"Временные методические рекомендации по организации и проведению комплекса санитарно-гигиенических мероприятий в отделениях, больницах, клиниках и институтах хирургического профиля" // Портал о здоровье, заболеваниях и лечении, о лекарствах, о докторах и больницах.

Утверждаю

Начальник Главного управления

лечебно-профилактической помощи

А.Г.САФОНОВ

29 декабря 1973 г. N 10/8-43

Утверждаю

Начальник главного

санитарно-эпидемиологического

Управления Минздрава СССР

В.Е.КОВШИЛО

29 декабря 1973 г. N 1142-73

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПО ОРГАНИЗАЦИИ И ПРОВЕДЕНИЮ КОМПЛЕКСА

САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКИХ МЕРОПРИЯТИЙ В ОТДЕЛЕНИЯХ,

БОЛЬНИЦАХ, КЛИНИКАХ И ИНСТИТУТАХ ХИРУРГИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ

Методические рекомендации разработаны Всесоюзным научно-исследовательским институтом дезинфекции и стерилизации Министерства здравоохранения СССР, Городской санитарно-эпидемиологической станцией г. Москвы.

I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1. Основным возбудителем внутрибольничных гнойно-септических заболеваний и послеоперационных осложнений является патогенный стафилококк.

2. Источником инфекции в хирургических клиниках являются больные острыми и хроническими формами гнойничковых заболеваний и носители патогенного стафилококка среди больных и обслуживающего персонала.

3. Стафилококк хорошо переносит высыхание; прямой солнечный свет вызывает гибель стафилококка в течение 4-5 часов. Стафилококки устойчивы к высокой температуре, менее устойчивы к действию различных химических веществ.

4. Передача патогенного стафилококка происходит двумя путями: воздушно-капельным и контактным.

5. Для профилактики и борьбы с послеоперационными гнойными осложнениями необходимо организовать и проводить комплекс санитарно-гигиенических мероприятий, направленных на обезвреживание источников инфекции и на перерыв путей передачи.

6. Данные Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций, дезинфекционных станций и дезинфекционных отделов санитарно-эпидемиологических станций, главных врачей лечебно-профилактических учреждений, персонала приемных отделений и отделений хирургического профиля клиник, больниц и институтов.

7. Заведующий хирургическим отделением несет ответственность за выполнение комплекса мероприятий по борьбе с послеоперационными осложнениями; назначает врача, который вместе со старшей сестрой отделения организует и контролирует выполнение рекомендаций.

8. Заведующий отделением один раз в квартал организует обследование обслуживающего персонала на носительство патогенного стафилококка и в случае выявления носителей организует проведение их санации.

9. Старшая сестра отделения проводит инструктаж среднего и младшего медицинского персонала по выполнению комплекса противоэпидемических мероприятий.

II. САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКИЙ РЕЖИМ В ПРИЕМНОМ ОТДЕЛЕНИИ

И ПАЛАТАХ

10. У всех поступающих в приемное отделение больных осматривают кожные покровы, зев и измеряют температуру. Деревянные шпатели одноразового пользования после использования уничтожают, а металлические кипятят в течение 15 минут. Термометры целиком помещают в сосуд с 0,5-процентным раствором хлорамина с ежедневной сменой дезинфицирующего раствора.

11. Осмотр больного проводят на кушетке, покрытой клеенкой; после приема каждого больного клеенку протирают ветошью, смоченной 0,5-процентным раствором хлорамина или 0,2-процентным осветленным раствором хлорной извести.

12. Больной в приемном покое проходит полную санитарную обработку: принимает душ, стрижет ногти и т.д. Для мытья больной получает обеззараженную мочалку. После использования мочалку кипятят в 2-процентном растворе соды в течение 15 минут, сушат и хранят в чистой посуде; если мочалки кипятить сразу после использования не представляется возможным, то их собирают в маркированную емкость с 0,5-процентным раствором хлорамина или 0,2-процентным осветленным раствором хлорной извести, затем промывают проточной водой.

13. Щетки для обработки рук моют, сушат и автоклавируют при 0,5 ати в течение 30 минут. Хранят до использования в биксах, вынимают по мере надобности стерильным корнцангом.

14. Наконечники для клизм после каждого использования кипятят 15 минут, хранят в посуде с надписью "чистые" в сухом виде. Для обработки собирают в сосуд с 0,5-процентным раствором хлорамина или 0,2-процентным осветленным раствором хлорной извести.

