторонние окрашенные вещества, присутствующие в растворе. Для этого к 5 мл испытуемого раствора прибавляют 3 мл раствора метола и 2 мл воды.

Измеряют оптическую плотность растворов желтого цвета на фотоэлектроколориметре при длине волны около 440 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют воду.

Содержание C6H5NO2 (кислоты никотиновой) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

                  (D - D1) х 0,005 х 100 х V3 х б

              Х = -------------------------------- =

                     (D0 - D2) х а х V2 х 1000

 

                        (D - D1) х V3 х б

                  = --------------------------,

                    (D0 - D2) х a х V2 х 2000

 

где D - оптическая плотность испытуемого раствора; D1 - оптическая плотность контрольного опыта на посторонние окрашенные вещества; D0 - оптическая плотность раствора рабочего стандартного образца кислоты никотиновой; D2 - оптическая плотность контрольного опыта на реактивы; 0,005 - содержание кислоты никотиновой в 1 мл раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2 и V3 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки, г; 1000 - пересчет в граммы.

 

Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца кислоты никотиновой: 0,5000 г кислоты никотиновой растворяют в горячей воде в мерной колбе вместимостью 500 мл, прибавляют 5 мл раствора серной кислоты (5 моль/л) и доводят объем раствора водой до метки (основной раствор).

Раствор годен в течение 6 мес при хранении в банке оранжевого стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.

0,5 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,005 мг кислоты никотиновой. Раствор используют свежеприготовленный.

2. Приготовление раствора серной кислоты (5 моль/л): медленно и осторожно, при постоянном перемешивании, вливают 30 мл концентрированной серной кислоты в 102 мл воды.

3. Очистка метола: 100 г метола (ч. д. а. или ч.) смешивают с 0,7 г натрия бисульфита и вносят в кипящие 500 мл раствора серной кислоты (0,05 моль/л). Если раствор сильно окрашен, к нему прибавляют 10 г активированного угля.

Кипящий раствор быстро фильтруют через воронку Бюхнера, которая предварительно нагрета горячей водой. Фильтрат переносят в химический стакан вместимостью 1 л, прибавляют 0,3 г натрия бисульфита, 0,7 л 95% спирта, перемешивают, помещают в холодильник и оставляют на 18 ч. Выпавшие кристаллы отфильтровывают на воронке Бюхнера, промывают 3 раза 95% спиртом и высушивают на воздухе в темноте. Перекристаллизованный метол хранят в банке оранжевого стекла с притертой пробкой в защищенном от света месте.

При изменении метола его следует повторно перекристаллизовывать.

4. Приготовление раствора метола: перед употреблением готовят 8% раствор метола в растворе хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л).

5. Приготовление роданобромидного раствора (проводят под тягой): к 4 мл брома прибавляют 100 мл воды, энергично встряхивают и отстоявшийся раствор декантируют.

К охлажденной на льду бромной воде (взятой в количестве, нужном для анализа) прибавляют по каплям 10% раствор аммония роданида или калия до светло - желтого окрашивания, затем прибавляют 1% раствор аммония роданида до полного обесцвечивания и небольшими порциями кальций углекислый до прекращения выделения углекислого газа и образования осадка. Раствор фильтруют в банку оранжевого стекла с притертой пробкой и хранят при температуре от 5 до 10 град. С.

Раствор годен в день приготовления.

 

8. Определение содержания никотинамида

 

Определение проводят одним из приведенных ниже методов.

1. Точную навеску порошка растертых драже или таблеток, или соответствующее количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, содержащих около 0,05 г никотинамида, количественно переносят водой в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают, 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл раствора едкого кали (0,2 моль/л), доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Полученный раствор помещают в электролитическую ячейку полярографа, пропускают ток азота в течение 5 мин и полярографируют, начиная с - 1,4 В.

Параллельно снимают полярограмму раствора рабочего стандартного образца никотинамида.

Содержание C6H6N2O (никотинамида) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

               H1 х 0,1 х 100 х 50 х б       H1 х б

          Х = ------------------------- = -------------,

                 Н0 х а х 10 х 1000        Н0 х а х 20

 

где Н1 - высота полярографической волны испытуемого раствора; Н0 - высота полярографической волны раствора рабочего стандартного образца никотинамида; 0,1 - содержание никотинамида в 1 мл раствора рабочего стандартного образца никотинамида в миллиграммах; 100, 50 и 10 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.

2. Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, количественно переносят водой в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят раствор второго разведения с таким расчетом, чтобы содержание никотинамида в нем составляло около 0,05 мг в 1 мл.

В две конические колбы вместимостью 25 мл помещают: в одну - 1 мл испытуемого раствора, во вторую - 1 мл раствора рабочего стандартного образца никотинамида. В обе колбы прибавляют по 1 мл воды, 1 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л), 8 мл свежеприготовленного раствора хлорамина Б, 1 мл 1% раствора аммония роданида и оставляют на 10 мин. Затем прибавляют по 8 мл 95% спирта, 2 мл раствора калия фосфата однозамещенного (0,1 моль/л), 3 мл раствора натрия барбитурата и нагревают на водяной бане при 60 град. С в течение 10 мин, быстро охлаждают до комнатной температуры и измеряют оптическую плотность растворов фиолетового цвета на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре при длине волны 555 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь 95% спирт - вода в соотношении 1:2.

Содержание C6H6N2O (никотинамида) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

          D1 х 0,05 х 100 х V3 х б      D 1 х V3 х б

     Х = ------------------------- = -------------------,

            D0 х а х V2 х 1000        D0 х а х V2 х 200

 

где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора; Dо - оптическая плотность раствора рабочего стандартного образца никотинамида; 0,05 - содержание никотинамида в 1 мл раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2 и V3 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.

 

Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца никотинамида: 0,0500 г никотинамида растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки (основной раствор).

Раствор годен в течение 1 мес при хранении в банке оранжевого стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.

Перед анализом полярографическим методом 10 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл раствора едкого кали (0,2 моль/л) и доводят объем раствора водой до метки.

1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,1 мг никотинамида.

Раствор годен в день приготовления.

Перед анализом колориметрическим методом 5 мл основного раствора никотинамида переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора водой до метки.

1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,05 мг никотинамида.

2. Приготовление раствора натрия барбитурата: 1 г барбитуровой кислоты (ТУ 6-09-512-74 ч. д. а. или ч.) растворяют в 50 мл воды в мерной колбе вместимостью 100 мл, прибавляют 11 мл раствора едкого натра (0,5 моль/л), доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют.

Раствор годен в день приготовления.

3. Хлорамин Б: свежеприготовленный 1% раствор перед употреблением фильтруют.

 

9. Определение содержания

кислоты аскорбиновой (витамина С)

 

Точную навеску порошка растертых драже или таблеток или соответствующее количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, с содержанием около 0,1 г кислоты аскорбиновой количественно переносят водой в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. 10 мл полученного раствора помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 1 мл 2% раствора хлористоводородной кислоты, 0,5 мл 1% раствора калия йодида, 2 мл 0,5% раствора крахмала, воды до общего объема 20 мл и титруют раствором калия йодата (0,00167 моль/л) до появления стойкого светло - синего окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт. Для этого в коническую колбу помещают 1 мл 2% раствора хлористоводородной кислоты, 0,5 мл 1% раствора калия йодида, 2 мл 0,5% раствора крахмала, воды до общего объема 20 мл и титруют раствором калия йодата (0,00167 моль/л) до появления стойкого светлосинего окрашивания.

1 мл раствора калия йодата (0,00167 моль/л) соответствует 0,0008806 г С6Н8О6 (кислоты аскорбиновой).

 

10. Определение содержания рутина (витамина Р)

 

Точную навеску порошка растертых драже или таблеток, или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, взбалтывают с 40 мл горячего метилового или горячего абсолютного спирта, охлаждают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора сухим ацетоном до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят раствор второго разведения в сухом ацетоне так, чтобы содержание в нем рутина было около 0,1 мг в 1 мл. К 2 мл полученного раствора прибавляют 8 мл цитратно - борного реактива, перемешивают и оставляют на 10 мин в защищенном от света месте. Измеряют оптическую плотность полученного раствора зеленовато - желтого цвета на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют сухой ацетон.

Параллельно проводят определение с раствором Государственного стандартного образца рутина. Для этого к 2 мл раствора Государственного стандартного образца рутина прибавляют 8 мл цитратно - борного реактива и далее поступают, как указано выше.

Содержание C27H30O16 х 3Н2О (рутина) в граммах (X) в одном драже или одной таблетке вычисляют по формуле:

 

          D1 х 0,1 х 100 х V3 х б       D1 х V3 х б

     Х = ------------------------- = -------------------,

            D0 х а х V2 х 1000        D0 х а х V2 х 100

 

где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора; Dо - оптическая плотность раствора Государственного стандартного образца рутина; 0,1 - содержание рутина в 1 мл раствора Государственного образца в миллиграммах; 100, V2 и V3 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.

 

Примечания. 1. Приготовление раствора Государственного стандартного образца рутина: 0,0250 г рутина, предварительно высушенного при температуре 135 град. С до постоянной массы, растворяют в 10 мл горячего метилового или горячего абсолютного спирта, переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл с помощью сухого ацетона и доводят объем раствора тем же ацетоном до метки.

1 мл раствора Государственного стандартного образца содержит 0,1 мг рутина. Раствор годен в течение 6 мес при хранении в хорошо укупоренной банке оранжевого стекла при температуре от 5 до 10 град. С.

2. Приготовление цитратно - борного реактива: к 10 г лимонной кислоты, высушенной при температуре 60 град. С в течение 2 ч, прибавляют 10 мл сухого ацетона (раствора А).

К 0,8 г борной кислоты прибавляют 100 мл сухого ацетона (раствор Б). Оба раствора пересыщены, и перед употреблением их фильтруют.

Непосредственно перед употреблением смешивают 4 мл раствора А и 4 мл раствора Б.

 

11. Определение альфа - токоферола ацетата (витамина Е)

 

Точную навеску порошка растертых драже (не более 1 г) или 2 таблетки, растертые в порошок, количественно переносят 10 миллилитрами воды в коническую колбу вместимостью 100 мл и нагревают на водяной бане при температуре от 60 до 70 град. С при перемешивании в течение 5 мин. Затем прибавляют 30 мл 95% спирта, 3 мл 50% раствора едкого кали и нагревают в течение 30 мин на водяной бане с обратным холодильником при температуре кипения смеси. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, количественно переносят 50 мл воды в делительную воронку и извлекают 150 мл эфира для наркоза в течение 2 мин. В случае образования эмульсии проводят дополнительное извлечение эфиром 3 раза по 25 мл. Объединенные эфирные извлечения промывают порциями по 50 мл до исчезновения щелочной реакции промывных вод (проба с фенолфталеином). Промытые эфирные извлечения медленно фильтруют в колбу для отгона через бумажный фильтр, на который помещено около 8 г безводного натрия сульфата, фильтр с натрия сульфатом промывают 3 раза эфиром порциями по 10 мл, который фильтруют в ту же колбу. Эфир отгоняют в токе азота или под вакуумом на водяной бане, нагретой не выше 40 град. С.

Остаток тотчас же растворяют в абсолютном спирте до получения концентрации около 60 мкг в 1 мл (раствор А).

15 мл раствора А переносят в колбу для гидрирования вместимостью 50 мл, прибавляют около 0,2 г палладиевого катализатора, перемешивают и гидрируют в течение 15 мин в приборе, изображенном на рис. 5 (см. определение ретинола ацетата и ретинола пальмитата). По окончании гидрирования в колбу прибавляют около 0,3 г силикагеля марки КСМ или ШСМ, перемешивают и фильтруют; 2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 15 мл абсолютного спирта, 1 мл 0,5% спиртового раствора о - фенантролина, 1 мл 0,2% спиртового раствора железа окисного хлорида, доводят объем раствора тем же спиртом до метки, перемешивают и оставляют в защищенном от света месте.

Точно через 10 мин после прибавления раствора железа окисного хлорида измеряют оптическую плотность раствора красновато - оранжевого цвета на спектрофотометре при длине волны 520 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют абсолютный спирт. Параллельно проводят контрольный опыт на реактивы. Из величины оптической плотности испытуемого раствора вычитают величину оптической плотности контрольного опыта.

Содержание альфа - токоферола ацетата в микрограммах в 1 мл находят по калибровочному графику.

Содержание C31H52O3 (альфа - токоферола ацетата) в одной таблетке или драже в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

                  С х V х б            С х V х б

         Х = --------------------- = ---------------,

              а х 2 х 1000 х 1000      а х 2000000

 

где С - содержание альфа - токоферола в 25 мл, найденное по калибровочному графику, в микрограммах; V и 2 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже в граммах; 1000, 1000 - пересчет в граммы.

 

Примечания. 1. Построение калибровочного графика: 0,1000 г Государственного стандартного образца альфа - токоферола ацетата растворяют в 30 мл абсолютного спирта, прибавляют 3 мл 50% раствора едкого кали и нагревают в течение 30 мин на водяной бане с обратным холодильником при температуре кипения смеси. Извлекают неомыляемый остаток эфиров для наркоза, как указано выше, эфир отгоняют на водяной бане в токе азота.

Остаток растворяют в абсолютном спирте, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают.

1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают.

Из полученного раствора отбирают 1, 2, 3, 4, 5 мл раствора в мерные колбы вместимостью 25 мл и проводят реакцию с растворами о-фенантролина и железа окисного хлорида, как указано выше.

Точно через 10 мин после прибавления раствора железа окисного хлорида измеряют оптическую плотность растворов от оранжевого до красновато - оранжевого цвета на спектрофотометре при длине волны 520 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, как указано выше.

Из величин оптической плотности растворов Государственного стандартного образца вычитают величину оптической плотности контрольного опыта на реактивы. Строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс количества альфа - токоферола ацетата в микрограммах в 25 мл раствора, а по оси ординат - соответствующие им оптические плотности.

2. Приготовление реактивов: 0,5% раствор о-фенантролина и 0,2% раствор железа окисного хлорида готовят на абсолютном спирте. Растворы годны в течение 1 мес при хранении в банках оранжевого стекла с притертыми пробками при комнатной температуре.

 

12. Определение кальция пантотената

 

Определение содержания кальция пантотената проводят микробиологическим методом с Saccharomycodes ludwigii KM в качестве тест - микроорганизма.

Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, помещают в мерную колбу определенной вместимости, прибавляют небольшое количество воды, взбалтывают, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют (основной раствор). Из полученного основного раствора готовят последовательно разведения с таким расчетом, чтобы содержание в нем кальция пантотената было около 0,01 мкг в 1 мл.

Готовят растворы рабочих стандартных и испытуемых образцов в конических колбах вместимостью 50 мл по следующей схеме.

 

┌─────────┬─────────────────────────────┬────────────┬───────────┐

│ N колбы │    Количество рабочего      │ Количество │Количество │

         │раствора кальция пантотената │  воды, мл  │ основной 

         │(0,01 мкг/мл) или испытуемого│            │ среды, мл │

                  образца, мл                               

├─────────┼─────────────────────────────┼────────────┼───────────┤

    1                 0                    5,0        5,0   

    2                 0,5                  4,5        5,0   

    3                 1,0                  4,0        5,0   

    4                 1,5                  3,5        5,0   

    5                 2,0                  3,0        5,0   

    6                 3,0                  2,0        5,0   

    7                 4,0                  1,0        5,0   

└─────────┴─────────────────────────────┴────────────┴───────────┘

 

Общий объем растворов в колбах 10 мл.

Определение проводят не менее двух раз. Колбы закрывают ватными пробками и стерилизуют насыщенным водяным паром в паровом стерилизаторе при 1 ати (0,1 МПа) 15 мин. После охлаждения в каждую колбу вносят по 2 капли разведенной взвеси тест - культуры. Засеянные колбы инкубируют при температуре от 29 до 30 град. С 48-72 ч. Для прекращения роста дрожжевой культуры все колбы подвергают обработке текучим паром в течение 5 мин. После этого колбы охлаждают и интенсивность роста тест - культуры в колбах с растворами рабочего стандартного и испытуемого образцов измеряют на фотоэлектроколориметре - нефелометре при длине волны около 540 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Содержание C18H32CaN2O10 (кальция пантотената) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

 

                              С х б х К

                        Х = -------------,

                            а х 1 000 000

 

где С - среднеарифметическое содержание кальция пантотената, найденное по стандартной кривой из 6 возрастающих концентраций растворов испытуемого образца, в микрограммах; К - коэффициент разведения; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже в граммах; 1 000 000 - пересчет в граммы.

