Оставьте ссылку на эту страницу в соцсетях:

Поиск по базе документов:

 

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель Федеральной

службы по надзору в сфере

защиты прав потребителей

и благополучия человека,

Главный государственный

санитарный врач

Российской Федерации

Г.Г.ОНИЩЕНКО

9 августа 2006 года

 

Дата введения:

1 сентября 2006 года

 

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ ФОРМАЛЬДЕГИДА,

АЦЕТАЛЬДЕГИДА, ПРОПИОНОВОГО АЛЬДЕГИДА, МАСЛЯНОГО АЛЬДЕГИДА

И АЦЕТОНА В ПРОБАХ МОЧИ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ

ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

МУК 4.1.2110-06

 

1. Область применения

 

Методические указания по определению концентрации алифатических альдегидов и ацетона в моче предназначены для использования Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, лечебными и научными учреждениями, работающими в области профпатологии и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды.

Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием альдегидов и ацетона в биологических средах у населения, проживающего в районах с повышенным уровнем загрязнения окружающей среды.

Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 "ГСОЕИ. Методики выполнения измерений", ГОСТ Р 1.5-92 "ГСС. Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов".

Методика выполнения измерения обеспечивает определение альдегидов в моче в диапазоне концентраций 0,001-0,10 мкг/куб. см, ацетона - 0,01-2,0 мкг/куб. см с погрешностью, не превышающей 26% - для формальдегида, 20% - для ацетальдегида, 25% - для ацетона, 25% - для пропионового альдегида, 19% - для масляного альдегида, при доверительной вероятности Р = 0,95.

 

    Формальдегид (HCHO)                  Молекулярная масса 30,03.

 

Формальдегид (муравьиный альдегид, метаналь) - бесцветный газ с резким раздражающим запахом. Температура кипения: -19,2 град. С, плотность: 0,8153 г/куб. см. Хорошо растворим в воде, спиртах и других полярных растворителях. При низких температурах смешивается с неполярными растворителями (толуолом, диэтиловым эфиром, этилацетатом) [5]. Обладает раздражающим, сенсибилизирующим и кожно-резорбтивным действием, оказывает гепатотропный эффект, относится к веществам, обусловливающим канцерогенную опасность [3].

 

    Ацетальдегид (CH3CHO)                Молекулярная масса 44,05.

 

Ацетальдегид (уксусный альдегид) - бесцветная жидкость с удушающим запахом. Температура кипения: 20,16 град. С, плотность: 0,778 г/куб. см. Смешивается во всех соотношениях с водой и большинством органических растворителей [1]. Оказывает наркотическое, раздражающее, мутагенное и канцерогенное действие [3].

 

    Пропионовый альдегид (CH3CH2CHO)     Молекулярная масса 58,08.

 

Пропионовый альдегид (пропаналь) - бесцветная жидкость с характерным запахом. Температура кипения: 48,8 град. С, плотность: 0,8058 г/куб. см. Растворим в воде, смешивается со многими органическими растворителями [4]. Оказывает наркотическое действие, вызывает изменения со стороны дыхательной системы, паренхиматозных органов, угнетает гемопоэз [3].

 

    Масляный альдегид (CH3(CH2)2CHO)     Молекулярная масса 72,11.

 

Масляный альдегид (бутаналь) - бесцветная прозрачная жидкость с резким запахом. Температура кипения: 75,7 град. С, плотность: 0,817 г/куб. см [2]. Растворим в воде, смешивается со многими органическими растворителями. Оказывает наркотическое, раздражающее и кожно-резорбтивное действие [3].

 

    Ацетон (CH3COCH3)                    Молекулярная масса 58,08.

 

Ацетон (диметилкетон) - летучая бесцветная жидкость с характерным запахом. Температура кипения: 56,1 град. С, плотность: 0,792 г/куб. см [1]. Смешивается с водой и органическими растворителями (эфиром, хлороформом, бензолом, четыреххлористым углеродом). Обладает наркотическим и кожно-резорбтивным действием, угнетает репродуктивную функцию. Преимущественно действует на центральную нервную систему [3].