15. Перед поступлением больного в палату кровать, прикроватную тумбочку, подставку для подкладного судна протирают ветошью, обильно смоченной дезинфицирующим раствором (0,5-процентный раствор хлорамина или 0,2-процентный раствор осветленной хлорной извести). Кровать застилают постельными принадлежностями, прошедшими камерную обработку по режиму для вегетативных форм микробов (Приложение N 1). По возможности соблюдают цикличность заполнения палат.

16. Больному выделяют индивидуальные предметы ухода: плевательницу, поильник, подкладное судно и т.д., которые после употребления тщательно моют. После выписки больного предметы индивидуального ухода подвергают обеззараживанию (Приложение N 1).

17. Для мытья рук больных, а также обслуживающего персонала используют жидкое гексахлорофеновое мыло. Допускают использование хозяйственного мыла в мелкой фасовке на 1 употребление.

18. Запрещают больным пользоваться личными шерстяными вещами, в случае необходимости шерстяные вещи больным выдают после камерной обработки.

19. При смене нательного и постельного белья его аккуратно собирают в мешки из хлопчатобумажной ткани или емкости с крышкой. Запрещают сбрасывать бывшее в употреблении белье на пол или в открытые приемники. Сортировку и разборку грязного белья производят в специально выделенном помещении. После смены белья протирают предметы в палате и пол с дезинфицирующим раствором (Приложение N 1).

20. Уборку приемного отделения и палат производят не реже 2 раз в день влажным способом. Дезинфицирующие средства используют после смены белья и в случае возникновения послеоперационных осложнений.

21. Уборочный материал (ведра, тазы, и пр.) маркируют и используют строго по назначению. Ветошь выделяют и хранят строго по объектам обработки. После использования уборочный материал обеззараживают замачиванием на 1 час в 1-процентном растворе хлорамина или 0,5-процентном осветленном растворе хлорной извести.

22. Категорически запрещают принимать в хирургическое отделение мягкие игрушки и другие предметы, не выдерживающие дезинфекционной обработки.

III. САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКИЙ РЕЖИМ В ОПЕРАЦИОННОМ БЛОКЕ,

ПЕРЕВЯЗОЧНЫХ И ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫХ ПАЛАТАХ, ОТДЕЛЕНИЯХ

РЕАНИМАЦИИ И ПАЛАТАХ ИНТЕНСИВНОЙ ТЕРАПИИ

23. Операционные блоки оборудуют стационарными бактерицидными облучателями и вентиляционными установками с преобладанием притока воздуха над вытяжкой. В приточную вентиляционную систему устанавливают бактерицидные фильтры.

24. В операционных, послеоперационных палатах, перевязочных, отделениях реанимации и интенсивной терапии для снижения микробной обсемененности рекомендуется установка воздухоочистителей передвижных рециркуляционных (ВОПР-0,9 и ВОПР-1,5) (Приложение N 3).

25. Строго разделяют операционные для чистых и гнойных операций. В случае отсутствия условий для выполнения этого требования операции по поводу гнойных процессов производят в специально выделенные дни с последующей тщательной дезинфекцией после операции операционного блока и всего оборудования.

26. Хирурги, операционные сестры и все лица, участвующие в операции, перед операцией принимают гигиенический душ, надевают операционное белье (пижаму, тапочки, шапочку, халат). Перед входом в операционный блок халат снимают, надевают маску, бахилы и проходят в предоперационную, где производят обработку рук и надевают стерильный халат, перчатки и маску.

27. Все лица перед входом в операционную надевают 4-слойную марлевую маску и тщательно убирают волосы под шапочку, после чего надевают бахилы. Для использованных бахил устанавливают бак или ведро с крышкой. Не разрешают хождение персонала в операционном блоке в уличной обуви.

Вход в операционный блок персоналу, не участвовавшему в операции, запрещают.

28. Все предметы, ввозимые и вносимые в операционный блок (каталку,

баллоны с O , CO , кардиографы и т.д.) перед входом в операционный блок

2 2

обрабатывают ветошью, обильно смоченной дезинфицирующим раствором.

29. Стол для стерильного инструментария покрывают стерильной простыней непосредственно перед операцией и раскладывают на нее стерильный инструментарий, сверху закрывают стерильной простыней.

30. Перевязочный материал и инструментарий, использованные в ходе операции, собирают в специально выделенные емкости.

31. Двери в операционном блоке держат постоянно закрытыми.

32. Категорически запрещают хранение в операционном зале предметов, не используемых во время операционного вмешательства.

33. Строго разделяют перевязочные для чистых и гнойных перевязок. В случае наличия одной перевязочной обработки гнойных ран производят после проведения чистых манипуляций с последующей тщательной обработкой помещения и всего оборудования дезинфицирующими растворами.