 

Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца кальция пантотената: 0,0500 г кальция пантотената в пересчете на 100% вещество по содержанию азота растворяют в 25% спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем раствора тем же спиртом до метки (основной раствор).

1 мл основного раствора содержит 1 мг кальция пантотената.

Раствор годен в течение 2 мес при хранении в банке с притертой пробкой при 4-6 град. С.

1 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки (рабочий раствор).

Рабочий раствор содержит 0,01 мкг кальция пантотената в 1 мл.

2. Построение стандартной кривой: на оси абсцисс откладывают содержание кальция пантотената в колбах стандартного ряда, а на оси ординат - соответствующие им значения процента светопропускания. По полученным точкам строят стандартную кривую.

3. Поддержание тест - культуры: S. ludwigii KM поддерживают на скошенном сусло - агаре, приготовленном из солодового сусла, доведенного до 7 град. Б (Баллинга) с помощью сахарометра, с добавлением 1,5% агара микробиологического. Инкубацию ведут при температуре от 29 до 30 град. С в течение 48 ч. Тест - культуру хранят при температуре от 4 до 6 град. С, пересевают не реже одного раза в месяц.

4. Приготовление основной среды. Состав среды:

    сахарозы                                         40       г

    аммония сульфата (х.ч.)                          6        г

    магния сульфата (х.ч.)                           1,4      г

    натрия хлорида (х.ч.)                            1        г

    калия фосфата однозамещенного (х.ч.)             2        г

    калия фосфата двузамещенного (х.ч.)              0,2      г

    тиамина хлорида                                  0,002    г

    кислоты никотиновой                              0,002    г

    пиридоксина гидрохлорида                         0,0002   г

    биотина (ТУ 64-5-94-84 ч.д.а. или ч.)            0,000002 г

    воды                                          до 1        л

рН среды до стерилизации 5,5-5,7 (потенциометрически).

Сахарозу предварительно обрабатывают углем активированным осветляющим. Для этого к 100 мл 20% раствора сахарозы прибавляют 5 г угля, встряхивают в течение 40 мин и фильтруют через бумажный фильтр.

5. Приготовление посевного материала: небольшое количество 48-часовой культуры S. ludwigii KM переносят петлей в 10 мл среды, состоящей из 5 мл основной среды и 5 мл воды. Инкубацию ведут в течение 2 сут. Затем от 0,2 до 0,5 мл этой суспензии переносят в 15 мл раствора натрия хлорида изотонического 0,9%; мутность используемой суспензии для засева должна быть 96-98% по шкале светопропускания фотоэлектроколориметра - нефелометра при длине волны около 540 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

 

СТАНДАРТНЫЕ ОБРАЗЦЫ

 

Стандартные образцы - это вещества, с которыми проводят сравнение испытуемых лекарственных средств при проведении их анализа с использованием физико - химических и биологических методов.

Стандартные образцы условно разделяют на химические и биологические. Один и тот же образец в соответствии с указаниями частной статьи может использоваться и для физико - химических, и для биологических анализов.

Стандартные образцы подразделяются на Государственные стандартные образцы (ГСО), рабочие стандартные образцы (РСО) и стандартные образцы веществ - свидетелей (СОВС).

Выпуск Государственных стандартных образцов осуществляют в соответствии с фармакопейной статьей. Фармакопейная статья на ГСО разрабатывается и пересматривается предприятиями (организациями), выпускающими или разрабатывающими лекарственные средства, согласовывается с Государственным научно - исследовательским институтом по стандартизации и контролю лекарственных средств (ГНИИСКЛС) и утверждается в установленном порядке. Аттестацию каждой серии ГСО в соответствии с требованиями фармакопейной статьи осуществляет ГНИИСКЛС. На этикетке ГСО указывают его активность или процентное содержание, при отсутствии этого указания стандартный образец принимают за 100%.

В качестве рабочих стандартных образцов используют образцы серийных лекарственных веществ, соответствующие требованиям фармакопейной статьи. При расчете количественного содержания определяемого вещества в лекарственной форме учитывают фактическое содержание данного вещества в РСО.

РСО, предназначенные для проведения анализа лекарственных средств с использованием биологических методов, аттестуют в ГНИИСКЛС.

Стандартные образцы веществ - свидетелей используют для определения примесей или компонентного состава лекарственных средств. В качестве СОВС могут быть использованы ГСО, РСО, а также вещества, специально изготовленные и аттестованные в порядке, предусмотренном частной фармакопейной статьей.

Нормативно - техническую документацию на ГСО необходимо разрабатывать с учетом требований к соответствующему Международному стандартному образцу ВОЗ.

Настоящая статья не распространяется на стандартные образцы медицинских иммунобиологических препаратов, а также на стандартные образцы радиофармацевтических препаратов.

 

ТИТРОВАННЫЕ РАСТВОРЫ

 

Общие замечания

 

Титрованными растворами называются растворы точно известной концентрации, предназначенные для целей объемного анализа.

Концентрация титрованного раствора (титранта) обычно выражается его молярностью, титром или титром по определенному веществу.

Молярность - это выраженное в молях количество растворенного вещества, содержащееся в одном литре раствора. Молярность вычисляется как отношение количества растворенного вещества к объему раствора (размерность - моль/л).

Титр - это выраженная в граммах масса растворенного вещества, содержащаяся в одном миллилитре раствора. Титр вычисляют как отношение массы растворенного вещества к объему раствора (размерность - г/мл).

Титр титранта по определяемому веществу - это выраженная в граммах масса определяемого вещества, эквивалентная одному миллилитру данного титранта. Титр по определяемому веществу вычисляют, исходя из молярности или титра титранта с учетом стехиометрических коэффициентов уравнения химической реакции, протекающей при титровании, и молярных масс реагирующих веществ (размерность - г/мл).

 

    Примечание. Моль  представляет  собой   количество   вещества,

содержащее  столько специфицированных структурных единиц,  сколько

атомов содержится в 0,012 кг (12 г) изотопа    углерода-12, т.  е.

                             23

один моль содержит 6,022 х 10   (число Авогадро) специфицированных

структурных  единиц   вещества.   В   качестве   специфицированных

структурных  единиц  могут  быть  выбраны элементарные частицы,  а

также ионы,  атомы,  молекулы или их доли.  В аналитической  химии

величину  этих  долей  выбирают  так,  чтобы  каждая  из  них была

ответственна за  передачу  электрона  или  перенос  одной  единицы

заряда соответственно     при     протекании     окислительно    -

восстановительных или объемных реакций,  лежащих в основе  данного

аналитического метода.  Для обозначения такой доли иона, атома или

молекулы принят термин "условная частица" (УЧ).

    В качестве   единицы   измерения    массы    специфицированных

структурных  единиц  и  в  том  числе  условных  частиц используют

                                                       23

атомную единицу массы (углеродную единицу).  6,022 х 10    атомных

единиц  массы составляют один грамм,  следовательно,  масса одного

моля  вещества,  выраженная  в  граммах,  численно   равна   массе

выбранной  специфицированной  структурной  единицы,  выраженной  в

атомных единицах массы (углеродных единицах).

 

Для приготовления титрованных растворов применяют химически чистые вещества. Навеску такого вещества растворяют в определенном объеме свежепрокипяченной и охлажденной дистиллированной воды или другого растворителя и тщательно перемешивают.

Титрованные растворы можно готовить, пользуясь соответствующими фиксаналами.

Если вещество нельзя получить в достаточно чистом виде или его концентрация изменяется при хранении раствора, то готовят раствор приблизительной концентрации, несколько большей, чем необходимо по расчету.

Титр полученного раствора устанавливают по стандартному титрованному раствору (фиксаналу) или по точной навеске другого химически чистого вещества, устойчивого при хранении.

При установке титра титруемый раствор берут пипеткой и обязательно проводят контрольный опыт.

Концентрацию раствора вычисляют одним из указанных ниже способов.

Первый способ - по навеске химически чистого вещества. Молярность (М, моль/л) вычисляют по следующей формуле:

 

                             а х 1000

                         М = ----------,

                               Э х V

 

где а - навеска химически чистого вещества в граммах; Э - молярная масса условных частиц химически чистого вещества в граммах на моль; V - объем раствора, пошедшего на титрование навески, в миллилитрах; 1000 - количество миллилитров в 1 л раствора.

Второй способ - по титрованному раствору известной концентрации.

Молярность (М, моль/л) вычисляют по следующей формуле:

 

                               М0 х V0

                         М = ----------,

                                  V

 

где М0 - молярность раствора вещества, по которому устанавливается титр, моль/л; V0 - объем раствора, по которому устанавливается титр, в миллилитрах; V - объем раствора, молярность которого устанавливают, в миллилитрах.

Для приготовленных титрованных растворов вычисляют поправочный коэффициент к молярности (К), представляющий собой отношение реально полученной концентрации титрованного раствора к теоретически заданной. Коэффициент К должен находиться в пределах от 0,98 до 1,02. При отклонении величины К от указанных пределов растворы необходимо соответственно укрепить или разбавить.

В описании каждого титрованного раствора указывается теоретическое содержание химически чистого вещества в 1 мл раствора.

Титрованные растворы хранят при комнатной температуре, защищая их при необходимости от воздействия углекислоты и влаги воздуха и от прямых солнечных лучей.

 

Раствор аммония роданида (0,1 моль/л)

 

NH4SCN                                                 М. м. 76,12

 

1 мл раствора содержит 0,007612 г аммония роданида.

Приготовление. 7,7 г аммония роданида растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. К 25 мл раствора серебра нитрата (0,1 моль/л) прибавляют 50 мл воды, 2 мл азотной кислоты, 2 мл раствора железоаммониевых квасцов и титруют приготовленным раствором аммония роданида до желто - розового окрашивания раствора. Молярность раствора вычисляют по второму способу.

 

Раствор кали едкого спиртовой (0,5 моль/л)

 

КОН                                                    М. м. 56,11

 

1 мл раствора содержит 0,02806 г калия гидроокиси.

Приготовление. 33 г кали едкого растворяют в 20 мл воды в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора очищенным спиртом до 1 л. Раствор оставляют на 24 ч. Сливают прозрачную жидкость с осадка в стеклянный сосуд с хорошо подобранной резиновой пробкой.

 

Примечание. Получение очищенного спирта: смесь в соотношении 1 л 95% спирта и 10 г кали едкого кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин и затем спирт отгоняют.

 

Установка титра. 25 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л) титруют приготовленным раствором кали едкого до слабо - розового окрашивания (индикатор - фенолфталеин). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

Хранить в склянках с резиновыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор кали едкого спиртовой (0,1 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,005611 г калия гидроокиси.

Приготовление. 200 мл раствора кали едкого спиртового (0,5 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора очищенным спиртом до метки.

Установка титра. 25 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л) титруют приготовленным раствором кали едкого до слабо - розового окрашивания (индикатор - фенолфталеин). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

Хранить в стеклянных сосудах с резиновыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор кали едкого водно - спиртовой (1 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,05611 г калия гидроокиси.

Приготовление. 66 г кали едкого растворяют в 450 мл воды в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора очищенным спиртом до метки. Раствор оставляют на 24 ч. Сливают прозрачную жидкость с осадка в стеклянный сосуд с хорошо подобранной резиновой пробкой.

Установка титра. 25 мл раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л) титруют приготовленным раствором кали едкого до слабо - розового окрашивания (индикатор - фенолфталеин). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

Хранить в стеклянных сосудах с резиновыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор кали едкого

водно - спиртовой (0,05 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,002806 г калия гидроокиси.

Приготовление. 100 мл раствора кали едкого спиртового (0,5 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 400 мл воды и доводят объем раствора очищенным спиртом до метки.

Установка титра. 25 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,05 моль/л) титруют приготовленным раствором кали едкого до слабо - розового окрашивания (индикатор - фенолфталеин). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

Раствор применяют свежеприготовленным.

 

Раствор натра едкого (1 моль/л)

 

NaOH                                                   M. м. 40,00

 

1 мл раствора содержит 0,0400 г натрия гидроокиси.

Приготовление исходного раствора. 160 г натра едкого растворяют в 300 мл воды, сосуд плотно закрывают резиновой пробкой и оставляют до следующего дня. Прозрачную жидкость сливают с осадка и используют для приготовления растворов натра едкого.

Хранить в стеклянных банках, плотно укупоренных резиновыми пробками.

Приготовление раствора натра едкого (1 моль/л). 80 мл исходного раствора натра едкого помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Проверка на содержание карбонатов. 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л) титруют приготовленным раствором натра едкого (индикатор - фенолфталеин). К оттитрованному раствору прибавляют по каплям раствор хлористоводородной кислоты (1 моль/л) до исчезновения розового окрашивания и кипятят до уменьшения объема (около 20 мл). В процессе кипения при возникновении розового окрашивания прибавляют раствор хлористоводородной кислоты (1 моль/л) до обесцвечивания. Раствор охлаждают и в случае наличия розовой окраски прибавляют раствор хлористоводородной кислоты до обесцвечивания. Суммарное количество прибавленного раствора хлористоводородной кислоты не должно превышать 0,1 мл.

Установка титра. Около 5 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 75 мл воды и титруют приготовленным раствором натра едкого (индикатор - фенолфталеин). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

Хранить в стеклянных сосудах, плотно укупоренных резиновыми пробками.

Стеклянные сосуды, соединенные с бюретками, предохраняют трубками с натронной известью.

 

Раствор натра едкого (0,5 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0200 г натрия гидроокиси.

Приготовление. 40 мл исходного раствора натра едкого помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л).

Установка титра. Около 2,5 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 50 мл воды и далее поступают так же, как при установке титра раствора натра едкого (1 моль/л).

 

Раствор натра едкого (0,1 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0040 г натрия гидроокиси.

Приготовление. 8 мл исходного раствора натра едкого помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л).

Установка титра. Около 0,5 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и далее поступают так же, как при установке титра раствора натра едкого (1 моль/л).

 

Раствор натра едкого (0,05 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0020 г натрия гидроокиси. Приготовление. 4 мл исходного раствора натра едкого помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,05 моль/л).

Установка титра. Около 0,25 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и далее поступают так же, как при установке титра раствора натра едкого (1 моль/л).

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор натра едкого (0,02 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0008 г натрия гидроокиси.

Приготовление. 1,6 мл исходного раствора натра едкого помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,02 моль/л).

Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и далее поступают так же, как при установке титра раствора натра едкого (1 моль/л).

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор натра едкого (0,01 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0004 г натрия гидроокиси.

Приготовление. 0,8 мл исходного раствора натра едкого помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят как описано при приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л).

Установка титра. Около 0,05 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и далее поступают так же, как при установке титра раствора натра едкого (1 моль/л).

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор натра едкого в смеси

метилового спирта и бензола (0,1 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0040 г натрия гидроокиси.

Приготовление. 4,2 г натра едкого растворяют в 100 мл метилового спирта в мерной колбе вместимостью 1 л. Объем раствора доводят бензолом и метиловым спиртом до метки, прибавляя их попеременно при помешивании. Соотношение метилового спирта и бензола при приготовлении раствора должно быть примерно 1:4.

 

Примечание. В случае получения непрозрачного раствора его оставляют на 12 ч, после чего прозрачную жидкость быстро сливают с осадка.

 

Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) бензойной кислоты х.ч. растворяют в 20 мл диметилформамида, нейтрализованного непосредственно перед титрованием по тимоловому синему в диметилформамиде, и титруют приготовленным раствором натра едкого в присутствии того же индикатора до перехода окраски от желтой к синей. Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

 

Примечание. Установку титра следует проводить в тщательно закрытых сосудах. Титрование рекомендуется проводить в атмосфере инертного газа.

 

Раствор натрия метилата (0,1 моль/л)

 

CH3ONa                                                 М. м. 54,02

 

1 мл раствора содержит 0,005402 г натрия метилата.

Приготовление. Около 2,3 г свежеочищенного от окисной пленки металлического натрия малыми порциями растворяют в 300 мл метилового спирта в мерной колбе вместимостью 1 л, охлаждая колбу в ледяной воде. После полного растворения металла объем раствора доводят бензолом или толуолом, постепенно помешивая, до метки.