 

2. Сущность метода

 

Методика основана на предварительном переводе альдегидов и ацетона в соответствующие 2,4-динитрофенилгидразон производные, концентрировании продуктов дериватизации из биологического материала экстракцией гексаном, высушивании гексанового экстракта, растворении высушенного остатка в ацетонитриле и анализе на жидкостном хроматографе.

Измерение концентрации альдегидов и ацетона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием УФ-детектора.

Измерению не мешают спирты, органические кислоты, кетоны и другие альдегиды.

 

3. Средства измерений, вспомогательные устройства,

материалы, растворы и реактивы

 

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы.

 

3.1. Средства измерений

 

Жидкостный хроматограф "Милихром-4" с ультрафиолетовым

детектором

Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические                     ГОСТ 24104-01

Гири Г2-210                                                 ГОСТ 7328-01

Термометр стеклянный                                        ГОСТ 28498-90

Микрошприцы МШ-10                                           ТУ 2.833.106-00

Цилиндр мерный вместимостью 50 куб. см                      ГОСТ 1770-74

Пипетки градуированные вместимостью 1, 5 и 10 куб. см       ГОСТ 29227-91

Колбы мерные вместимостью 50, 100, 200 и 1000 куб. см       ГОСТ 1770-74

Редуктор кислородный                                        ТУ 26-05-236-73

Стандартные образцы:

Формальдегид в воде с концентрацией 1,0 мг/куб. см          ГСО 7347-96.

 

3.2. Вспомогательные устройства

 

Колонка металлическая длиной 8 см и внутренним

диаметром 2 мм, заполненная сорбентом

Диасорб С16 зернением 5-6-7 мкм

Центрифуга ЦЛМН-Р10-01-"Элекон"                    ТУ 9443-001-245.23530-97

Дистиллятор                                        ТУ 61-1-721-79

Сушильный шкаф ШСС-80 П УХЛ 4.2                    ТУ 16.531.743-83

Дефлегматор длиной 300 мм                          ГОСТ 25336-86

Холодильник шариковый ХШ-300 (6 шар.)              ГОСТ 1770-74

Холодильник прямой ХПТ-3-300                       ГОСТ 1770-74

Воронка Шотта (пор 16)                             ГОСТ 25336-82

Воронки делительные вместимостью 250 куб. см       ГОСТ 23932-90

Пробирки центрифужные пропиленовые с

завинчивающейся крышкой вместимостью

15 куб. см, пр-во Sarstedt (Германия)

Бюксы СВ 19/9                                      ТУ 92-891.029-91

Стакан термостойкий вместимостью 2 куб. дм         ГОСТ 23932-90

Колбы для перегонки круглодонные                   ГОСТ 8682-93.

вместимостью 1,0; 2,0 куб. дм

 

3.3. Реактивы

 

Гексан для хроматографии, осч                       ТУ 6-09-4521-77

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, осч       ТУ 6-09-14-2167-84