34. Сотрудники перевязочных, послеоперационных палат, палат интенсивной терапии и отделений реанимации ежедневно меняют халаты, шапочки, маски.

35. Медицинская сестра во время перевязок больных с нагноительными процессами надевает клеенчатый фартук, который после каждой перевязки протирает ветошью, смоченной в дезинфицирующем растворе, и моет руки жидким гексахлорофеновым мылом.

36. После проведения перевязок и сбора перевязочного материала в специально выделенные емкости производят влажную уборку с применением дезинфицирующих растворов.

Инфицированный перевязочный материал подлежит дезинфекционной обработке (Приложение N 1).

37. Персоналу, не работающему в перевязочных, отделениях реанимации, палатах интенсивной терапии и послеоперационных палатах, вход в них запрещен.

38. Перед поступлением больного в послеоперационную палату из операционного блока кровать, прикроватную тумбочку обрабатывают дезинфицирующим раствором. Кровать заправляют постельными принадлежностями, прошедшими камерную обработку.

39. Уборку операционного блока, перевязочных, послеоперационных палат, палат интенсивной терапии, отделений реанимации проводят влажным способом не реже 2 раз в день с использованием дезинфицирующих средств (Приложение N 1).

40. Один раз в неделю проводят генеральную уборку операционного блока и перевязочных. Помещения операционного блока, перевязочных предварительно освобождают от предметов, оборудования, инвентаря, инструментов, медикаментов и т.д. В качестве дезинфектантов используют 5-процентный раствор хлорамина или комплекс, состоящий из 6-процентной перекиси водорода и 0,5-процентного моющего средства. После дезинфекции помещения операционного блока и перевязочные облучают ультрафиолетом, включая настенные или потолочные бактерицидные облучатели (ОБН-200 или ОБН-350, один облучатель на 30 куб. м помещения; ОБН-150 или ОБН-300 - на 60 куб. м на 2 часа).

41. Для каждого вида уборочных работ выделяют материал и строго промаркированный инвентарь. Использованный мягкий материал (ветошь) кипятят в течение 15 минут, сушат и хранят до следующей уборки в закрывающемся шкафу или тумбочке. Уборочный материал после мытья полов заливают 1-процентным раствором хлорамина на 60 минут в том же ведре, которое использовали для уборки, затем прополаскивают в проточной воде и сушат. Следят, чтобы инвентарь использовали строго по назначению.

IV. ОБРАБОТКА ОПЕРАЦИОННОГО ПОЛЯ, РУК,

ХИРУРГИЧЕСКИХ ПЕРЧАТОК В ХОДЕ ОПЕРАЦИИ

42. Обязательной является обработка рук всех участвующих в операции: хирургов, анестезиологов, операционных сестер, функциональных диагностов и т.д.

43. Для обработки рук используют различные препараты, разрешенные Фармакологическим комитетом Министерства здравоохранения СССР, в том числе рецептуру "С-4" (смесь перекиси водорода и муравьиной кислоты) и йодопирон.

44. Рецептуру "С-4" готовят из необходимого количества перекиси водорода и муравьиной кислоты, которые смешивают в стеклянном сосуде, последний помещают в холодную воду на 1-1,5 часа и периодически встряхивают. Полученный раствор хранят не более суток в стеклянном сосуде с герметической пробкой в прохладном месте.

Для обработки рук используют 2,4-процентный раствор рецептуры "С-4".

Количество ингредиентов для приготовления рецептуры "С-4":

┌────────────┬────────────────────────────────────────────────────────────┐

│ Количество │ Количество ингредиентов │

│ рабочего ├───────────────┬─────────────────────────────┬──────────────┤

│раствора (л)│ 30-33% │ Муравьиная кислота │ Вода (л) │

│ │ перекись ├──────────────┬──────────────┤ │

│ │ водорода (мл) │ 100% (мл) │ 85% (мл) │ │

├────────────┼───────────────┼──────────────┼──────────────┼──────────────┤

│1 │17,1 │6,9 │8,1 │до 1 │

│2 │34,2 │13,8 │16,2 │до 2 │

│5 │85,5 │34,5 │40,5 │до 5 │

│10 │171,0 │69,0 │81,0 │до 10 │

└────────────┴───────────────┴──────────────┴──────────────┴──────────────┘

Раствор готовят и используют только в день операции.