Установка титра. Проводят так же, как в случае установки титра раствора натра едкого в смеси метилового спирта и бензола (0,1 моль/л).

 

Раствор йода (0,1 моль/л)

УЧ (1/2 I2)

 

I2                                                    М. м. 253,80

 

1 мл раствора содержит 0,01269 г йода.

Приготовление. 13 г кристаллического йода растворяют в растворе 36 г калия йодида в 50 мл воды в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. К 25 мл раствора натрия тиосульфата (0,1 моль/л) прибавляют 25 мл воды и титруют приготовленным раствором йода до синего окрашивания (индикатор - крахмал). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор йода (0,01 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,001269 г йода.

Приготовление. 100 мл раствора йода (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. К 25 мл раствора натрия тиосульфата (0,01 моль/л) прибавляют 25 мл воды и далее поступают, как описано при установке титра раствора йода (0,1 моль/л).

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор йодмонохлорида (0,1 моль/л)

УЧ (1/2 ICl)

 

ICl                                                   М. м. 162,36

 

1 мл раствора содержит 0,008118 г йодмонохлорида.

Приготовление. 5,53 г калия йодида и 3,55 г калия йодата помещают в стеклянный сосуд с притертой пробкой, прибавляют 50 мл воды, 40 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и взбалтывают до полного растворения образующегося при реакции йода; затем прибавляют 10 мл хлороформа, переносят в делительную воронку и снова взбалтывают. Если хлороформный слой окрашивается в фиолетовый цвет, прибавляют по каплям 1% раствор калия йодата при сильном взбалтывании до обесцвечивания хлороформного слоя. Если же хлороформный слой остается бесцветным, прибавляют по каплям 1% раствор калия йодида до появления слабо - розовой окраски. После отстаивания водный слой сливают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки. Раствор должен иметь лимонно - желтый цвет.

Установка титра. 25 мл приготовленного раствора йодомонохлорида помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют 1 г калия йодида и оставляют в защищенном от света месте на 15 мин. Выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор калия бромата (0,1 моль/л)

УЧ (1/6 KBrO3)

 

KBrO3                                                 М. м. 167,00

 

1 мл раствора содержит 0,002784 г калия бромата.

Приготовление. 2,80 г калия бромата растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. 25 мл приготовленного раствора калия бромата помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют 100 мл воды, 5 мл хлористоводородной кислоты, тотчас закрывают пробкой и взбалтывают. Затем прибавляют 2 г калия йодида, растворенного в 10 мл воды, снова закрывают пробкой, взбалтывают и оставляют на 5 мин в защищенном от света месте. Выделившийся йод титруют раствором натрия тиосульфата (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор калия бихромата (0,1 моль/л)

УЧ (1/6 K2 Cr2 О7)

 

K2Cr2O7                                               М. м. 294,18

 

1 мл раствора содержит 0,004903 г калия бихромата.

Приготовление. Около 4,903 г (точная навеска) калия бихромата, перекристаллизованного из горячей воды, тонко растертого и высушенного при температуре от 130 до 150 град. С до постоянной массы, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки. Молярность раствора вычисляют, исходя из величины навески.

 

Раствор калия йодата (0,1 моль/л)

УЧ (1/6 KIO3)

 

KIO3                                                  М. м. 214,00

 

1 мл раствора содержит 0,003567 г калия йодата.

Приготовление. Около 3,567 г (точная навеска) калия йодата х.ч., предварительно высушенного при температуре 110 град. С до постоянной массы и тонко растертого, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. 20 мл приготовленного раствора калия йодата помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют 100 мл воды, 25 мл разведенной серной кислоты, 2 г калия йодида и оставляют на 10 мин в защищенном от света месте. Выделившийся йод титруют раствором натрия тиосульфата (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор калия перманганата (0,1 моль/л)

УЧ (1/5 KMnO4)

 

KMnO4                                                 M. м. 158,03

 

1 мл раствора содержит 0,003161 г калия перманганата.

Приготовление. 3,3 г калия перманганата растворяют в 1 л воды в конической колбе вместимостью 2 л и кипятят раствор в течение 10 мин. Закрывают пробкой, оставляют на 2 сут и затем фильтруют через стеклянный фильтр N 2.

Установка титра. Около 0,2 г (точная навеска) натрия оксалата, высушенного при температуре 110 град. С до постоянной массы, растворяют в 80 мл разведенной серной кислоты, нагревают до 70 град. С и медленно титруют приготовленным раствором калия перманганата до слабо - розового окрашивания, устойчивого в течение 15 с. При окончании титрования температура раствора не должна быть ниже 60 град. С. Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор натрия нитрита (0,1 моль/л)

 

NaNO2                                                  М. м. 69,00

 

1 мл раствора содержит 0,0069 г натрия нитрита.

Приготовление. 7,3 г натрия нитрита растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,2 г (точная навеска) сульфаниловой кислоты, дважды перекристаллизованной из воды и высушенной при температуре 120 град. С до постоянной массы, помещают в толстостенный стакан, прибавляют 0,1 г натрия гидрокарбоната, растворяют в 10 мл воды, прибавляют 60 мл воды, 10 мл разведенной хлористоводородной кислоты, 1 г калия бромида и далее поступают, как указано в статье "Нитритометрия" (ГФ XI, вып. 1, с. 190). В случае применения внутренних индикаторов используют тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим. Если в соответствующей частной статье рекомендуется нейтральный красный, то титр раствора натрия нитрита устанавливают с тем же индикатором. Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Титр раствора натрия нитрита (0,1 моль/л) проверяют 1 раз в месяц.

Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор натрия нитрита (0,05 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,00345 г натрия нитрита.

Приготовление. 3,65 г натрия нитрита растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) сульфаниловой кислоты, дважды перекристаллизованной из воды и высушенной при температуре 120 град. С до постоянной массы, помещают в толстостенный стакан и далее поступают, как указано при установке титра раствора натрия нитрита (0,1 моль/л). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Титр раствора натрия нитрита проверяют 1 раз в 2 нед. Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

 

Примечание. Титр раствора натрия нитрита можно устанавливать также по стрептоциду, предварительно очищенному перекристаллизацией из горячей воды.

 

Раствор натрия тиосульфата (0,1 моль/л)

 

Na2S2O3 х 5H2O                                        M. м. 248,17

 

1 мл раствора содержит 0,02482 г натрия тиосульфата.

Приготовление. 26 г натрия тиосульфата и 0,1 г натрия карбоната безводного растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки. Раствор оставляют на 2 сут в защищенном от света месте. При наличии осадка жидкость сливают с осадка.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) калия бихромата, перекристаллизованного из горячей воды, мелкорастертого, высушенного при температуре от 130 до 150 град. С до постоянной массы, растворяют в 50 мл воды в колбе с притертой пробкой, прибавляют 2 г калия йодида, 5 мл хлористоводородной кислоты, закрывают пробкой, смоченной раствором калия йодида, и оставляют в защищенном от света месте на 10 мин. Прибавляют 100 мл воды, обмывая пробку водой, и титруют приготовленным раствором натрия тиосульфата до зеленовато - желтого окрашивания. Затем прибавляют 2 мл раствора крахмала и продолжают титровать до перехода синей окраски в светло - зеленую. Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света и углекислоты воздуха месте.

 

Раствор натрия тиосульфата (0,02 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,004964 г натрия тиосульфата.

Приготовление. 20 мл раствора натрия тиосульфата (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,3 г (точная навеска) калия бихромата, перекристаллизованного из горячей воды, мелкорастертого, высушенного при температуре от 130 до 150 град. С до постоянной массы, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 250 мл и доводят объем раствора водой до метки. 25 мл полученного раствора калия бихромата помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют 0,2 г калия йодида, 3 мл хлористоводородной кислоты, закрывают пробкой, смоченной раствором калия йодида, и оставляют на 10 мин в защищенном от света месте. Прибавляют 50 мл воды, обмывая пробку водой, и титруют, как описано при установке титра раствора натрия тиосульфата (0,1 моль/л). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор натрия тиосульфата (0,01 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,002482 г натрия тиосульфата.

Приготовление. 10 мл раствора натрия тиосульфата (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Как описано при установке титра раствора натрия тиосульфата (0,02 моль/л).

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор ртути окисной нитрата (0,1 моль/л)

УЧ [1/2 Hg(NO3)2]

 

Hg(NO3)2                                              М. м. 324,60

 

1 мл раствора содержит 0,01623 г ртути окисной нитрата.

Приготовление. 17,2 г ртути окисной нитрата растворяют в 2 мл концентрированной азотной кислоты и 50 мл воды в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) натрия хлорида, дважды перекристаллизованного из воды и слабо прокаленного в тигле при температуре от 250 до 300 град. С, растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором ртути окисной нитрата до перехода розовато - желтой окраски раствора в светло - сиреневую (индикатор - дифенилкарбазон). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор свинца нитрата (0,05 моль/л)

 

Pb(NO3)2                                              М. м. 331,20

 

1 мл раствора содержит 0,01656 г свинца нитрата.

Приготовление. 17 г свинца нитрата растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. 20 мл приготовленного раствора свинца нитрата помещают в колбу, прибавляют 7 г гексаметилентетрамина, 5 мл разведенной хлористоводородной кислоты и титруют раствором трилона Б (0,05 моль/л) до перехода красно - фиолетового окрашивания в желтое (индикатор - ксиленоловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

 

Раствор серебра нитрата (0,1 моль/л)

 

AgNO3                                                 M. м. 169,87

 

1 мл раствора содержит 0,01699 г серебра нитрата.

Приготовление. 17 г серебра нитрата растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) натрия хлорида, дважды перекристаллизованного из воды и слабо прокаленного в тигле при температуре от 250 до 300 град. С, растворяют в 50 мл воды, и титруют приготовленным раствором серебра нитрата до появления красноватого осадка (индикатор - калия хромат). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Хранить в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

 

Раствор серебра нитрата (0,05 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,008495 г серебра нитрата.

Приготовление. 100 мл раствора серебра нитрата (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,08 г (точная навеска) натрия хлорида, дважды перекристаллизованного из воды и слабо прокаленного в тигле при температуре от 250 до 300 град. С, растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором серебра нитрата до появления красноватого осадка (индикатор - калия хромат). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор серной кислоты (1 моль/л)

УЧ (1/2 H2SO4)

 

H2SO4                                                  М. м. 98,07

 

1 мл раствора содержит 0,04904 г серной кислоты.

Приготовление. Медленно и осторожно, при постоянном перемешивании вливают 30 мл концентрированной серной кислоты в 1000 мл воды.

Установка титра. Около 5 г натрия гидрокарбоната прокаливают до постоянной массы при температуре от 280 до 300 град. С на песчаной бане в платиновом тигле, перемешивая время от времени платиновой проволокой.

Около 1 г (точная навеска) натрия карбоната, полученного, как описано выше, растворяют в 100 мл воды и титруют приготовленным раствором серной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор серной кислоты (0,1 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,004904 г серной кислоты.

Приготовление. Медленно и осторожно, при постоянном перемешивании вливают 3 мл концентрированной серной кислоты в 1000 мл воды.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) натрия карбоната, приготовленного, как указано при установке титра раствора серной кислоты (1 моль/л), растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором серной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор серной кислоты (0,05 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,002452 г серной кислоты.

Приготовление. 100 мл раствора серной кислоты (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) натрия карбоната, приготовленного, как указано при установке титра раствора серной кислоты (1 моль/л), растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором серной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор серной кислоты (0,01 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0004904 г серной кислоты.

Приготовление. 100 мл раствора серной кислоты (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,015 г (точная навеска) натрия карбоната, приготовленного, как указано при установке титра раствора серной кислоты (1 моль/л), растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором серной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор трилона Б (0,05 моль/л)

 

C10H14N2Na2O8 х 2H2O                                  M. м. 372,24

 

    1 мл    раствора   содержит   0,01861   г   динатриевой   соли

                      1   1

этилендиамин - N, N, N , N - тетрауксусной кислоты дигидрата.

Приготовление. 18,8 г трилона Б растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют.

Установка титра. Около 3,27 г (точная навеска) цинка металлического (ГОСТ 3640-79 "ЦВ" или "ЦО") растворяют в 40 мл разведенной серной кислоты в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

К 25 мл приготовленного раствора цинка прибавляют 5 мл аммиачного буферного раствора, 0,1 г индикаторной смеси эриохрома черного Т, 70 мл воды, перемешивают до растворения индикатора и титруют раствором трилона Б до перехода фиолетовой окраски в ярко - синюю (без фиолетового оттенка). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор хлористоводородной кислоты (1 моль/л)

 

HCI                                                    М. м. 36,46

 

1 мл раствора содержит 0,03646 г хлористого водорода.

Приготовление. 85 мл концентрированной хлористоводородной кислоты (плотность 1,19) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят объем раствора водой до метки и тщательно перемешивают.

Установка титра. Около 5 г натрия гидрокарбоната прокаливают до постоянной массы при температуре от 280 до 300 град. С на песчаной бане в платиновом тигле, перемешивая время от времени платиновой проволокой.

Около 1 г (точная навеска) натрия карбоната, полученного, как описано выше, растворяют в 100 мл воды и титруют приготовленным раствором хлористоводородной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,01823 г хлористого водорода.

Приготовление. 42 мл концентрированной хлористоводородной кислоты (плотность 1,19) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят объем раствора водой до метки и тщательно перемешивают.

Установка титра. Около 0,6 г (точная навеска) натрия карбоната, полученного, как описано при установке титра раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л), растворяют в 100 мл воды и титруют приготовленным раствором хлористоводородной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,003646 г хлористого водорода. Приготовление. 8,5 мл концентрированной хлористоводородной кислоты (плотность 1,19) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят объем раствора водой до метки и тщательно перемешивают.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) натрия карбоната, полученного, как описано при установке титра раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л), растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором хлористоводородной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор хлористоводородной кислоты (0,05 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,001823 г хлористого водорода.

Приготовление. 100 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) натрия карбоната, полученного, как описано при установке титра раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л), растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором хлористоводородной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор хлористоводородной кислоты (0,02 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0007292 г хлористого водорода.

Приготовление. 100 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,05 г (точная навеска) натрия карбоната, полученного, как описано при установке титра раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л), растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором хлористоводородной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,0003646 г хлористого водорода.

Приготовление. 100 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.

Установка титра. Около 0,025 г (точная навеска) натрия карбоната, полученного, как описано при установке титра раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л), растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором хлористоводородной кислоты до появления розовато - оранжевого окрашивания (индикатор - метиловый оранжевый). Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Раствор в запас не готовят.

 

Раствор хлорной кислоты (0,1 моль/л)

 

HClO4                                                 М. м. 100,46

 

1 мл раствора содержит 0,01005 г хлорной кислоты.

Приготовление. 11 мл 60% или 8,5 мл 70% раствора хлорной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 500 мл ледяной уксусной кислоты.

Колбу помещают в холодную воду и прибавляют постепенно, при помешивании, уксусный ангидрид в количестве 30 мл или 21 мл соответственно. После охлаждения объем раствора доводят ледяной уксусной кислотой до 1 л и оставляют на 24 ч. Содержание воды определяют по методу К. Фишера, если необходимо, прибавляют воду или уксусный ангидрид до содержания воды в количестве от 0,01 до 0,2% и оставляют на 24 ч.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 20 мл ледяной уксусной кислоты и титруют приготовленным раствором хлорной кислоты в присутствии 2 капель раствора кристаллического фиолетового до перехода фиолетовой окраски в голубовато - зеленую. Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор хлорной кислоты (0,05 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,005025 г хлорной кислоты.

Приготовление. 50 мл раствора хлорной кислоты (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора ледяной уксусной кислотой до метки.

Установка титра. Как описано при установке титра раствора хлорной кислоты (0,1 моль/л). Навеску калия гидрофталата берут около 0,08 г (точная навеска).

 

Раствор хлорной кислоты (0,02 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,002010 г хлорной кислоты.

Приготовление. 20 мл раствора хлорной кислоты (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора ледяной уксусной кислотой до метки.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ледяной уксусной кислоте и доводят объем раствора той же кислотой до метки.