Вода дистиллированная                               ГОСТ 6709-72

Ацетон, осч (чистота не менее 99,75)                ТУ 2633-039-44493179-00

Пропионовый альдегид, чда                           ТУ 6-09-08-1637-83

Масляный альдегид, чда                              ТУ 6-09-08-1885-86

2,4-Динитрофенилгидразин, ч                         ТУ-6-09-2394-77

2,4-Динитрофенилгидразон формальдегида,

перекристаллизованный из очищенного

этанола, чистота не менее 99,0%

2,4-Динитрофенилгидразон ацетальдегида,

перекристаллизованный из очищенного

этанола, чистота не менее 99,0%

2,4-Динитрофенилгидразон пропионового альдегида,

перекристаллизованный из очищенного

этанола, чистота не менее 99,0%

2,4-Динитрофенилгидразон масляного альдегида

перекристаллизованный из очищенного этанола,

чистота не менее 99,0%

Кислота хлористоводородная (плотность 1,19), хч     ГОСТ 3118-77

Перманганат калия, ч                                ГОСТ 20490-75

Спирт этиловый, очищенный от альдегидов и кетонов   ГОСТ Р 51652-00

кипячением с 2,4-динитрофенилгидразином,

перегнанный

Калий двухромовокислый, чда                         ГОСТ 4220-75

Серная кислота                                      ГОСТ 4204-77

Кислота уксусная, хч                                ГОСТ 61-75

Диэтиламин, ч, перегнанный для хроматографии        ТУ 6-09-68-89

Раствор гепарина в ампулах (5000 ед. в 1 куб. см).

 

3.4. Материалы

 

Гелий газообразный                                            ТУ 51-940-80.

 

3.5. Растворы

 

Хромовая смесь

Элюент для хроматографии

2 М водный раствор хлористоводородной кислоты

0,2%-й раствор 2,4-динитрофенилгидразина в

2 М хлористоводородной кислоте

Исходный раствор альдегидов для калибровки

Исходный раствор ацетона для калибровки.

Допускается применение других типов средств измерений, вспомогательного оборудования, химреактивов и материалов, по метрологическим и техническим характеристикам не уступающих перечисленным.

 

4. Требования к безопасности

 

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79, противопожарной безопасности - ГОСТ 12.1.004-85 и меры безопасности, указанные в "Руководстве по правилам эксплуатации прибора".

 

5. Требования к квалификации оператора

 

К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика и владеющие техникой жидкостно-хроматографического анализа.

 

6. Условия измерений

 

6.1. При подготовке проб к анализу и приготовлении растворов соблюдают следующие условия:

- температура воздуха 15-25 град. С;

- атмосферное давление 630-800 мм рт. ст.;

- влажность воздуха не более 80% при температуре 25 град. С.

6.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией к прибору.

 

7. Подготовка к выполнению измерений

 

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посуды и растворителей, приготовление растворов, подготовка хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.

 

7.1. Подготовка посуды

 

Используемую посуду замочить на 1 ч в хромовой смеси, промыть проточной водопроводной водой, ополоснуть дистиллированной водой и просушить при температуре 120 град. С.

 

7.2. Подготовка растворителей

 

7.2.1. Очистка ацетонитрила от примесей. В колбу вместимостью 2 куб дм помещают 1 куб. дм ацетонитрила и 20 г KMnO4, кипятят с шариковым холодильником в течение 1 ч, затем перегоняют с дефлегматором при температуре 81,6 град. С, отбирая фракции по 200 куб. см. Когда в колбе останется около 200 куб. см продукта, перегонку прекращают. Остаток можно смешивать с новой порцией растворителя. Первую фракцию (200 куб. см) отбрасывают, а остальные проверяют на поглощение в УФ-области (оптическая плотность при 200 нм не должна превышать 0,05 о.е./см).

7.2.2. Очистка диэтиламина от примесей. В колбу вместимостью 1,0 куб дм помещают 0,5 куб. дм диэтиламина и перегоняют с прямым холодильником. Первую и последнюю порции (50 куб. см) отбрасывают, оставляют среднюю порцию. Перегнанный раствор должен быть бесцветным.

7.2.3. Очистка этилового спирта от альдегидов и кетонов. К 1 куб. дм 96%-го спирта добавляют 2 г 2,4-динитрофенилгидразина, 0,5 куб. см концентрированной хлористоводородной кислоты и кипятят с шариковым холодильником 1 ч. Перегоняют с дефлегматором в приборе со стеклянными шлифами, отбрасывая первые и последние 100 куб. см, после этого отгоняют вторично.

 

7.3. Приготовление растворов

 

7.3.1. Хромовая смесь. В термостойкий стакан вместимостью 2 куб. дм насыпают 50 г хромово-кислого калия, осторожно приливают по палочке частями, тщательно перемешивая, 1 куб. дм концентрированной серной кислоты.