Перед обработкой рук раствором рецептуры "С-4" руки, моют водой с мылом (без щетки) в течение 1 минуты. После этого руки ополаскивают водой для удаления мыла и вытирают насухо стерильной салфеткой. Затем руки обрабатывают в течение 1 минуты рецептурой "С-4" в эмалированном тазу, после чего вытирают стерильной салфеткой и надевают стерильные перчатки.

После окончания работы руки смазывают обычным смягчающим средством.

45. Рабочие растворы йодопирона <*> готовят в эмалированном тазу, дважды обожженном горящим спиртом, наливают два литра теплой воды и добавляют (по мерному сосуду) 20 мл моющего порошка-лаурилсульфата, после растворения которого добавляют 40 мл йодопирона. Тщательно перемешивают стеклянной палочкой или деревянной. Раствор содержит 0,05 процентов свободного йода.

--------------------------------

<*> Препарат рекомендован Фармакологическим комитетом и в ближайшее время будет налажен его выпуск.

Предварительно руки моют под краном стерильной щеткой 1-2 мин., обращая особое внимание на околоногтевые пространства, вытирают стерильной салфеткой. Затем руки моют в растворе йодопирона в течение 4-5 мин. После чего их вытирают стерильной марлевой салфеткой, надевают стерильные перчатки.

46. Обработка перчаток в ходе операции.

Таз с раствором йодопирона или рецептуры "С-4" после обработки рук перед операцией вносят в операционную и через каждые 45-60 минут проводят повторную обработку перчаток в процессе операции.

47. Для обработки кожи операционного поля применяют йодопирон, йодонат.

Рабочие растворы йодоната готовят ex tempore путем разбавления исходного раствора в 5 раз кипяченой или стерильной водой. Кожу операционного поля без предварительного мытья обрабатывают двухкратным смазыванием стерильными тампонами, смоченными 5-7 мл раствора йодоната или йодопирона 1 процент концентрации по свободному йоду.

V. ПОДГОТОВКА ХИРУРГИЧЕСКИХ ИНСТРУМЕНТОВ К ОПЕРАЦИИ

48. После окончания операции весь хирургический инструментарий разбирают и промывают проточной водой. Промытые инструменты (шприцы, иглы, и части аппаратов) замачивают в горячем (50 °C) моющем растворе (0,5-процентный раствор перекиси водорода с моющим средством, взятых в соотношении 1:1) в течение 15 минут, полностью погружая их в раствор и заполняя полости.

Инструменты после гнойных операций перед обработкой погружают на 30 минут в 3-процентный раствор перекиси водорода с моющим средством или 1 процентный раствор хлорамина.

49. После замачивания в этом растворе инструменты моют ершами или ватно-марлевыми тампонами в среднем 25-30 секунд на предмет. Раствор употребляют однократно при сильном загрязнении предметов кровью. Если раствор не изменяет цвета, его используют повторно. Вымытые предметы прополаскивают в проточной воде, затем в дистиллированной. Качество мытья инструментов определяют путем постановки бензидиновой пробы на наличие крови.

Бензидиновая проба основана на окислении бензидина перекисью водорода за счет пероксидазного действия кровяного пигмента.

Чаще используют модификацию бензидиновой пробы Грегерсена: смешивают 0,0025 г основного бензидина с 0,1 г перекисного бария (перекись бария может быть заменена 3-процентным раствором перекиси водорода) и перед использованием добавляют 5 мл 50-процентного раствора уксусной кислоты, взбалтывают до полного растворения.

Указанным раствором смачивают тампон и протирают инструменты, шприцы и части аппаратов. Появление зеленого окрашивания указывает на наличие крови на предметах, следовательно, изделие подлежит повторной обработке. Полноту отмывания щелочных добавок к ПАВ моющего препарата проверяют качественной реакцией с 0,1-процентным спиртовым раствором фенолфталеина путем нанесения 2-3 капель раствора на вымытый инструмент. При появлении розового окрашивания инструменты подлежат повторной промывке в проточной воде в течение 5 минут.

VI. СТЕРИЛИЗАЦИЯ ХИРУРГИЧЕСКИХ ИНСТРУМЕНТОВ,

РЕЗИНОВЫХ ПЕРЧАТОК, ПЕРЕВЯЗОЧНОГО МАТЕРИАЛА,

ХИРУРГИЧЕСКОГО БЕЛЬЯ

50. Стерилизация обеспечивает гибель в стерилизуемом материале вегетативных и споровых форм патогенных и непатогенных микроорганизмов.

51. Стерилизацию проводят различными методами: паром, сухим горячим воздухом, растворами химических веществ и газами. Выбор того или иного способа стерилизации зависит от особенностей стерилизуемого объекта и метода, от его достоинств и недостатков.