К 10 мл полученного раствора прибавляют 10 мл ледяной уксусной кислоты и титруют, как в случае раствора хлорной кислоты (0,1 моль/л). Молярность раствора с учетом разведения вычисляют по первому способу.

 

Раствор хлорной кислоты (0,01 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,001005 г хлорной кислоты.

Приготовление. 10 мл раствора хлорной кислоты (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора ледяной уксусной кислотой до метки.

Установка титра. Около 0,15 г (точная навеска) калия гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 град. С в течение 2 ч, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ледяной уксусной кислоте и доводят объем раствора той же кислотой до метки.

К 5 мл полученного раствора прибавляют 10 мл ледяной уксусной кислоты и титруют, как в случае раствора хлорной кислоты (0,1 моль/л). Молярность раствора с учетом разведения вычисляют по первому способу.

 

Примечание. Если растворы хлорной кислоты с поправочным коэффициентом, установленным при температуре t1, применяют при температуре t2, то вводят температурную поправку. Для этого измеряемый объем раствора хлорной кислоты, израсходованный на титрование анализируемого раствора, приводят к температуре t1

путем умножения на 1 + (ДЕЛЬТА t х 0,001), где ДЕЛЬТА t = t2 - t1.

 

Раствор хлорной кислоты

в метиловом спирте (0,1 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,01005 г хлорной кислоты.

Приготовление. 11 мл 60% или 8,5 мл 70% раствора хлорной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 500 мл метилового спирта и доводят объем раствора метиловым спиртом до метки. При необходимости используют метиловый спирт, очищенный от карбонилсодержащих соединений.

Установка титра. Около 0,1 г натрия салицилата (точная навеска), предварительно дважды перекристаллизованного из 95% спирта и высушенного до постоянной массы, растворяют в 10 мл метилового спирта, прибавляют равный объем ацетона, 2 капли раствора тимолового синего в метиловом спирте и титруют приготовленным раствором хлорной извести до перехода окраски от желтой к розовой. Молярность раствора вычисляют по первому способу.

 

Раствор хлорной кислоты

в нитрометане (0,1 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,01005 г хлорной кислоты.

Приготовление. 11 мл 60% или 8,5 мл 70% раствора хлорной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 500 мл нитрометана и доводят объем раствора нитрометаном до метки.

Установка титра. Как описано при установке титра раствора хлорной кислоты (0,1 моль/л).

 

Раствор хлорной кислоты

в нитрометане (0,05 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,005025 г хлорной кислоты.

Приготовление. 50 мл раствора хлорной кислоты в нитрометане (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора нитрометаном до метки.

Установка титра. Как описано при установке титра раствора хлорной кислоты (0,1 моль/л). Навеску калия гидрофталата берут около 0,08 г (точная навеска).

 

Раствор тетраэтиламмония гидроокиси (0,1 моль/л)

 

[(C2H5)4N]OH                                          М. м. 147,26

 

1 мл раствора содержит 0,01473 г тетраэтиламмония гидроокиси.

Приготовление. 30 г тетраэтиламмония йодида растворяют в 200 мл метилового спирта и встряхивают в течение 1 ч с 25 г тонко измельченной окиси серебра (ТУ 6-09-697-78) в стеклянном сосуде с притертой пробкой. По окончании встряхивания центрифугируют несколько миллилитров смеси и раствор испытывают на присутствие йодидионов (проба с нитратом серебра в азотнокислой среде). В случае образования осадка йодида серебра к основному раствору прибавляют еще 5 г окиси серебра и снова встряхивают 30 мин. По окончании реакции осадок йодида серебра отфильтровывают через стеклянный фильтр N 4. Реакционную колбу ополаскивают тремя порциями по 50 мл сухого бензола, бензольный раствор фильтруют через тот же фильтр и прибавляют к фильтрату. Затем фильтрат помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора бензолом до метки.

Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) бензойной кислоты растворяют в смеси 5 мл метилового спирта и 20 мл ацетона, нейтрализованных непосредственно перед титрованием по тимоловому синему в метиловом спирте, и титруют приготовленным раствором тетраэтиламмония гидроокиси до получения отчетливого синего окрашивания или потенциометрически со стеклянным электродом. Молярность раствора вычисляют по первому способу.

Примечание. Установку титра проводят в тщательно закрытых сосудах для титрования. Титрование лучше проводить в атмосфере инертного газа.

Хранить в стеклянных сосудах, снабженных поглотительными трубками, заполненными натронной известью для предохранения раствора от влаги и углекислоты воздуха.

 

Раствор церия сульфата (0,1 моль/л)

 

Ce(SO4)2 х 4Н2О                                        М. м. 404,3

                                          М. м. (безводный) 332,24

 

[Ce(SO4)2 х 2(NH4)2SO4] х 2H2O                         М. м. 632,5

                                           М. м. (безводный) 596,5

 

1 мл раствора содержит 0,03322 г церия сульфата.

Приготовление. 42 г церия сульфата растворяют в 500 мл воды, содержащей 28 мл концентрированной серной кислоты, если необходимо, подогревают. Охлаждают и доводят объем раствора водой до 1 л.

Раствор церия сульфата (0,1 моль/л) готовят также растворением 65 г церия аммония сульфата в растворе серной кислоты (1 моль/л) с последующим доведением объема тем же раствором серной кислоты до 1 л.

Установка титра. К 25 мл приготовленного раствора церия сульфата прибавляют 20 мл разведенной серной кислоты, 20 мл воды и 10 мл раствора калия йодида. Выделившийся йод титруют раствором натрия тиосульфата (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

 

Раствор церия сульфата (0,01 моль/л)

 

1 мл раствора содержит 0,003322 г церия сульфата.

Приготовление. 50 мл раствора церия сульфата (0,1 моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 250 мл раствора серной кислоты (1 моль/л) и доводят объем раствора той же кислотой до метки.

Установка титра. К 25 мл приготовленного раствора церия сульфата прибавляют 2 мл разведенной серной кислоты, 10 мл воды, 2 мл раствора калия йодида. Выделившийся йод титруют раствором натрия тиосульфата (0,01 моль/л) (индикатор - крахмал). Молярность раствора вычисляют по второму способу.

 

ИНДИКАТОРЫ

 

Индикаторы - химические вещества, которые при титриметрических методах анализа позволяют обнаруживать, что к титруемому веществу прибавлено эквивалентное количество титранта. Изменения, происходящие с индикаторами в точке эквивалентности, определяются визуальным или инструментальным методом.

В зависимости от реакций, на которых основаны титриметрические методы, различают индикаторы: кислотно - основные для водных и неводных сред; металлохромные (в комплексонометрии); адсорбционные (осадкообразующие) и окислительно - восстановительные.

Растворы и индикаторные смеси готовят из тонкорастертых индикаторов и вспомогательных веществ квалификации "химически чистый" или "чистый для анализа". Навеску индикатора берут с точностью 0,001 г и растворяют в мерной колбе (раствор индикатора) или растирают и перемешивают в ступке с вспомогательным веществом (индикаторная смесь).

Для приготовления растворов индикаторов в растворе натра едкого (0,02 моль/л) навеску индикатора растирают в ступке с раствором щелочи до растворения, полученный раствор переносят в мерную колбу.

Из водорастворимых индикаторов готовят 0,04% водные растворы.

Количество прибавляемого индикатора должно быть указано в частной статье.

Приготовление растворов и индикаторных смесей проводят в вытяжном шкафу с использованием индивидуальных средств защиты (респираторы, защитные очки, резиновые перчатки).

Индикаторы, индикаторные смеси и растворы индикаторов хранят в защищенном от света месте. Индикаторные смеси и растворы смешанных индикаторов хранят в банках или флаконах оранжевого стекла.

 

Ализариновый желтый Р

ТУ 6-09-1787-77

 

НАТРИЕВАЯ СОЛЬ

5-(N-НИТРОФЕНИЛ) АЗОСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ

 

C13H8N3NaO5                                           М. м. 309,21

 

Кристаллический порошок светло - коричневого, темно - коричневого или красно - коричневого цвета. Мало растворим в воде и 95% спирте, легко растворим при нагревании.

Переход окраски раствора от светло - желтой к красно - оранжевой в интервале рН 10,0-12,0.

Раствор индикатора. 0,1% раствор. Растворение проводят при нагревании на водяной бане.

 

Ализариновый красный С

ТУ 6-09-2105-77

 

НАТРИЕВОЙ СОЛИ 1,2-ДИГИДРОКСИАНТРАХИНОН-3-СУЛЬФОКИСЛОТЫ

МОНОГИДРАТ

 

C14H7Nao7S х H2O                                      М. м. 360,27

 

Мелкокристаллический порошок желто - оранжевого цвета. Легко растворим в воде, горячем 95% спирте; практически нерастворим в бензоле, хлороформе и эфире.

Переход окраски раствора от желтой к пурпурно - красной в интервале рН 4,6-6,0.

Раствор индикатора. 0,1% раствор.

 

Бромкрезоловый зеленый (синий)

ТУ 6-09-1415-74

 

3',3",5', 5"-ТЕТРАБРОМ-М-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИН

 

C21H14Br4O5S                                           М. м. 698,0

 

Кристаллический порошок светло - коричневого цвета. Мало растворим в воде, растворим в 95% спирте и растворах щелочей, практически нерастворим в эфире.

Переход окраски раствора от желтой к синей в интервале рН 3,8-5,4.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 7,15 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта и доводят объем раствора водой до 100 мл.

 

Бромкрезоловый зеленый (синий) водорастворимый

ТУ 6-09-1409-76

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ 3', 3", 5',

5"-ТЕТРАБРОМ-М-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C21H17Br4NO5S                                          M. м. 715,0

 

Порошок черного цвета. Легко растворим в воде.

Переход окраски раствора от желтой к синей в интервале рН 3,8-5,4.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

 

Бромкрезоловый пурпуровый

ТУ 6-09-1386-76

 

5', 5"-ДИБРОМ-О-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИН

 

C21H16Br2O5S                                           М. м. 540,2

 

Мелкокристаллический порошок розового, сиреневого или коричневого цвета. Мало растворим в воде, растворим в 95% спирте, эфире, растворах едких щелочей, аммиака и углекислых солей щелочных металлов.

Переход окраски раствора от желтой к пурпуровой в интервале рН 5,2-6,8.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта при нагревании на водяной бане и после охлаждения доводят объем раствора водой до 100 мл.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 9,25 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

 

Бромкрезоловый пурпуровый водорастворимый

ТУ 6-09-2425-77

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ

5', 5"-ДИБРОМ-О-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C21H19Br2NO5S                                          М. м. 557,3

 

Мелкокристаллический порошок темно - красного или темно - коричневого цвета. Легко растворим в воде.

Переход окраски раствора от желтой к пурпуровой в интервале рН 5,2-6,8.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

 

Бромтимоловый синий

ТУ 6-09-2086-77

 

3,3'-ДИБРОМТИМОЛСУЛЬФОФТАЛЕИН

 

C27H28Br2O5S                                           М. м. 624,4

 

Мелкокристаллический порошок розово - фиолетового цвета. Практически нерастворим в воде, легко растворим в 95% спирте, эфире, растворах едких щелочей, аммиака и углекислых солей щелочных металлов.

Переход окраски раствора от желтой к синей в интервале рН 6,0-7,6.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта при нагревании на водяной бане и после охлаждения доводят объем раствора водой до 100 мл.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 8 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

3. 1% раствор в диметилформамиде.

 

Бромтимоловый синий водорастворимый

ТУ 6-09-2045-77

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ 3,3'-ДИБРОМТИМОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C27H31Br2NO5S                                          М. м. 641,4

 

Мелкокристаллический порошок от темно - коричневого до черного цвета. Растворим в воде.

Переход окраски раствора от желтой к синей в интервале рН 6,0-7,6.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

 

Бромфеноловый синий

ТУ 6-09-1058-76

 

3', 3", 5", 5" -ТЕТРАБРОМФЕНОЛСУЛЬФОФТАЛЕИН

 

C19H10Br4NO5S                                          М. м. 670,0

 

Кристаллический порошок от розовато - коричневого до красно - коричневого цвета. Мало растворим в воде, растворим в 95% спирте и растворах щелочей.

Переход окраски раствора от желтой к синей в интервале рН 3,0-4,6.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта при нагревании на водяной бане и после охлаждения доводят объем раствора водой до 100 мл.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 7,5 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

 

Бромфеноловый синий водорастворимый

ТУ-6-09-3719-83

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ

3',3",5',5"-ТЕТРАБРОМФЕНОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C19H13Br4NO5S                                          М. м. 687,0

 

Мелкокристаллический порошок черного цвета. Легко растворим в воде.

Переход окраски раствора от желтой к синей в интервале рН 3,0-4,6.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

 

Диметиловый желтый

 

Метиловый желтый

ТУ 6-09-4280-76

 

4-ДИМЕТИЛАМИНОАЗОБЕНЗОЛ

 

C14H15N3                                              М. м. 225,28

 

Мелкие золотисто - желтые пластинки или порошок оранжево - желтого цвета. Практически нерастворим в воде, растворим в 95% спирте, бензоле, хлороформе, эфире, разведенных минеральных кислотах.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 3,0-4,0.

Растворы индикатора. 1. 0,1% раствор в 95% спирте.

2. 0,1% раствор в бензоле.

 

Дифенилкарбазон

ТУ 6-09-5215-85

 

C13H12N4O                                             М. м. 240,27

 

Кристаллический порошок от желто - оранжевого до оранжевого цвета. Практически нерастворим в воде, растворим в 95% спирте при нагревании, хлороформе и бензоле.

Раствор индикатора. 1% раствор в 95% спирте. Растворение проводят при нагревании на водяной бане. Хранят во флаконах оранжевого стекла.

Срок годности раствора 15 суток.

 

Индигокармин ТУ 6-09-714-71

ТУ 6-09-07-545-85

 

ДИНАТРИЕВАЯ (ИЛИ ДИКАЛИЕВАЯ) СОЛЬ

ИНДИГО-5,5'-ДИСУЛЬФОКИСЛОТЫ

 

C16H8N2Na2O8S2                                         М. м. 466,4

C16H8K2N2O8S2                                          М. м. 498,6

 

Темно - синий порошок. Мало растворим (динатриевая соль) или растворим (дикалиевая соль) в воде, практически нерастворим в органических растворителях. Растворы индигокармина синего цвета, под влиянием восстановителей обесцвечиваются.

Переход окраски раствора от синей к желтой в интервале рН 11,6-14,0.

Растворы индикатора. 1. 0,1% раствор.

2. 0,25% раствор. Растворение проводят в горячей воде.

Как окислительно - восстановительный индикатор применяют 0,25% раствор.

 

Калия хромат

 

Калий хромовокислый

ГОСТ 4459-75

 

K2CrO4                                                M. м. 194,20

 

Мелкие кристаллы желтого цвета. Растворим в воде. Токсичен. Раствор индикатора. 5% раствор.

 

Кальконкарбоновая кислота

ТУ-6-09-07-501-77

 

3-ГИДРОКСИ-4-(2-ГИДРОКСИ-4-СУЛЬФО-1 -

НАФТИЛАЗО)-2-НАФТОЙНАЯ КИСЛОТА

 

C21H14N2O7S                                            М. м. 438,4

 

Черный с фиолетовым оттенком кристаллический порошок. Практически нерастворим в воде, мало растворим в 95% спирте, растворим в 50% спирте и 50% ацетоне, легко растворим в растворах едких щелочей.

При рН > 12,0 имеет голубую окраску, а его комплексы с ионом кальция в тех же условиях - красновато - сиреневую. Переход окраски при прямом титровании от красновато - сиреневой к голубой.

Индикаторная смесь. 0,25 г индикатора и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

Раствор индикатора. 0,025 г индикатора растворяют в 100 мл 50%

спирта или ацетона. Срок годности раствора 2 мес.

 

Кальцион

ТУ 6-09-05-161-83

 

ПЕНТАНАТРИЕВОЙ СОЛИ

 

1,1',1",8"-ТЕТРАОКСИ-(8,2',8',2"-БИС-АЗОТРИНАФТАЛИН)

3,6,3',6',3",6"-ГЕКСАСУЛЬФОКИСЛОТЫ МОНОГИДРАТ

 

C30H15N4Na5O22S6 х H2O                                М. м. 1108,8

 

Черный с фиолетовым оттенком порошок. Растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне, бензоле, 95% спирте. В интервале рН 11,0-13,0 имеет синюю окраску, а его комплексы с ионом кальция в тех же условиях розового цвета.