7.3.2. Элюент для хроматографии. Смешивают 40 куб. см дистиллированной воды с 60 куб. см очищенного ацетонитрила. Подвижную фазу фильтруют через воронку Шотта (пор 16) и дегазируют барботированием гелия в течение 5 мин. со скоростью 50-60 куб. см /мин. Затем добавляют 2,5% уксусной кислоты и 1% диэтиламина (объемные %).

7.3.3. Хлористоводородная кислота, 2 моль/куб. дм. В мерную колбу вместимостью 1 куб. дм, наполненную до половины объема дистиллированной водой, прибавляют 61,0 куб. см концентрированной хлористоводородной кислоты (плотность 1,19 г/куб. см), доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.3.4. 2,4-Динитрофенилгидразин, 0,2%-й раствор в 2 М хлористоводородной кислоте. В мерную колбу на 100 куб. см вносят 0,2 г 2,4-динитрофенилгидразина и доводят до метки 2 М раствором хлористоводородной кислоты.

7.3.5. Исходный раствор альдегидов для калибровки (раствор А): 4 куб. см ГСО формальдегида с концентрацией 1,0 мг/куб. см (4,0 мг), 5,0 куб. мм (3,9 мг) ацетальдегида, 5,0 куб. мм (4,03 мг) пропионового альдегида, 5,0 куб. мм (4,08 мг) масляного альдегида переносят в мерную колбу вместимостью 200 куб. см, содержащую дистиллированную воду, в которую предварительно добавляют 5 куб. см 0,2%-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина и доводят водой до метки. Стандартные растворы готовят с предварительным охлаждением альдегидов и дистиллированной воды. Используют свежеприготовленный раствор. Содержание альдегидов в растворе А составляет (с учетом плотности и содержания основного вещества): формальдегида - 20,00 мкг/куб. см; ацетальдегида - 19,5 мкг/куб. см; пропионового альдегида - 20,1 мкг/куб. см; масляного альдегида - 20,4 мкг/куб. см.

Исходный раствор ацетона для калибровки (раствор В): 5,0 куб. мм (3,96 мг) ацетона переносят в мерную колбу вместимостью 200 куб. см, содержащую дистиллированную воду, в которую предварительно добавляют 5 куб. см 0,2%-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина и доводят водой до метки. Используют свежеприготовленный раствор. Содержание ацетона в растворе В составляет (с учетом плотности и содержания основного вещества) 19,8 мкг/куб. см.

7.3.6. Получение 2,4-динитрофенилгидразонов формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона (используются для идентификации гидразонов альдегидов и ацетона в анализируемых пробах). Эквимолярные количества 2,4-динитрофенилгидразина и альдегида (или ацетона) кипятят в очищенном от альдегидов и кетонов этиловом спирте 1 ч в присутствии каталитических количеств хлористоводородной кислоты. Выпавший в осадок 2,4-динитрофенилгидразон соответствующего альдегида (или ацетона) отфильтровывают и перекристаллизовывают из этанола до постоянной температуры плавления.

 

7.4. Подготовка хроматографической колонки

 

Колонку устанавливают на хроматограф и подают элюирующую жидкость, подготовленную в соответствии с п. 7.3.2., со скоростью 100 куб. мм/мин. до установления равновесия колонки, которое определяют по стабильности нулевой линии детектора.

 

7.5. Установление градуировочной характеристики

 

7.5.1. Строят две зависимости площади хроматографического пика от концентрации альдегидов и ацетона в крови в диапазонах 0,001-0,010 мкг/куб. см и 0,01-0,10 мкг/куб. см - для альдегидов, 0,01-0,10 мкг/куб. см и 0,1-2,0 мкг/см - для ацетона. Градуировочные характеристики устанавливают по пяти сериям растворов для градуировки. Каждую серию, состоящую из пяти растворов, готовят из растворов А и В (см. п. 7.3.5.).

7.5.2. Для приготовления градуировочных смесей собирается суммарная проба мочи объемом не менее 1,5 куб. дм (от нескольких человек). В соответствии с п. 8 проводят анализ пробы мочи на содержание альдегидов и ацетона. При наличии анализируемых веществ в холостой пробе вычитают их фоновое содержание при построении калибровки.

7.5.3. Растворы для установления градуировочных характеристик готовят в мерных колбах вместимостью 50 куб. см. Для этого в каждую колбу вносят растворы А и В в соответствии с табл. 1 и 2, доводят объем до метки мочой и перемешивают. Анализируют свежеприготовленные растворы.

 

Таблица 1

 

РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ

ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ В МОЧЕ АЛЬДЕГИДОВ

В ДИАПАЗОНЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ 0,001-0,010 МКГ/КУБ. СМ

И АЦЕТОНА В ДИАПАЗОНЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ

0,01-0,10 МКГ/КУБ. СМ

 

Номер раствора       

1   

2  

3  

4 

5  

Объем раствора А, куб. см            

0,0025

0,005

0,010

0,015

0,025

Массовая концентрация формальдегида, 
мкг/куб. см                          

0,001

0,002

0,004

0,006

0,01

Массовая концентрация ацетальдегида, 
мкг/куб. см                          

0,001

0,002

0,004

0,006

0,01

Массовая концентрация пропионового   
альдегида, мкг/куб. см               

0,001

0,002

0,004

0,006

0,01

Массовая концентрация масляного      
альдегида, мкг/куб. см                

0,001

0,002

0,004

0,006

0,01

Объем раствора В, куб. см            

0,025

0,050

0,100

0,150

0,250

Массовая концентрация ацетона,       
мкг/куб. см                          

0,01 

0,02 

0,04 

0,06

0,10

 

Таблица 2

 

РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ

ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ В МОЧЕ АЛЬДЕГИДОВ

В ДИАПАЗОНЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ 0,01-0,10 МКГ/КУБ. СМ

И АЦЕТОНА В ДИАПАЗОНЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ

0,1-2,0 МКГ/КУБ. СМ

 

Номер раствора           

1  

2  

3  

4 

5  

Объем раствора А, куб. см            

0,025

0,050

0,100

0,150

0,250

Массовая концентрация формальдегида, 
мкг/куб. см                          

0,01 

0,02

0,04

0,06

0,10

Массовая концентрация ацетальдегида, 
мкг/куб. см                          

0,01 

0,02

0,04

0,06

0,10

Массовая концентрация пропионового   
альдегида, мкг/куб. см               

0,01 

0,02

0,04

0,06

0,10

Массовая концентрация масляного      
альдегида, мкг/куб. см               

0,01 

0,02

0,04

0,06

0,10

Объем раствора В, куб. см            

0,25 

0,50

1,25

2,50

5,00

Массовая концентрация ацетона,       
мкг/куб. см                          

0,1  

0,2 

0,5 

1,0

1,98

 

В делительную воронку помещают 50 куб. см градуировочного раствора, добавляют 2,5 куб. см 0,2%-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М хлористоводородной кислоте, 2 капли концентрированной хлористоводородной кислоты, 5 куб. см гексана и экстрагируют 15 мин. После расслоения гексана и мочи верхний слой (гексановый) переносят в центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой и центрифугируют 20 мин. со скоростью 1500 об./мин., затем 2 куб. см гексана переносят в бюксу и высушивают в потоке воздуха. Высушенный остаток растворяют в 0,5 куб. см элюента и аликвотную часть (10 куб. мм) анализируют в условиях:

элюент - (ацетонитрилода = 60:40) + 2,5% уксусной кислоты + 1% диэтиламина;

колонка 80х2 мм, заполнена Диасорбом С16

скорость движения элюента                                 100 куб. мм/мин.;

длина волны УФ-детектора                                  358 нм;

время удерживания:

2,4-динитрофенилгидразона формальдегида                   3,10 мин.;

2,4-динитрофенилгидразона ацетальдегида                   3,95 мин.;

2,4-динитрофенилгидразона ацетона                         4,70 мин.;

2,4-динитрофенилгидразона пропаналя                       5,04 мин.;

2,4-динитрофенилгидразона бутаналя                        7,95 мин.