Переход окраски раствора при прямом титровании от розовой к синей.

Раствор индикатора. 0,1% раствор.

Срок годности раствора 1 мес.

 

Квасцы железоаммониевые

ГОСТ 4205-77

 

FeNH4(SO4)2 х 12Н2О                                    М. м. 482,2

 

Бледно - лиловые прозрачные кристаллы, на воздухе выветриваются. Легко растворимы в воде, практически нерастворимы в 95% спирте. Водный раствор имеет кислую реакцию и с растворами роданидов дает темно - красное окрашивание.

Раствор индикатора. 30 г квасцов железоаммониевых растворяют в 100 мл воды, к раствору прибавляют разведенной азотной кислоты до перехода коричневой окраски в желтовато - зеленую.

 

Кислотный хром черный специальный

Эриохром черный Т

ТУ 6-09-1760-72

 

НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 1-[(1-ГИДРОКСИ-2-НАФТИЛ)АЗО] -

6-НИТРО-2-НАФТОЛ-4-СУЛЬФОКИСЛОТЫ

 

C20H12N3NaO7S                                          М. м. 461,4

 

Порошок черного или коричневого цвета. Растворим в 95% спирте, мало растворим в воде. Токсичен.

В интервале рН 9,5-10,0 имеет синюю окраску, а его комплексы с ионами кальция, магния и цинка в тех же условиях красно - фиолетового цвета.

Переход окраски при прямом титровании от красно - фиолетовой к синей.

Индикаторная смесь. 0,25 г индикатора и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

Раствор индикатора. 0,2% раствор в 95% спирте.

 

Конго красный

ТУ 6-09-07-634-76

 

ДИНАТРИЕВАЯ СОЛЬ ДИФЕНИЛ -

4,4'-БИС-2-АЗО-1-НАФТИЛАМИН СУЛЬФОКИСЛОТЫ

 

C32H22N6Na2O6S2                                        M. м. 696,7

 

Кристаллический порошок от красного до красно - коричневого цвета. Мало растворим в воде, растворах щелочей и 95% спирте, легко растворим в горячей воде, практически нерастворим в органических растворителях.

Переход окраски раствора от сине - фиолетовой к красной в интервале рН 3,0-5,2.

Раствор индикатора. 0,1 г индикатора растворяют в 20 мл 95% спирта и доводят объем раствора водой до 100 мл.

 

Крахмал растворимый

 

ГОСТ 10163-76

 

(C6H10O5)n                                         М. м. (162,14)n

 

Порошок белого или слегка кремоватого цвета. Практически нерастворим в 95% спирте, растворим в кипящей воде с образованием прозрачного или слегка опалесцирующего раствора, не застывающего при охлаждении.

Раствор индикатора. 1 г крахмала растворимого смешивают с 5 мл воды до получения однородной кашицы и смесь медленно вливают при постоянном размешивании в 100 мл кипящей воды. Кипятят в течение 2 мин до получения слегка опалесцирующей жидкости.

Срок годности раствора 3 сут.

 

Примечание. При приготовлении раствора индикатора из картофельного крахмала клейстер, полученный указанным выше образом, дополнительно нагревают в автоклаве при 120 град. С в течение 1 ч.

 

Раствор крахмала с калия йодидом. Растворяют 0,5 г калия йодида в 100 мл свежеприготовленного раствора крахмала. Срок годности раствора 1 сут.

Йодкрахмальная бумага. Обеззоленные бумажные фильтры пропитывают раствором крахмала с калия йодидом и сушат в темном помещении на воздухе, не содержащем паров кислот. Бумагу разрезают на полоски длиной около 50 мм и шириной около 6 мм. Полоска йодкрахмальной бумаги не должна тотчас синеть при смачивании ее 1 каплей раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л).

Йодкрахмальную бумагу хранят в банках оранжевого стекла с притертой пробкой в защищенном от света месте.

 

Крезоловый красный

ТУ 6-09-5207-85

 

О-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИН

 

C21H18O5S                                             М. м. 382,44

 

Порошок темно - красного или коричнево - красного цвета с зеленым блеском. Умеренно растворим в воде, легко растворим в 95% спирте, растворах едких щелочей и углекислых солей щелочных металлов.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 0,2-1,8 и от желтой к пурпурно - красной в интервале рН 7,2-8,8.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 13,1 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта и доводят объем раствора водой до 100 мл.

 

Крезоловый красный водорастворимый

ТУ 6-09-796-76

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ О-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C21 H21 NO 5S                                         М. м. 399,46

 

Порошок красно - коричневого цвета. Растворим в воде.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 0,2-1,8 и от желтой к пурпурно - красной в интервале рН 7,2-8,8.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

 

Крезоловый   пурпуровый

ТУ 6-09-1585-77

 

М-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИН

 

C21H18O5S                                             М. м. 382,43

 

Кристаллический порошок от красно - коричневого до зеленого цвета. Мало растворим в воде, растворим в 95% спирте, уксусной кислоте, растворах едких щелочей, аммиака и углекислых солей щелочных металлов.

Переход окраски раствора от розово - красной к желтой в интервале рН 1,2-2,8 и от желтой к фиолетовой в интервале рН 7,4-9,0.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта и доводят объем раствора водой до 100 мл.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 13,1 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

 

Крезоловый пурпуровый водорастворимый

ТУ 6-09-07-25-76

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ М-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C21H21NO5S                                            М. м. 399,46

 

Мелкокристаллический порошок красно - коричневого или коричневого цвета.

Переход окраски раствора от розово - красной к желтой в интервале рН 1,2-2,8, от желтой к фиолетовой в интервале рН 7,4-9,0.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

 

Кристаллический фиолетовый

ТУ 6-09-4119-75

 

N,N,N',N'N",N"-ГЕКСАМЕТИЛ-П-РО3АНИЛИНА ХЛОРИД

 

C25H30ClN3                                             М. м. 408,0

 

Темно - зеленый с металлическим блеском кристаллический порошок. Легко растворим в воде и 95% спирте, растворим в хлороформе, ледяной уксусной кислоте.

Переход окраски при неводном титровании от фиолетовой (щелочная) через сине - зеленую (нейтральная) к зеленовато - желтой (кислая).

Раствор индикатора. 0,1% раствор в ледяной уксусной кислоте.

 

 

Ксиленоловый оранжевый

ТУ 6-09-1509-78

 

ТЕТРАНАТРИЕВАЯ СОЛЬ 3,3'-БИС-[N,NБ<=-ДИ-(КАРБОКСИМЕТИЛ) -

АМИНОМЕТИЛ]-О-КРЕЗОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C31H28N2Na4O13S                                        М. м. 760,6

 

Красно - коричневый блестящий кристаллический порошок. Легко растворим в воде, практически нерастворим в 95% спирте и эфире.

В интервале рН 5,0-6,0 ксиленоловый оранжевый окрашен в лимонно - желтый цвет, а его комплекс с ионом висмута в тех же условиях красного цвета. В щелочных растворах индикатор имеет фиолетово - красную окраску.

Переход окраски при прямом комплексонометрическом титровании от красной в лимонно - желтую.

Раствор индикатора. 0,1% раствор.

Срок годности раствора 14 сут.

Индикаторная смесь. 0,25 г индикатора и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

 

Лакмоид

Резорциновый синий

ТУ 6-09-4313-76

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ 7-ГИДРОКСИ-3Н-ФЕНОКСАЗИН-3-ОНА

 

C12H9NO3                                              М. м. 215,21

 

Порошок черного цвета. Растворим в воде, 95% спирте, ацетоне, ледяной уксусной кислоте.

Переход окраски раствора от красной к синей в интервале рН 4,4-6,2.

Раствор индикатора. 0,2% раствор в 95% спирте. Растворение проводят при нагревании на водяной бане.

 

Магнезон ХС

ТУ 6-09-05-283-79

 

НАТРИЕВОЙ СОЛИ 2-ГИДРОКСИ-3-[(2-ГИДРОКСИ-1 -

НАФТИЛ) АЗО]-5-ХЛОРБЕНЗОЛСУЛЬФОКИСЛОТЫ МОНОГИДРАТ

 

C16H10ClN2NaO5S х H20                                  М. м. 418,8

 

Порошок красно - коричневого цвета. Мало растворим в воде, 95% спирте и ацетоне, практически нерастворим в хлороформе и эфире. В интервале рН 9,8-11,2 имеет сине - фиолетовую окраску, а его комплекс с ионом магния в тех же условиях ярко - красного цвета.

Переход окраски при прямом титровании иона магния от ярко - красной к сине - фиолетовой.

Раствор индикатора. 0,01% раствор в ацетоне.

Срок годности раствора 2 мес.

 

Малахитовый зеленый

ТУ 6-09-1557-77

 

ТЕТРАМЕТИЛДИАМИНОТРИФЕНИЛКАРБИНОЛА

АНГИДРООКСАЛАТ

 

C52H54N4O12                                            М. м. 927,0

 

ТЕТРАМЕТИЛДИАМИНОТРИФЕНИЛКАРБИНОЛА ГИДРОХЛОРИД

 

C23H25CLN2                                            М. м. 364,92

 

Блестящие темно - зеленые кристаллы или зеленый кристаллический порошок. Растворим в воде и 95% спирте.

Переход окраски раствора от желтой к зеленовато - голубой в интервале рН 0,1-2,0 и от зеленовато - голубой к бесцветной в интервале рН 11,4-13,0.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 20 мл 95% спирта и доводят объем раствора водой до 100 мл.

2. 0,5% раствор в ледяной уксусной кислоте.

 

Метиленовый голубой (синий)

ТУ 6-09-29-76

 

N,N,N',N'-ТЕТРАМЕТИЛТИОИНА ХЛОРИДА ТРИГИДРАТ

 

Cl6H18ClN3S х 3Н2О                                    М. м. 373,89

 

Темно - зеленые с блеском кристаллы или мелкий порошок. Умеренно растворим в воде, мало растворим в 95% спирте.

Применяется для приготовления смешанных индикаторов.

Растворы индикатора. 1. 0,15% раствор.

2. 0,1% раствор в 95% спирте.

 

Метиловый красный

ТУ 6-09-5169-84

 

4'-ДИМЕТИЛАМИНОАЗОБЕНЗОЛ-2-КАРБОНОВАЯ КИСЛОТА

 

C15H15N3O2                                            М. м. 269,30

 

Блестящие фиолетовые кристаллы или порошок красно - бурого или фиолетового цвета. Мало растворим в воде, умеренно растворим в 95% спирте; легко растворим в 95% спирте при нагревании, растворим в растворах едких щелочей и углекислых солей щелочных металлов.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 4,2-6,2.

Растворы индикатора. 1. 0,1% раствор в 95% спирте. Растворение проводят при нагревании на водяной бане.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 18,6 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

 

Метиловый оранжевый

 

Оранжевый III

ТУ 6-09-5171-84

 

НАТРИЕВАЯ СОЛЬ

П-ДИМЕТИЛАМИНОАЗОБЕНЗОЛСУЛЬФОКИСЛОТЫ

 

C14H14N3NaO3S                                         М. м. 327,33

 

Кристаллический порошок оранжевого цвета. Умеренно растворим в воде, легко растворим в горячей воде, практически нерастворим в органических растворителях.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 3,0-4,4.

Растворы индикатора. 1. 0,1% раствор. Растворение проводят в горячей воде.

2. К 0,025 г индикатора прибавляют 100 мл ацетона и время от времени встряхивают, через 1 ч фильтруют.

 

Метиловый фиолетовый

ТУ 6-09-945-86

 

СМЕСЬ ГИДРОХЛОРИДОВ ТЕТРА-, ПЕНТА

И ГЕКСАМЕТИЛ-П-РОЗАЛИНИНА

 

C24H28ClN3                                            М. м. 393,94

 

Кристаллический порошок с неоднородной (по размеру) формой частиц зеленого цвета с металлическим блеском. Растворим в воде, кислотах и растворах щелочей.

Переход окраски раствора от желтой к зеленой в интервале рН 0,1-1,5 и от зеленой к фиолетовой в интервале рН 1,5-3,2.

Растворы индикатора. 1. 0,1% раствор.

2. 0,1% раствор в ледяной уксусной кислоте. Раствор применяют

свежеприготовленным.

 

Мурексид

 

Аммоний пурпуровокислый

ТУ 6-09-1657-72

 

АММОНИЙНОЙ СОЛИ 5,5'-НИТРИЛОДИБАРБИТУРОВОЙ

КИСЛОТЫ МОНОГИДРАТ

 

C8H8N6O6 х H2O                                        М. м. 302,20

 

Мелкокристаллический порошок пурпурно - красного или красно - коричневого цвета с характерным зеленоватым металлическим блеском. Мало растворим в воде. При рН > 11,0 раствор мурексида имеет фиолетовую окраску, а его комплекс с ионом кальция в тех же условиях оранжевого цвета.

Переход окраски при прямом титровании ионов кальция от оранжевой к фиолетовой.

Индикаторная смесь. 0,25 г индикатора и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

 

альфа - Нафтолфталеин

ТУ 6-09-4650-78

 

3,3'-БИС(4-ГИДРОКСИ-1-НАФТИЛ)ФТАЛИД

 

C28H18O4                                               М. м. 418,4

 

Мелкокристаллический порошок от зеленовато - серого до коричневого цвета. Практически нерастворим в воде, легко растворим в 95% спирте, эфире и ледяной уксусной кислоте, мало растворим в бензоле.

Переход окраски раствора от желтовато - розовой к зеленовато - синей в интервале рН 7,4-8,6.

Раствор индикатора. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта и доводят объем раствора водой до 100 мл.

 

Нейтральный красный

Толуиленовый красный

ТУ 6-09-4120-75

 

3-АМИНО-7-ДИМЕТИЛАМИНО-2-МЕТИЛФЕНАЗИНА

ГИДРОХЛОРИД

 

C15H16N4 х HCl                                        М. м. 288,78

 

Кристаллы или порошок черного или черно - зеленого цвета. Легко растворим в воде, растворим в 95% спирте.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 6,8-8,0.

Растворы индикатора. 1. 0,1% или 0,5% (для нитритометрического титрования) раствор.

2. 0,1% раствор в ледяной уксусной кислоте.

 

Пирокатехиновый фиолетовый

Пирокатехинсульфофталеин

ТУ 6-09-07-1087-78

 

3,3',4'-ТРИГИДРОКСИФУКСОН-2"-СУЛЬФОКИСЛОТА

 

C19H14O7S                                             М. м. 386,37

 

Порошок красно - коричневого или зелено - коричневого цвета. Легко растворим в воде и 95% спирте, растворим в ледяной уксусной кислоте, практически нерастворим в эфире, ацетоне, бензоле.

В интервале рН 2,0-3,0 индикатор имеет желтую окраску, его комплексы с ионом висмута в тех же условиях синего цвета.

Переход окраски при прямом титровании иона висмута от синей к желтой.

В щелочной среде индикатор имеет красно - фиолетовую окраску, его комплексы с ионами магния и цинка в тех же условиях зеленовато - синего цвета.

Переход окраски при прямом титровании ионов магния и цинка от зеленовато - синей к красно - фиолетовой.

Раствор индикатора. 0,1% раствор.

Срок годности раствора 1 мес.

Индикаторная смесь. 0,25 г индикатора и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

 

Смешанный индикатор

 

ГОСТ 4919.1-77

 

Смесь метилового красного и метиленового синего в соотношении 2:1.

Раствор индикатора. 100 мл 0,1% спиртового раствора метилового красного смешивают с 50 мл 0,1% спиртового раствора метиленового синего (голубого).

Переход окраски раствора от фиолетово - красной к зеленой при рН 5,4.

 

Сульфарсазен

Плюмбон

ТУ 6-09-4681-83

 

МОНОНАТРИЕВАЯ СОЛЬ (2-АРСОНО-4-НИТРОФЕНИЛ) -

1,4'-ДИАЗОАМИНОАЗОБЕНЗОЛ-4"-СУЛЬФОКИСЛОТЫ

 

C18H14AsN6NaO8S                                        М. м. 572,3

 

Кирпично - красный порошок. Растворим в воде, легко растворим в растворе тетрабората натрия, мало растворим в 95% спирте, практически нерастворим в ацетоне, хлороформе, бензоле.

В боратном буферном растворе (рН около 9,2) индикатор имеет желтую окраску; его комплексы с ионом свинца в тех же условиях розового цвета.