 

    Градуировочный коэффициент рассчитывают по формуле:

 

                                 n

                                SUM = С  / S

                                i=1    i    i

                            К = -------------,

                                      n

 

    где:

    С  - концентрация вещества в градуировочной смеси, мкг/куб. см;

     i

    S   -  среднее  значение  пяти измерений площади пика i-й концентрации,

     i

единицы оптической плотности (е.о.п.);

    n - количество градуировочных смесей (n = 5).

 

7.6. Отбор проб

 

Для отбора проб мочи используют чистую стеклянную посуду объемом 100 куб. см с плотно закрывающейся крышкой. Срок хранения пробы в холодильнике - 12 ч.

 

8. Выполнение измерений

 

Проводят два параллельных измерения образца мочи. В делительную воронку вместимостью 250 куб. см помещают 50,0 куб. см мочи, добавляют 2,5 куб. см 0,2%-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М хлористоводородной кислоте, 2 капли концентрированной хлористоводородной кислоты, 5 куб. см гексана и экстрагируют 15 мин. После отстаивания верхний слой (гексановый) переносят в центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой и центрифугируют 20 мин. со скоростью 1500 об./мин. После расслоения жидкостей 2 куб. см гексанового экстракта переносят в бюксу и высушивают в потоке воздуха. Высушенный остаток растворяют в 0,5 куб. см элюента, вводят в хроматограф аликвотную часть (10 куб. мм) и анализируют в условиях, указанных в п. 7.5.

Идентификацию хроматографических пиков 2,4-динитрофенилгидразонов формальдегида, ацетальдегида, пропионового и масляного альдегидов и ацетона проводят путем сравнения времен удерживания хроматографических пиков в анализируемой пробе и в растворах 2,4-динитрофенилгидразонов альдегидов и ацетона, полученных согласно п. 7.3.6.

 

9. Вычисление результатов измерения

 

Концентрацию альдегидов и ацетона в моче (мкг/куб. см) вычисляют по формуле:

 

                                Х = S  х К,

                                     i

 

    где:

    Х - концентрация вещества в анализируемой пробе, мкг/куб. см;

    S   - площадь пика соответствующего 2,4-динитрофенилгидразона альдегида

     i

(или ацетона) в анализируемой пробе, е.о.п.;

    К - градуировочный коэффициент.

                                _

    За   результат   измерения  Х  принимают  среднее  арифметическое  двух

параллельных   измерений  Х , Х ,  расхождение  между  которыми  не  должно

                           1   2

превышать значения предела повторяемости r  (табл. 3).

                                          n

                                              _

    Результат измерения представляют в виде  (Х +/- ДЕЛЬТА),  мкг/куб.  см,

где ДЕЛЬТА - характеристика погрешности, мкг/куб. см, при Р = 0,95, равная:

 

                                              _

                                     дельта х Х

                            ДЕЛЬТА = ----------,

                                        100

 

    где дельта - относительное значение характеристики погрешности, %.

 

10. Внутренний оперативный контроль результатов измерений

 

Внутренний контроль качества (ВКК) результатов измерений - повторяемость, внутрилабораторная прецизионность (воспроизводимость), точность - осуществляют с целью получения оперативной информации о качестве результатов измерений и принятия при необходимости оперативных мер по его повышению в соответствии с нормативным документом МИ 2335-2003 "ГСОЕИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".

Методика выполнения измерений обеспечивает получение результатов измерений с нормативами, не превышающими значений, приведенных в табл. 3 и 4.