Раствор индикатора. 0,05% раствор в 2% растворе натрия тетрабората (Na2B4O7 х 10H2O).

Срок годности раствора 1 мес.

 

Тимоловый синий

Тимолсульфофталеин

ТУ 6-09-3501-78

 

2,2'-ДИМЕТИЛ-5,5'-ДИ -

ИЗОПРОПИЛФЕНОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА ГЕМИГИДРАТ

 

C27H30O5S х 1/2H2O                                     М. м. 475,6

 

Коричневые кристаллы с зеленоватым или фиолетовым блеском или кристаллический порошок коричневого или красновато - коричневого цвета. Умеренно растворим в воде, ацетоне, бензоле, хлороформе, растворим в метиловом и 95% этиловом спиртах и ледяной уксусной кислоте, легко растворим в растворах едких щелочей и углекислых солей щелочных металлов.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 1,2-2,8 и от желтой к синей в интервале рН 8,0-9,6.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 10,75 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта при нагревании на водяной бане и после охлаждения доводят объем раствора водой до 100 мл.

3. 0,3% раствор в метиловом спирте.

4. 1% раствор в диметилформамиде.

 

Тимоловый синий водорастворимый

ТУ 6-09-4922-80

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ

2,2'-ДИМЕТИЛ-5,5'-ДИ-ИЗОПРОПИЛФЕНОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C27H33NO5S                                             М. м. 483,6

 

Мелкокристаллический порошок красновато - коричневого цвета с металлическим блеском. Растворим в воде.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 1,2-2,8 и от желтой к синей в интервале рН 8,0-9,6.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

 

Тимолфталеин

ТУ 6-09-1887-77

 

2,2'-ДИМЕТИЛ-5,5'-ДИ-ИЗОПРОПИЛФЕНОЛФТАЛЕИН

 

С28Н30О4                                               М. м. 430,5

 

Мелкокристаллический белый порошок. Практически нерастворим в воде, растворим в 95% спирте, ацетоне, хлороформе, растворах щелочей.

Переход окраски раствора от бесцветной к синей в интервале рН 9,4-10,6.

Раствор индикатора. 0,1% раствор в 95% спирте.

Бумага тимолфталеиновая. Обеззоленные бумажные фильтры пропитывают раствором индикатора и сушат на воздухе в темном месте, не содержащем паров кислот и аммиака. Бумагу разрезают на полоски длиной около 50 мм и шириной около 6 мм.

Хранят в банках с притертой пробкой в защищенном от света месте.

 

Тропеолин 00

 

Оранжевый IV

ТУ 6-09-4121-75

 

КАЛИЕВАЯ (ИЛИ НАТРИЕВАЯ) СОЛЬ

4-[(4-АНИЛИНОФЕНИЛ)АЗО] БЕНЗОЛСУЛЬФОКИСЛОТЫ

 

C18H14KN3O3S                                          М. м. 391,47

 

C18H14N3NaO3S                                         М. м. 375,38

 

Оранжево - желтый порошок или золотисто - желтые игольчатые кристаллы. Растворим в горячей воде и 95% спирте.

Переход окраски раствора от красной к желтой в интервале рН 1,4-3,2.

Растворы индикатора. 1. 0,1% раствор. Растворение проводят при нагревании на водяной бане.

2. К 0,2 г индикатора прибавляют 100 мл метилового спирта и время от времени встряхивают, через 1 ч фильтруют.

 

Универсальный индикатор

ТУ 6-09-3412-83

 

Состав: 0,006 г бромкрезолового пурпурового, 0,01 г бромкрезолового зеленого, 0,02 г метилового оранжевого, 0,04 г тропеолина 00, 0,04 г фенолфталеина, 0,05 г тимолового синего, 0,1 г бромтимолового синего.

Растворим в 95% спирте. Предназначен для колориметрического определения концентрации водородных ионов.

Индикатор изменяет окраску в интервале рН 1,0-10,0.

 

     рН         Окраска               рН           Окраска

 

    1,0   красно - фиолетовая         6,0      зеленовато - желтая

    2,0   розово - оранжевая          7,0      желто - зеленая

    3,0   оранжевая                   8,0      зеленая

    4,0   желто - оранжевая           9,0      сине - зеленая

    5,0   желтая                     10,0      серовато - синяя

 

Раствор индикатора. Содержимое пробирки растворяют в 100 мл 80% спирта при нагревании на водяной бане.

 

1,10-Фенантролина сульфат

ТУ 6-09-05-90-86

 

C12H8N2 х H2SO4                                       М. м. 278,28

 

Порошок белого цвета с желтоватым оттенком. Растворим в воде, практически нерастворим в 95% спирте.

В качестве окислительно - восстановительного индикатора используется комплекс о - фенантролина сульфата с железом (2+) Fe(C12H8N2)3SO4 - "Ферроин".

Раствор индикатора. 0,7 г железа закисного сульфата (FeSO4 х 7H2O) растворяют в 100 мл воды, прибавляют 2,2 т о-фенантролина сульфата и перемешивают до растворения.

Раствор готовят перед употреблением. Окраска окисленной формы бледно - голубая, восстановительной формы - красная.

 

Феноловый красный

ТУ 6-09-07-1451-85

 

Фенолсульфофталеин

 

C19H14O5S                                             М. м. 354,38

 

Мелкодисперсный порошок темно - красного цвета. Умеренно растворим в воде, растворим в 95% спирте и ацетоне, легко растворим в растворах едких щелочей и углекислых солей щелочных металлов, практически нерастворим в хлороформе и эфире.

Переход окраски раствора от желтой к красной в интервале рН 6,8-8,4.

Растворы индикатора. 1. 0,1 г индикатора растворяют в 14,2 мл раствора натра едкого (0,02 моль/л) и доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

2. 0,1 г индикатора растворяют в 50 мл 95% спирта при нагревании на водяной бане и после охлаждения доводят объем раствора водой до 100 мл.

 

Феноловый красный водорастворимый

ТУ 6-09-3070-84

 

АММОНИЙНАЯ СОЛЬ ФЕНОЛСУЛЬФОФТАЛЕИНА

 

C19H17NO5S                                            М. м. 371,41

 

Порошок красно - коричневого или черного цвета. Растворим в воде.

Переход окраски раствора от желтой к красной в интервале рН 6,8-8,4.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

 

Фенолфталеин

ГОСТ 5850-72

 

3,3'-БИС(4-ГИДРОКСИФЕНИЛ)ФТАЛИД

 

C20H14O4                                              М. м. 318,33

 

Белый или белый со слегка желтоватым оттенком мелкокристаллический порошок. Растворим в 95% спирте, практически нерастворим в воде.

Переход окраски раствора от бесцветной к ярко - розовой в интервале рН 8,2-10,0.

Раствор индикатора. 1% раствор в 95% спирте.

 

Хромовый темно - синий

 

Кислотный хромовый темно - синий

ТУ 6-09-3870-84

 

ДИНАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-(2-ГИДРОКСИ-5-ХЛОРФЕНИЛ)АЗО -

1,8-ДИГИДРОКСИНАФТАЛИН-3,6-ДИСУЛЬФОКИСЛОТЫ

 

C16H9ClN2Na2O9S2                                       М. м. 518,8

 

Порошок темно - коричневого или черного цвета. Легко растворим в воде. 0,05% раствор - вишнево - красного цвета. В интервале рН 9,5-10,0 имеет сине - фиолетовую окраску, его комплексы с ионами кальция, магния и цинка в тех же условиях красного цвета.

Переход окраски при прямом титровании от красной к сине - фиолетовой.

Индикаторная смесь. 0,25 г индикатора и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

Раствор индикатора. 0,5 г индикатора растворяют в 10 мл аммиачного буферного раствора (рН от 9,5 до 10,0) и доводят объем раствора 95% спиртом до 100 мл.

Срок годности раствора 1 мес.

 

Эозин Н

 

Эозин натрий водорастворимый

ТУ 6-09-183-75

 

СМЕСЬ ДИНАТРИЕВЫХ СОЛЕЙ

ТЕТРАБРОМФЛЮОРЕСЦЕИНА И ДИБРОМФЛЮОРЕСЦЕИНА

 

C20H6Br4Na2O5                                          М. м. 691,9

 

C20H8Br2Na2O5                                          М. м. 534,1

 

Порошок красного или красно - коричневого цвета. Легко растворим в воде.

Растворы индикатора. 1. 0,1% раствор.

2. 0,5% раствор.

 

Индикаторная бумага

 

Индикаторная бумага предназначена для определения рН водных растворов и суспензий с точностью показаний 1,0-2,0 единицы рН.

Применение индикаторной бумаги "РИФАН" с интервалом рН 0,3-0,4 повышает точность определения до 0,1 единицы рН. Индикаторную бумагу изготавливают из бумаги для хроматографии и электрофореза марки "С" 85 г/кв. м путем пропитывания раствором индикатора.

Индикаторную бумагу хранят в сухом, свободном от паров аммиака и кислот помещении, в защищенном от света месте.

Определение значений рН при помощи индикаторной бумаги проводят при комнатной температуре в растворах, не содержащих сильных окисляющих веществ, органических растворителей и большого количества солей.

При определении рН полоску индикаторной бумаги погружают на 1-2 с в испытуемую жидкость так, чтобы она была равномерно смочена. Быстро вынув полоску бумаги, немедленно сравнивают ее окраску с цветовой стандартной шкалой (универсальная бумага). При применении бумаги "РИФАН" окраску средней полоски на индикаторной бумаге (без цифр) сравнивают с цветовой шкалой, которая помещена на той же бумаге и имеет цифровые обозначения рН. Тождественность окраски полоски на бумаге "РИФАН" с цветовой шкалой указывает величину рН испытуемого раствора.

 

БУМАГА УНИВЕРСАЛЬНАЯ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

В ИНТЕРВАЛАХ рН 1-10 И 7-14 ТУ 6-09-1181-76

 

Бумага для определения рН в интервале 1-10 должна быть равномерно окрашена в желтый цвет, а для определения рН в интервале 7-14 - в серо - зеленый цвет.

Интервалы рН перехода окраски бумаги:

рН 1-10-1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0; 9,0; 10,0;

рН 7-14-7,0; 8,0; 9,0; 10,0; 11,0; 12,0; 13,0; 14,0

Срок годности 5 лет.

 

БУМАГА "РИФАН"

ТУ 6-09-3410-83

 

    Интервал рН           Величины рН стандартной сравнительной

    перехода окраски      шкалы, определяемые в интервалах рН

 

    0,3-2,2              0,3;  1,0;  1,4;  1,8;  2,2

    1,8-3,6              1,8;  2,1;  2,4;  2,8;  3,2;  3,6

    4,0-5,4              4,0;  4,4;  4,7;  5,0;  5,4

    5,8-7,4              5,8;  6,2;  6,6;  7,0;  7,4

    7,4-8,8              7,4;  7,8;  8,1;  8,4;  8,8

    7,8-9,0              7,8;  8,1;  8,4;  8,7;  9,0

    8,7-10,0             8,7;  9,0;  9,3;  9,6; 10,0

    10,0-11,6            10,0; 10,4; 10,8; 11,2; 11,6

    1,0-11,0             1,0;  3,0;  5,0;  7,0;  9,0; 11,0

    11,5-13,2            11,5; 12,0; 12,4; 12,8; 13,2

    12,4-13,6            12,4; 12,7; 13,0; 13,6

 

Срок годности 2 года.

 

БУМАГА КОНГО

ТУ 6-09-3104-79

 

Бумага должна быть равномерно окрашена в красный цвет.

Переход окраски бумаги от сине - фиолетовой к красной в интервале рН 3,0-5,2. Срок годности 5 лет.

 

БУМАГА КУРКУМОВАЯ

ТУ 6-09-3411-79

 

Бумага должна быть равномерно окрашена в ярко - желтый цвет.

Переход окраски бумаги от желтой к буро - красной в интервале рН 7,4-9,2 и от буро - красной к оранжево - желтой в интервале рН 10,2-11,8.

Срок годности 2 года.

 

БУМАГА ЛАКМОИДНАЯ СИНЯЯ

ТУ 6-09-3406-78

 

Бумага должна быть равномерно окрашена в серо - голубой цвет.

Переход окраски бумаги от бледно - фиолетовой к серо - голубой в интервале рН 4,0-6,4.

Срок годности 2 года.

 

БУМАГА ЛАКМУСОВАЯ КРАСНАЯ

ТУ 6-09-3403-78

 

Бумага должна быть равномерно окрашена в бледно - розовый цвет. Окраска бумаги при значении рН 8,0 должна быть бледно - синей.

Срок годности 2 года.

 

БУМАГА ЛАКМУСОВАЯ НЕЙТРАЛЬНАЯ

ТУ 6-09-3405-78

 

Бумага должна быть равномерно окрашена в бледно - фиолетовый цвет.

Переход окраски бумаги от бледно - розовой к бледно - синей в интервале рН 5,0-8,0.

Срок годности 2 года.

 

БУМАГА ЛАКМУСОВАЯ СИНЯЯ

ТУ 6-09-3404-78

 

Бумага должна быть равномерно окрашена в бледно - синий цвет.

Окраска бумаги при значении рН 5,0 должна быть бледно - розовой.

Срок годности 2 года.

 

БУМАГА ФЕНОЛФТАЛЕИНОВАЯ

ТУ 6-09-3407-78

 

Бумага должна быть белого цвета.

Переход окраски бумаги от белой к ярко - розовой в интервале рН 8,2-10,0.

Срок годности 2 года.

 

БУМАГА ЙОДКРАХМАЛЬНАЯ

ТУ 6-09-3409-78

 

Бумага предназначена для качественного определения активных окислителей. Пропитана растворами калия йодида и крахмала.

Бумага должна быть белого цвета, не темнеть при нанесении 1 капли раствора хлористоводородной кислоты (1 моль/л). Чувствительность к нитрит - иону не более 0,15 мл раствора натрия нитрита (0,1 моль/л) в растворе, содержащем 250 мл воды и 10 мл концентрированной хлористоводородной кислоты.

Срок годности 2 года.

Интервалы рН и изменения цвета индикаторов приведены в табл. 3.

 

Таблица  3

 

Интервалы рН и изменения цвета индикаторов

 

┌─────────────────────────┬─────────────────┬────────────────────┐

        Название            Интервал рН     Изменение цвета  

                           перехода цвета │                   

├─────────────────────────┼─────────────────┼────────────────────┤

│Метиловый фиолетовый         0,1 - 1,5    │Желтый - зеленый   

│Малахитовый зеленый          0,1 - 2,0    │Желтый - зеленовато-│

                                          │голубой            

│Крезоловый красный           0,2 - 1,8    │Красный - желтый   

│Крезоловый пурпуровый        1,2 - 2,8    │Розово - красный - 

                                          │желтый             

│Тимоловый синий              1,2 - 2,8    │Красный - желтый   

│Тропеолин 00                 1,4 - 3,2    │Красный - желтый   

│Метиловый фиолетовый         1,5 - 3,2    │Зеленый - фиолетовый│

│Диметиловый желтый           3,0 - 4,0    │Красный - желтый   

│Метиловый оранжевый          3,0 - 4,4    │Красный - желтый   

│Бромфеноловый синий          3,0 - 4,6    │Желтый - синий     

│Конго красный                3,0 - 5,2    │Сине - фиолетовый - │

                                          │красный            

│Бромкрезоловый зеленый       3,8 - 5,4    │Желтый - синий     

│(синий)                                                      

│Ализариновый красный С       4,6 - 6,0    │Желтый - пурпурно - │

                                          │красный            

│Метиловый красный            4,2 - 6,2    │Красный - желтый   

│Лакмоид                      4,4 - 6,2    │Красный - синий    

│Бромкрезоловый пурпуровый│    5,2 - 6,8    │Желтый - пурпуровый │

│Бромтимоловый синий          6,0 - 7,6    │Желтый - синий     

│Нейтральный красный          6,8 - 8,0    │Красный - желтый   

│Феноловый красный            6,8 - 8,4    │Желтый - красный   

│Крезоловый красный           7,2 - 8,8    │Желтый - пурпурно - │

                                          │красный            

│альфа - Нафтолфталеин        7,4 - 8,6    │Желтовато - розовый-│

                                          │зеленовато - синий 

│Крезоловый пурпуровый        7,4 - 9,0    │Желтый - фиолетовый │

│Тимоловый синий              8,0 - 9,6    │Желтый - синий     

│Фенолфталеин                 8,2 -10,0    │Бесцветный - ярко - │

                                          │розовый            

│Тимолфталеин                 9,4 -10,6    │Бесцветный - синий 

│Ализариновый желтый Р       10,0 -12,0    │Светло - желтый -  

                                          │красно - оранжевый 

│Малахитовый зеленый         11,4 -13,0    │Зеленовато-голубой -│

                                          │бесцветный         

│Индигокармин                11,6 -14,0    │Синий - желтый     

└─────────────────────────┴─────────────────┴────────────────────┘

 

РЕАКТИВЫ

 

Агар пищевой. Пористые пластины толщиной не более 20 мм или пленки толщиной не более 0,5 мм белого или светло - желтого цвета; допускается слегка сероватый оттенок. ГОСТ 16280-70.