 

Таблица 3

 

ЗНАЧЕНИЯ ПРЕДЕЛОВ ПОВТОРЯЕМОСТИ И ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ

ПРИ ДОВЕРИТЕЛЬНОЙ ВЕРОЯТНОСТИ Р = 0,95

 

┌─────────────────────┬────────────────────┬──────────────────────────────┐

    Наименование     │Предел повторяемости│  Предел внутрилабораторной  

    определяемого       (относительное         воспроизводимости      

    компонента и           значение         (относительное значение   

│ диапазон измерений, │    допускаемого    допускаемого расхождения между│

     мкг/куб. см     │ расхождения между  │двумя результатами измерений, │

                     │ двумя результатами     полученными в одной     

                         параллельных       лаборатории, но в разных  

                     │определений), r , % │        условиях), R   , %   

                                    n                         _       

                                                              Хl      

├─────────────────────┼────────────────────┼──────────────────────────────┤

│Формальдегид,                26,8                     27,2            

│от 0,001 до 0,1 вкл. │                                                 

├─────────────────────┼────────────────────┼──────────────────────────────┤

│Ацетальдегид,                16,8                     24,7            

│от 0,001 до 0,1 вкл. │                                                 

├─────────────────────┼────────────────────┼──────────────────────────────┤

Пропионовый альдегид,│        24,5                     26,1            

│от 0,001 до 0,1 вкл. │                                                 

├─────────────────────┼────────────────────┼──────────────────────────────┤

│Масляный альдегид,           23,7                     25,9            

│от 0,001 до 0,1 вкл. │                                                 

├─────────────────────┼────────────────────┼──────────────────────────────┤

│Ацетон,                      24,9                     26,8            

│от 0,01 до 2,0 вкл.                                                   

└─────────────────────┴────────────────────┴──────────────────────────────┘

 

Таблица 4

 

ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ, ЗНАЧЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ТОЧНОСТИ,

ПОВТОРЯЕМОСТИ, ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ

 

Наименование   
определяемого   
компонента и   
диапазон     
измерений, мг/куб.
дм (мкг/куб. см) 

Показатель      
повторяемости   
(относительное  
среднеквадрати- 
ческое отклонение
повторяемости), 
сигма , %       
r          

Показатель      
воспроизводимости
(относительное  
среднеквадрати- 
ческое отклонение
воспроизводимо- 
сти), сигма , % 
R    

Показатель 
точности  
(границы  
относительной
погрешности при
вероятности 
Р = 0,95), 
+/- дельта, %

Формальдегид,       
от 0,001 до 2,0 вкл.

9,9      

10,7      

26,0     

Ацетальдегид,       
от 0,001 до 0,1 вкл.

7,1      

9,3       

20,0     

Пропионовый альдегид,
от 0,001 до 0,1 вкл.

7,6      

13,3      

25,0     

Масляный альдегид,  
от 0,001 до 0,1 вкл.

8,5      

10,6      

19,0     

Ацетон,             
от 0,01 до 2,0 вкл. 

11,2      

14,4      

25,0     

 

10.1. Контроль стабильности градуировочного графика

 

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят 1 раз в квартал в анализируемой серии измерений. Определяют содержание исследуемых соединений в градуировочных растворах, которые соответствует началу, середине и концу диапазона измерений. Градуировка признается стабильной, если расхождение между заданными и измеренными значениями концентраций не превышает 5%.

 

10.2. Контроль повторяемости

 

    Относительное    расхождение   между   результатами   двух   измерений,

выполненных  в  соответствии  с  методикой  одним  оператором при измерении

образцов  одной  и  той  же  рабочей пробы  с использованием одних и тех же

средств  измерений  и  реактивов  в течение возможно минимального интервала

времени, не должно превышать значения предела повторяемости r  (табл. 3).

                                                             n

    Повторяемость    результатов    параллельных    определений    признают

удовлетворительной, если выполняется условие:

 

                                    r     Х    + Х

                                     n     max    min

                     Х    - Х    <= --- х -----------,

                      max    min    100       2

 

    где:

    r  - значение предела повторяемости, %;

     n

    Х   , Х     -  максимальный  и минимальный результаты двух параллельных

     max   min

измерений содержания i-го вещества, мкг/куб. см.

Если условие не выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

 

10.3. Контроль воспроизводимости

 

Внутренний контроль качества воспроизводимости проводят с использованием рабочей пробы. Пробу делят на две равные части и анализируют в соответствии с методикой, максимально варьируя условия проведения анализа (разные операторы, разное время, разные партии реактивов одного типа, разные наборы мерной посуды и т.д.). Воспроизводимость результатов контрольных измерений признают удовлетворительной, если выполняется условие:

 

                                           _    _

                                     R     Х  + Х

                                      _     1    2

                         _    _       Хl

                          - Х | <= --- х -------,

                          1    2     100      2

 

    где:

    _

    Х   -  средний  результат  анализа  рабочей  пробы  из 2-х параллельных

     1

измерений, мкг/куб. см;

    _

    Х   -  средний  результат  анализа  рабочей  пробы  из 2-х параллельных

     2

измерений, полученный в других условиях, мкг/куб. см;

    R   -  значение   предела   внутрилабораторной   воспроизводимости,   %

     _

     Хl

(табл. 3).

                                               _    _

    Расхождение  между  результатами измерений Х  и Х , полученных в разных

                                                1    2

условиях, не должно превышать значений показателя воспроизводимости R   при

                                                                     _

                                                                     Хl

доверительной вероятности Р = 0,95, указанных в табл. 3.

Если условие не выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

 

10.4. Контроль точности

 

    Контроль  точности  с использованием метода добавок состоит в сравнении

результата   контрольной  процедуры,  равного  разности  между  результатом

контрольного  измерения  содержания  определяемого  компонента  в  пробе  с

                      _                                      _

известной  добавкой  (Х'),  в  рабочей  пробе  без  добавки (Х) и величиной

добавки   С    (добавка  должна  составлять  не  менее  40%  от  содержания

           d

анализируемого  компонента  в  рабочей  пробе)  с  нормативом  точности  К.

Результаты   контроля   признаются  удовлетворительными,  если  выполняется

условие:

 

                              _    _

                             |Х' - Х - С | = К ,

                                        д     k

 

    где:

    _

    Х'  - средний результат контрольного измерения содержания определяемого

компонента  в  рабочей  пробе  с  известной  добавкой  из  2-х параллельных

измерений, мкг/куб. см;

    _

    Х  -  средний результат контрольного измерения содержания определяемого

компонента в рабочей пробе из 2-х параллельных измерений, мкг/куб. см;

    С  - величина добавки к пробе, мкг/куб. см;

     д

 

                              ______________________________

                             /дельта   _ 2    дельта   _  2

               К = 0,84 х   /(------ х Х)  + (------ х Х') .

                          \/    100             100

 

    Качество   контрольной   процедуры   признают   удовлетворительным  при

выполнении условия: К  <= К.

                     k

При превышении норматива контроля точности эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Периодичность контроля воспроизводимости и точности регламентируется в руководстве по качеству лаборатории.

 

Литература

 

1. Химическая энциклопедия/Под. ред. И.Л.Кнунянц. М.: "Советская энциклопедия", 1988. Т. 1.

2. Химическая энциклопедия/Под. ред. И.Л.Кнунянц. М.: "Советская энциклопедия", 1990. Т. 2.

3. Филов В.А., Тиунов Л.А. Вредные химические вещества. Галоген- и кислородсодержащие органические соединения: Справочник. С.-Пб.: "Химия", 1994.

4. Химическая энциклопедия/Под. ред. Н.С.Зефирова. М.: "Большая российская энциклопедия", 1995. Т. 4.

5. Химическая энциклопедия/Под. ред. Н.С.Зефирова. М.: "Большая российская энциклопедия", 1999. Т. 5.

 

Методические указания разработаны Пермским научно-исследовательским клиническим институтом детской экопатологии (Т.С.Уланова, Т.Д.Карнажицкая).

 

 



Все нормативно-правовые акты по медицине // Здравоохранение, здоровье, заболевания, лечение, лекарства, доктора, больницы //

Рейтинг@Mail.ru Яндекс цитирования

Copyright © Медицинский информационный ресурс www.hippocratic.ru, 2012 - 2018