Ализариновый красный. C14 H9 NaO8 S. M. м. 360,27. Мелкокристаллический порошок желто - оранжевого цвета. ТУ 6-09-2105-77.

Алюминия окись для хроматографии (I и II степени активности). Al2O3. М. м. 101,96. Белый кристаллический порошок, поглощающий воду. ТУ 6-09-3916-75.

Амиловый эфир уксусной кислоты. Амилацетат. CH3COOC5H11. М. м. 130,19. Бесцветная прозрачная жидкость с фруктовым запахом. ТУ 6-09-1239-76.

Аммиак водный. Аммиака раствор концентрированный. NH4OH. М. м. 35,05. Бесцветная прозрачная жидкость с характерным острым запахом. Обращаться с осторожностью. ГОСТ 3760-79. Содержание аммиака от 25% до 28%.

Аммиака раствор. 440 мл концентрированного раствора аммиака разбавляют водой до 1 л. Содержание аммиака от 9,5% до 10,5%.

Аммиака раствор 5%. 500 мл раствора аммиака разбавляют водой до 1 л.

Аммиака водно - спиртовый раствор. 1 мл концентрированного раствора аммиака смешивают с 9 мл 95% спирта.

Аммиачный буферный раствор. 54 г аммония хлорида растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, прибавляют 350 мл концентрированного раствора аммиака и доводят объем раствора водой до метки. рН полученного раствора от 9,5 до 10,0.

Аммоний азотнокислый. Аммония нитрат. NH4NO3. М. м. 80,04. Белый кристаллический порошок. ГОСТ 22867-77, х.ч., ч.д.а.

Аммоний ванадиевокислый мета. Аммония ванадат мета. NH4VO3. М. м. 116,98. Белый или светло - желтый кристаллический порошок. ГОСТ 9336-75.

Аммония ванадата раствор. 0,05 г аммония ванадата растворяют в 10 мл концентрированной серной кислоты.

Аммоний лимоннокислый двузамещенный. Аммония цитрат двузамещенный. C6 H14 N2 O7. М. м. 226,19. Белый кристаллический порошок. ГОСТ 3653-78.

Аммоний молибденовокислый. Аммония молибдат. (NH4)6Mo7O24 х 4Н2О. М. м. 1235,9. Бесцветные или слегка окрашенные в зеленоватый или желтоватый цвет кристаллы. ГОСТ 3765-78.

Аммония молибдата раствор в концентрированной серной кислоте (реактив Фреде). 0,1 г аммония молибдата растворяют в 10 мл концентрированной серной кислоты.

Хранят в банках оранжевого стекла. Срок годности 6 мес.

Аммония молибдата раствор. 10 г аммония молибдата растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Хранят в банках оранжевого стекла. Срок годности 6 мес.

Аммония молибдата раствор в азотной кислоте. Растворяют 6,5 г мелкораздробленной молибденовой кислоты в смеси 14 мл воды и 14,5 мл концентрированного раствора аммиака. Раствор охлаждают и постепенно при перемешивании прибавляют к смеси 32 мл охлажденного раствора концентрированной азотной кислоты и 40 мл воды и оставляют на 48 ч, затем раствор фильтруют через плотный фильтр. Если при хранении раствора выделится осадок, его отделяют декантацией.

Аммоний надсернокислый. Аммония персульфат. (NH4)2S2O8. М. м. 228,20. Белый кристаллический порошок. ГОСТ 20478-75, х.ч., ч.д.а.

Аммония персульфата раствор. 20 г аммония персульфата растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Аммоний роданистый. Аммония роданид. NH4SCN. М. м. 76,12. Бесцветные кристаллы. ТУ 6-09-4708-79, х.ч.

Аммония роданида раствор. 5 г аммония роданида растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Аммоний сернокислый. Аммония сульфат. (NH4)2SO4. М. м. 132,14. Бесцветный кристаллический порошок. ГОСТ 3769-78.

Аммоний сульфаминовокислый. Аммония сульфаминат. NH4OSO2NH2. М. м. 114,12. Белые кристаллы или кристаллический порошок без запаха, гигроскопичен. ТУ 6-09-15-364-78.

Аммоний тетратиоцианатодиамин хромат (III), 1-водный. Рейнекат аммония. NH4[Cr(NH3)2(SCN)4] х H2O. М. м. 354,44. Красные кристаллы. В водном растворе разлагается с выделением свободного цианистого водорода (осторожно!). ТУ 6-09-08- 944-83.

Аммоний углекислый. Аммония карбонат. (NH4)2CO3. М. м. 96,09. Бесцветные мелкие кристаллы, в массе белого цвета. ГОСТ 3770-75.

Аммония карбоната раствор. 10 г аммония карбоната растворяют в 30 мл воды, прибавляют 10 мл раствора аммиака и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Аммоний уксуснокислый. Аммония ацетат. CH3COONH4. М. м. 77,08. Бесцветные гигроскопичные кристаллы. ГОСТ 3117-78.

Аммония ацетата насыщенный раствор. Растворяют достаточное количество аммония уксуснокислого в воде до получения раствора, содержащего не менее 61,5% аммония уксуснокислого.

Аммоний хлористый. Аммония хлорид. NH4Cl. М. м. 53,49. Белый кристаллический порошок. ГОСТ 3773-72.

Аммония хлорида раствор. 10 г аммония хлорида растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Аммоний церий (IV) сульфат. Церия аммония сульфат. Ce(SO4)2 х 2(NH4)2SO4 х 2H2O. M. м. 632,6. Оранжевые кристаллы. ТУ 6-09-04-177-75.

Аммоний щавелевокислый. Аммония оксалат. (COONH4)2 х H2O. М. м. 142,11. Бесцветные кристаллы. ГОСТ 5712-78.

Аммония оксалата раствор. 4 г аммония оксалата растворяют при нагревании в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл, раствор фильтруют.

Ангидрид уксусный. (СН3СО)2О. М. м. 102,09. Бесцветная прозрачная жидкость с резким запахом.

При растворении реактива в воде образуется уксусная кислота, причем реакция сначала идет медленно, а затем ускоряется и проходит бурно (возможны выбросы). Обращаться с осторожностью. ГОСТ 5815-77, ч.д.а.

Ангидрида уксусного раствор в безводном пиридине. 12 мл ангидрида уксусного смешивают с 88 мл безводного пиридина.

Хранят в банках оранжевого стекла с притертыми пробками.

Ангидрид фталевый. С6Н4(СО)2О. М. м. 148,12. Кристаллический порошок или чешуйки белого цвета. ГОСТ 5869-77, ч.д.а.

Анилин. C6H5NH2. М. м. 93,13. Маслообразная прозрачная светло - желтая или светло - коричневая жидкость. Обращаться с осторожностью. ГОСТ 5819-78.

Ацетил хлористый. Ацетила хлорид. CH3COCl. М. м. 78,50. Бесцветная прозрачная жидкость с резким запахом. Обращаться с осторожностью. ГОСТ 5829-71.

Ацетилирующая смесь. Смешивают 1 часть уксусного ангидрида и 3 части перегнанного пиридина (фракция, кипящая при температуре от 114 до 115 град. С). Смесь должна быть бесцветной. Смесь применяют свежеприготовленной. Обращаться с осторожностью.

Ацетон. СН3СОСН3. М. м. 58,08. Бесцветная, прозрачная, легко воспламеняющаяся жидкость с характерным запахом. ГОСТ 2603-79, ч.д.а.

При необходимости используют ацетон особой чистоты. Ацетон ОП-2 осч 9-5 по ТУ 6-09-3513-82.

Ацетон безводный. Ацетон сушат над безводным сульфатом натрия в течение 12 ч.

Бария гидроокись 8-водная. Бария гидроксид. Бария гидроокись. Ва(ОН)2 х 8Н2О. М. м. 315,48. Белые или бесцветные кристаллы. Ядовит. ГОСТ 4107-78.

Бария гидроксида раствор. Бария гидроокиси раствор. Баритовая вода. 5 г бария гидроокиси взбалтывают со 100 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды. Раствор применяют свежеприготовленным. Ядовит.

Барий азотнокислый. Бария нитрат. Ba(NO3)2. М. м. 261,35. Бесцветные кристаллы. Ядовит. ГОСТ 3777-76.

Бария нитрата раствор. 5 г бария нитрата растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл. Раствор фильтруют. Ядовит.

Барий сернокислый. Бария сульфат. BaSO4. M. м. 233,40. Белый порошок. ГОСТ 3158-75.

Барий хлористый. Бария хлорид. BaCl2 х 2Н2О. М. м. 244,28. Бесцветные прозрачные кристаллы. Ядовит. ГОСТ 4108-72.

Бария хлорида раствор. 5 г бария хлорида растворяют в воде и разбавляют водой до 100 мл. Раствор фильтруют. Ядовит.

Бензальдегид. С6Н5СНО. М. м. 106,13. Бесцветная или слабо желтая, сильно преломляющая свет жидкость с запахом горького миндаля. ГОСТ 157-78.

Бензальдегида раствор насыщенный. 1 мл бензальдегида взбалтывают в склянке с 250 мл воды. Смесь оставляют до следующего дня, время от времени взбалтывая. Перед применением сливают прозрачную жидкость. Раствор применяют свежеприготовленным.

Бензидин. NH2C6H4 х C6H4NH2. М. м. 184,24. Белые или слегка желтоватые мелкоигольчатые кристаллы. Обращаться с осторожностью. ТУ 6-09-4221-76, ч.д.а.

Бензин. (Бензин авиационный). Прозрачная бесцветная жидкость. ГОСТ 1012-72.

Бензоил хлористый. Бензоила хлорид. C6H5COCl. М. м. 140,57. Бесцветная, слегка дымящая на воздухе жидкость с резким своеобразным запахом. Медленно разлагается водой и спиртом. Обращаться с осторожностью. ТУ 6-09-4114-75.

Бром. Br2. М. м. 159,82. Красно - бурая легколетучая жидкость с удушливым запахом. Обращаться с осторожностью. ГОСТ 4109-79.

Брома раствор спиртовой. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 90 мл 95% спирта, при перемешивании и охлаждении колбы снаружи льдом осторожно, постепенно прибавляют 10 мл отмеренного цилиндром брома.

Хранят в банке оранжевого стекла, закрытой притертой пробкой, в темном, прохладном месте.

Бромная вода. Насыщенный водный раствор брома. Приготавливают встряхиванием 3 мл брома со 100 мл воды.

Перед употреблением жидкость встряхивают и отстаивают. Используют прозрачный раствор.

Хранят в банке оранжевого стекла с притертой пробкой в защищенном от света месте.

Ванилин. С6Н3(ОН)(ОСН3)СНО. М. м. 152,15. Белые или слабо - желтоватые иглы с запахом ванили, темнеющие на воздухе. ГОСТ 16599-71.

Ванилина раствор в серной кислоте. 0,1 г ванилина растворяют в 10 мл концентрированной серной кислоты. Раствор применяют свежеприготовленным.

Ванилина раствор в хлористоводородной кислоте. 0,2 г ванилина растворяют в 10 мл концентрированной хлористоводородной кислоты.

Раствор применяют свежеприготовленным.

Висмут (III) азотнокислый 5-водный. Висмута нитрат. Bi(NO3)3 х 5Н2О. М. м. 485,1. Прозрачные бесцветные кристаллы в массе белого цвета. ГОСТ 4110-75.

Водорода перекись. Пергидроль. H2O2. М. м. 34,01. Бесцветная прозрачная жидкость без запаха или со слабым своеобразным запахом, слабокислой реакции, легко разлагающаяся с выделением кислорода. Содержание перекиси водорода в реактиве х.ч. - 30-35%, ч.д.а. - 29-32%, ч. - не менее 29%. ГОСТ 10929-76.

Раствор перекиси водорода. 10 г пергидроля растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Гидразин сернокислый. Гидразина сульфат. NH2-NH2 х H2SO4. М. м. 130,12. Белый кристаллический порошок. Ядовит. ГОСТ 5841-74.

Гидразин солянокислый. Гидразина гидрохлорид. NH2 - NH2 х 2HCl. М. м. 104,96. Белый кристаллический порошок. Ядовит. ГОСТ 22159-76.

Гидроксиламина гидрохлорид. NH2OH х HCl. М. м. 69,49. Бесцветные гигроскопичные кристаллы. ГОСТ 5456-79.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор (1 моль/л). 6,95 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 50 мл воды в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор (0,5 моль/л). 3,48 г гидроксиламина гидрохлорида отвешивают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 90 мл 60% спирта, прибавляют 10 капель раствора метилового оранжевого, нейтрализуют раствором едкого кали (0,5 моль/л) и доводят объем раствора 60% спиртом до метки.

Гидроксиламин сернокислый. Гидроксиламина сульфат. (NH2OH)2 х H2SO4. М. м. 164,14. Бесцветные кристаллы. ГОСТ 7298-79.

Гидроксиламина щелочной раствор. 10% раствор гидроксиламина гидрохлорида смешивают с раствором едкого натра в соотношении 1:2 (по объему).

Гидрохинон. п - Диоксибензол. С6Н4(ОН)2. М. м. 110,11. Белый или серовато - белый кристаллический порошок. ГОСТ 19627-74.

Гликокол. См. Кислота аминоуксусная.

Глицерин. СН2ОН-СНОН-СН2ОН. М. м. 92,10. Бесцветная прозрачная густая жидкость. Смешивается с водой. Гигроскопичен. ГОСТ 6259-75.

Диазореактив. 5 мл раствора сульфаниловой кислоты (4,5 г сульфаниловой кислоты и 45 мл концентрированной хлористоводородной кислоты в 500 мл воды) вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, поставленную на лед, прибавляют 2,5 мл раствора нитрита натрия. Смесь оставляют на льду в течение 5 мин, затем прибавляют еще 10 мл раствора нитрита натрия, взбалтывают, оставляют на льду в течение 5 мин и доводят объем раствора водой до метки.

Хранят на льду. Применяют свежеприготовленным, сохраняя на льду.

п-(Диметиламино) бензальдегид. п-Диметиламинобензальдегид. (CH3)2NC6H4CHO. М. м. 149,2. Светло - желтый или желтый кристаллический порошок. ТУ 6-09-3272-77.

п-Диметиламинобензальдегида раствор (реактив Оллпорта). 0,125 г п-диметиламинобензальдегида растворяют в 100 мл 65% раствора серной кислоты, содержащей 0,1 мл раствора железа окисного хлорида. Реактив используют не ранее чем через сутки после приготовления.

Хранят в защищенном от света месте. Срок годности 7 сут.

п-Диметиламинобензальдегида раствор в концентрированной серной кислоте. 1 г п - диметиламинобензальдегида смачивают 4 каплями воды и прибавляют 3 мл концентрированной серной кислоты.

Диметилглиоксим. (CH3C=NOH)2. М. м. 116,12. Белый кристаллический порошок. ГОСТ 5828-77, СТ СЭВ 1752-79.

Диметилглиоксима раствор. 1 г диметилглиоксима растворяют в 100 мл 5% раствора едкого натра.

Диметилсульфоксид. CH3S(O)CH3. М. м. 78,14. Бесцветная прозрачная жидкость. ТУ 6-09-3818-77, х. ч.

Диметилформамид. HCON(CH3)2. М. м. 73,10. Бесцветная жидкость. ГОСТ 20289-74.

м-Динитробензол. C6H4(NO2)2. М. м. 168,11. Светло - желтые кристаллы. ТУ 6-09-09-88-77.

м-Динитробензола раствор в спирте. 1 г м-динитробензола растворяют в 100 мл 95% спирта.

2,4-Динитрофенилгидразин. C6H6N4O4. М. м. 198,14. Оранжево - красные мелкие кристаллы. ТУ 6-09-2394-77.

2,4-Динитрофенилгидразина раствор в хлористоводородной кислоте. К 0,1 г 2,4-динитрофенилгидразина прибавляют 4 мл концентрированной хлористоводородной кислоты, смесь растворяют в 20 мл горячей воды. Раствор применяют свежеприготовленным.

2,4-Динитрофенилгидразина спиртовой раствор. 0,5 г 2,4-динитрофенилгидразина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 6 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и перемешивают до исчезновения красно - оранжевого окрашивания осадка. Прибавляют 20 мл абсолютированного спирта, нагревают смесь на водяной бане до получения прозрачного раствора, охлаждают и доводят тем же спиртом до метки.

Полученный раствор хранят в холодном месте. Срок годности 3 мес.

2,4-Динитрохлорбензол. См. 1-Хлор-2,4-динитробензол.

1,4-Диоксан. С4Н8О2. М. м. 88,11. Бесцветная жидкость со слабым приятным запахом. ГОСТ 10455-80.

Дитизон. C13H12N4S. M. м. 256,33. Черный мелкокристаллический порошок. ГОСТ 10165-79.

Дифениламин. C6H5NHC6H5. М. м. 169,23. Белые мелкие кристаллы в виде чешуек, приобретающие при хранении сероватый оттенок. ГОСТ 5825-70, ч. д. а.

Дифениламина раствор. 0,05 г дифениламина растворяют в смеси 10 мл концентрированной серной кислоты и 2 мл воды.

N,N'-Дифенилгуанидин. C13H13N3. М. м. 211,27. Мелкокристаллический порошок белого или светло - желтого цвета. ТУ 6-09-3680-76.

1,2-Дихлорэтан. Этилен хлористый. C2H4Cl2. М. м. 98,96. Прозрачная бесцветная жидкость, несмешивающаяся с водой. 1,2-Дихлорэтан для хроматографии - ТУ 6-09-2661-78. 1,2-Дихлорэтан для спектроскопии - ТУ 6-09-06-695-75.

2,6-Дихлорфенолиндофенолят натрия. C12H6Cl2NNaO2. М. м. 290,08. Темно - зеленый, почти черный порошок. ТУ 6-09-2808-77.

2,6-Дихлорхинон - 4 - хлоримид. 2,6-Дихлорхинонхлоримид. C6H2Cl3NO. М. м. 210,45. Бледно - желтый кристаллический порошок. ТУ 6-09-05-889-78.

2,6-Дихлорхинонхлоримида раствор. 0,02 г перекристаллизованного из ацетона 2,6-дихлорхинонхлоримида растворяют в 50 мл свежеперегнанного бутилового или изопропилового спирта.

Хранят на холоду в банке оранжевого стекла.

При появлении розового окрашивания раствор к применению непригоден.

Диэтиламин. (C2H5)2NH. М. м. 73,14. Бесцветная жидкость. Легко воспламеняется. ТУ 6-09-68-79.

Железо (III) азотнокислое 9-водное. Железа окисного нитрат. Fe(NO3)3 х 9Н2О. М. м. 404,0. Светло - фиолетовые прозрачные кристаллы. ГОСТ 4111-74.

Железа окисного нитрата раствор. 5 г железа окисного нитрата растворяют в воде и разбавляют водой до 100 мл.

Железо (II) сернокислое 7-водное. Железа закисного сульфат (железный купорос). FeSO4 х 7Н2О. М. м. 278,02. Бледные зеленовато - голубые кристаллы. ГОСТ 4148-78.

Железа закисного сульфата раствор. 3 г железа закисного сульфата растворяют в смеси 3 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды и 3 мл разведенной серной кислоты. Раствор применяют свежеприготовленным.

Железа закисного сульфата 5% раствор. 5 г железа закисного сульфата растворяют в 90 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды и прибавляют 10 мл концентрированной серной кислоты. Раствор применяют свежеприготовленным.

Железо треххлористое 6-водное. Железа окисного хлорид. FeCl3 х 6Н2О. М. м. 270,30. Кристаллическая масса или куски желто - бурого цвета. На воздухе быстро расплывается. ГОСТ 4147-74.

Железа окисного хлорида раствор. 3 г железа окисного хлорида растворяют в воде и разбавляют водой до 100 мл.

Железа окисного хлорида спиртовый раствор. 1 г железа окисного хлорида растворяют в 100 мл 95% спирта.

Железо - нитратный реактив. Растворяют 1,5 г железа закисного сульфата и 1 г натрия метабисульфита в 200 мл воды (раствор А). В 10 мл раствора А растворяют 0,5 г натрия цитрата (раствор Б). Раствор Б используют только в день приготовления.

Известь жженая. См. Кальция окись.

Известь натронная. Пористые куски почти белого цвета. Реактив представляет собой смесь гидроокиси кальция и едкого натра. ГОСТ 4455-48.

Известь свежепрокаленная. См. Кальция окись свежепрокаленная.

Известь хлорная. Белый или слегка сероватый порошок с запахом хлора, частично растворим в воде. ГОСТ 1692-58.

Извести хлорной раствор. 1 г хлорной извести растирают с 9 мл воды. Раствор вместе с осадком переливают в склянку с притертой пробкой, оставляют на 1 ч, затем фильтруют.

Раствор применяют свежеприготовленным.

Известковая вода. См. Кальция гидроокиси раствор.

Изо - октан. 2,2,4-Триметилпентан. C8H18. M. м. 114,23. Прозрачная бесцветная жидкость без осадка. 1) Для хроматографии ТУ 6-09-921-76, х. ч.; 2) Эталонный ГОСТ 5.394-74.

Йод кристаллический. I2. М. м. 253,80. Сухие тяжелые фиолетово - черные с металлическим блеском кристаллические пластинки или кусочки. ГОСТ 4159-79.

Йодмонохлорида раствор. Раствор йодмонохлорида готовят одним из описанных ниже методов.

1. 13 г мелкорастертого йода растворяют при встряхивании в смеси 300 мл четыреххлористого углерода и 700 мл ледяной уксусной кислоты. К 20 мл этого раствора прибавляют 15 мл раствора йодида калия, 100 мл воды и титруют раствором натрия тиосульфата (0,1 моль/л). Затем через раствор пропускают сухой газообразный хлор до тех пор, пока на титрование 20 мл полученного раствора будет расходоваться двойное количество, но не большее, тиосульфата натрия.

2. 8 г йодтрихлорида растворяют в 200 мл ледяной уксусной кислоты, растворяют 9 г йода в 300 мл четыреххлористого углерода, смешивают оба раствора и прибавляют ледяной уксусной кислоты до 1 л.

Раствор йодмонохлорида хранят в закрытом сосуде в прохладном месте.

 

Примечание. Приготовление йодтрихлорида: над йодом, охлажденным смесью сухого льда с ацетоном до - 78 град. С, пропускают газообразный хлор до появления желтых капелек избыточного хлора. Реакционную смесь оставляют еще на несколько часов в охлаждающей бане, после чего перегоняют при комнатной температуре во второй сосуд.

 

Кадмий хлористый. Кадмия хлорид. CdCl2 х 2 1/2 H2O. М. м. 228,34. Бесцветные полупрозрачные кристаллы или кристаллический порошок, в массе белого цвета. ГОСТ 4330-76.

Калий азотнокислый. Калия нитрат. KNO3. М. м. 101,11. Бесцветные прозрачные кристаллы. ГОСТ 4217-77.

Калий бромистый. Калия бромид. KBr. М. м. 118,99. Бесцветные кристаллы или мелкокристаллический порошок. ГОСТ 4160-74.

Калия бромида раствор. 10 г калия бромида растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Хранят в банках с притертыми пробками в защищенном от света месте.

Калий бромноватокислый. Калия бромат. KBrO3. М. м. 167,01. Белый кристаллический порошок или кристаллы. ГОСТ 4457-74.

Кали едкое. Калия гидроксид. Калия гидроокись. КОН. М. м. 56,11. Белые куски, цилиндрические палочки или гранулы с кристаллической структурой на изломе. Гигроскопичен. ГОСТ 24363-80 (СТ СЭВ 1439-78).

Кали едкого раствор. 10 г кали едкого растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл. Хранят в стеклянных сосудах с каучуковыми пробками.

Калий двууглекислый. Калия гидрокарбонат. КНСО3. М. м. 100,12. Бесцветные прозрачные кристаллы. ГОСТ 4143-78.

Калия гидрокарбоната и калия карбоната раствор. 4 г калия гидрокарбоната растворяют в 15 мл воды (при нагревании), прибавляют 2,5 г кристаллического калия карбоната и доводят объем раствора водой до 20 мл.

Калий двухромовокислый. Калия бихромат. К2Сг2О7. М. м. 294,19. Желто - красные кристаллы. ГОСТ 4220-75.

Калия бихромата раствор. 5 г калия бихромата растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Калия бихромата раствор в серной кислоте. 1 г калия бихромата растворяют в 60 мл воды и осторожно приливают 7,5 мл концентрированной серной кислоты.

Калий железистосинеродистый 3-водный. Калия ферроцианид. Железистосинеродистый калий. Желтая кровяная соль. K4Fe(CN)6 х 3Н2О. М. м. 422,4. Лимонно - желтые кристаллы. ГОСТ 4207-75.

Калия ферроцианида раствор. Желтой кровяной соли раствор. 5 г калия ферроцианида растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Калий железосинеродистый. Калия феррицианид. Красная кровяная соль. K3Fe(CN)6. М. м. 329,26. Рубиново - красные кристаллы. ГОСТ 4206-75.

Калия феррицианида раствор. Красной кровяной соли раствор. 5 г калия феррицианида растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Калий йодистый. Калия йодид. KI. М. м. 166,00. Белые кристаллы. ГОСТ 4232-74.

Калия йодида раствор. 10 г калия йодида растворяют в свежепрокипяченной и охлажденной воде и доводят объем раствора водой до 100 мл. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в банках оранжевого стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

Калий йодноватокислый. Калия йодат. KIO3. М. м. 214,00. Белый кристаллический порошок. ГОСТ 4202-75.

Калия йодата раствор. 1 г калия йодата растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Калий марганцовокислый. Калия перманганат. KMnO4. М. м. 158,04. Темно - фиолетовые, почти черные кристаллы с сине - стальным блеском. ГОСТ 20490-75.

Калия перманганата раствор. 0,1 г калия перманганата растворяют в воде и разбавляют водой до 100 мл.

Хранят в стеклянных банках с притертыми пробками в защищенном от света месте.

Калия перманганата раствор насыщенный. 9 г калия перманганата заливают 100 мл горячей воды, перемешивают и оставляют на 1 ч, после чего осторожно сливают в банку оранжевого стекла с притертой пробкой.

Хранят в прохладном, защищенном от света месте.

Калия перманганата раствор в фосфорной кислоте. 3 г калия перманганата растворяют при нагревании в 100 мл разведенной фосфорной кислоты.

Калий надсернокислый. Калия персульфат. K2S2O8. М. м. 270,33. Белый кристаллический порошок или кристаллы. ГОСТ 4146-74.

Калий - натрий виннокислый 4-водный. Сеньетова соль. C4H4KNaO6 х 4Н2О. М. м. 282,23. Бесцветные прозрачные кристаллы. ГОСТ 5845-79.

Калия нитрат. См. Калий азотнокислый.

Калий сернокислый. Калия сульфат. K2SO4. М. м 174,27. Бесцветные прозрачные кристаллы. ГОСТ 4145-74.

Калий сернокислый кислый. Калия бисульфат. KHSO4. М. м. 136,17. Бесцветные прозрачные кристаллы, в массе белого цвета. ГОСТ 4223-75.

Калия бисульфата раствор. 10 г калия бисульфата растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Калия тетрайодомеркурат (II) щелочной раствор. Реактив Несслера. ТУ 6-09-2089-77.

I. К раствору 10 г калия йодида в 10 мл воды постепенно прибавляют при постоянном перемешивании насыщенный раствор ртути дихлорида до появления неисчезающего красного осадка. Прибавляют 30 г кали едкого и после растворения его - еще 1 мл насыщенного раствора ртути дихлорида. Разбавляют водой до 200 мл, дают отстояться и прозрачную жидкость сливают.

II. 21,5 г калия йодида растворяют в 50 мл воды в колбе вместимостью 300-500 мл, прибавляют 39 г ртути йодной и перемешивают до полного растворения. 150 г кали едкого растворяют в отдельной колбе в 200 мл воды и осторожно приливают в смесь растворов калия йодида и ртути йодной. Раствор охлаждают, переносят в банку оранжевого стекла вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки. Раствор отстаивают в течение 7 сут до осветления. Прозрачную жидкость сливают.

К 10 мл эталонного раствора аммиака (см. том 1, статья "Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей") прибавляют 3 капли реактива Несслера - тотчас же должно появиться желтое окрашивание.

Хранят в склянках оранжевого стекла с притертыми пробками в защищенном от света месте.

Калий углекислый. Калия карбонат. К2СО3. М. м. 138,21. Белый тонкий или зернистый порошок. Гигроскопичен. ГОСТ 4221-76.

Калий уксуснокислый. Калия ацетат. СН3 СО2 К. М. м. 98,15. Бесцветные кристаллы, расплывающиеся на воздухе. ГОСТ 5820-78.

Калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный. Калия фосфат двузамещенный. К2НРО4 х 3Н2О. М. м. 228,24. Белый кристаллический порошок или кристаллы. ГОСТ 2493-75.

Калия фосфата двузамещенного раствор. 1 г калия фосфата двузамещенного растворяют в 33 ч. воды.

Калий фосфорнокислый однозамещенный. Калия фосфат однозамещенный. КН2РО4. М. м. 136,09. Бесцветные кристаллы, растворимые в воде. ГОСТ 4198-75, х. ч.

Калия фосфата однозамещенного раствор (0,1 моль/л). Калия фосфат однозамещенный дважды перекристаллизовывают из воды и высушивают при 110 град. С до постоянной массы. 1,36 г перекристаллизованного калия фосфата однозамещенного растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Калий фталевокислый кислый. Калия гидрофталат. C8H5KO4. М. м. 204,23. Белый мелкокристаллический порошок. ТУ 6-09- 4433-77.

Калий хлористый. Калия хлорид. KCL. М. м. 74,56. Белый кристаллический порошок. ГОСТ 4234-77.

Калий хлорноватокислый. Калия хлорат. Бертолетова соль. KClO3. М. м. 122,55. Бесцветные блестящие кристаллы. СЭВ/РС 4290-73.

Калия хлората раствор. 5 г калия хлората растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100 мл.

Калий хромовокислый. Калия хромат. K2CrO4. М. м. 194,20. Золотисто - желтые мелкие кристаллы. ГОСТ 4459-75.

Кальция окись. Кальция оксид. Известь жженая. СаО. М. м. 56,08. Белые куски или порошок, слипающийся в комки. На воздухе поглощает воду и двуокись углерода. ГОСТ 8677-76.

Кальция гидроокиси раствор. Известковая вода. 1 ч. жженой извести гасят 5 ч. воды; кашицеобразную массу переносят в бутыль, прибавляют 15 ч. воды, сильно взбалтывают и оставляют на 4-5 ч. Затем воду сливают и отбрасывают. Остаток обливают 50 ч. холодной воды, взбалтывают, укупоривают бутыль и оставляют в прохладном месте на несколько дней, время от времени взбалтывая.

Для употребления известковую воду по мере надобности сливают с осадка и фильтруют, а к осадку вновь прибавляют воду до первоначального объема; взбалтывают и оставляют в прохладном месте в тщательно укупоренной бутыли для получения новой порции известковой воды.

Кальция окись свежепрокаленная. Известь свежепрокаленная. Известь прокаливают в муфеле до тех пор, пока взятая проба по охлаждении при осторожном обрызгивании водой не начнет потрескивать и сильно разогреваться (во избежание попадания в глаза пробу прикрывают часовым стеклом). При обливании свежепрокаленной и охлажденной извести половинным по весу количеством воды известь разогревается и увеличивается в объеме, образуя гидроокись кальция. При этом куски распадаются в белый порошок.

Хранят свежепрокаленную известь в герметически закрытых банках.