В паровых стерилизаторах стерилизуют: белье, перевязочный материал, хирургические инструменты, детали приборов и аппаратов, изготовленных из коррозионностойких металлов и сплавов: шприцы с надписью 200 °C, стеклянную посуду, изделия из резины (перчатки, трубки, катетеры, зонды и т.д.).

Стерилизацию в паровых стерилизаторах (автоклавах) осуществляют водяным насыщенным паром:

при температуре 132° +/- 2 (давл. 2 ати) - 20 мин.

при температуре 126° +/- 2 (давл. 1,5 ати) - 30 мин.

при температуре 120° +/- 2 (давл. 1,1 ати) - 45 мин.

Последний режим рекомендован для изделий из резины и резиновых перчаток. Резиновые перчатки перед стерилизацией внутри и снаружи пересыпают тальком для предохранения их от склеивания. Между перчатками прокладывают марлю; каждую пару перчаток завертывают отдельно в марлю и в таком виде помещают в биксы. Хирургическое белье, перевязочный материал, резиновые перчатки, хирургические инструменты стерилизуют в стандартных биксах, рыхло закладывая их для свободного поступления пара.

В качестве упаковочных материалов используют двойной слой бязевой ткани или однослойные конверты из растительного пергамента ГОСТ 1341-60.

52. Хирургические, гинекологические и стоматологические инструменты, детали и узлы приборов и аппаратов, в том числе изготовленные из коррозионнонестойких материалов и сплавов, шприцы с надписью 200 °C, режущие инструменты стерилизуют в воздушных стерилизаторах.

Стерилизацию в воздушных стерилизаторах осуществляют сухим горячим воздухом:

при температуре 180 °C - 45 мин.

при температуре 160 °C - 60 мин.

В качестве упаковочного материала используют стандартные биксы, металлические пеналы, упаковку из крафт-бумаги, швы конверта заклеивают 10-процентным клеем из поливинилового спирта или 5- процентным крахмальным клеем.

53. Хирургические инструменты, из коррозионностойких металлов и сплавов, изделия из резины, пластических масс, в том числе с металлическими частями, стерилизуют в 6-процентном растворе перекиси водорода при температуре раствора 50 °C, экспозиции 3 часа, или при температуре раствора 18 °C, экспозиции 6 часов.

54. Газовый метод стерилизации применяют для эндоскопических инструментов, аппаратов экстракорпорального кровообращения, изделий из пластических масс, кетгута.

В качестве стерилизующих агентов используют:

окись этилена и смесь "ОБ" или "ОКЭБМ" (окись этилена с бромистым метилом в соотношении 1:1,5 и 1:2,5 по весу соответственно).

Норма расхода окиси этилена при температуре 18 °C составляет 2,5 г/л, экспозиция 16 часов; при температуре 50 °C - 1,2 г/л, экспозиция 6 часов. Норма расхода смеси "ОБ" при температуре 18 °C составляет 3,5 г/л, экспозиция 16 часов, при температуре 50 °C - 1,6 г/л, экспозиция 6 часов. В качестве упаковочных материалов при газовом методе стерилизации применяют полиэтиленовую пленку низкого давления.

55. Смотровые инструменты (отоларингологические, стоматологические и т.д.) обеззараживают:

- кипячением в дистиллированной воде в течение 30 минут;

- погружением:

а) в тройной раствор (2-процентный раствор формалина, 0,3-процентный раствор фенола и 1,5-процентный раствор двууглекислой соды) на 45 минут;

б) в 6-процентный раствор перекиси водорода на 3 часа;

в) в 10-процентный раствор формальдегида на 3 часа; последние два раствора рекомендованы для обеззараживания зубные, гортанных и носоглоточных зеркал.

VII. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ КОМПЛЕКСА

САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКИХ МЕРОПРИЯТИЙ

В ХИРУРГИЧЕСКИХ ОТДЕЛЕНИЯХ

56. Бактериологический контроль проводят работники бактериологических лабораторий лечебно-профилактических учреждений и сотрудники бактериологических лабораторий санитарно-эпидемиологических и дезинфекционных станций.

57. Объектами исследования при проведении бактериологического контроля являются:

- воздушная среда;

- различные объекты внешней среды;

- медицинский инструментарий, перевязочный и шовный материал;

- руки хирургов и кожа операционного поля.

58. Бактериологические лаборатории санитарно-эпидемиологических или дезинфекционных станций проводят контроль не реже двух раз в год, бактериологические лаборатории лечебных учреждений контролируют санитарно-гигиенический режим (обсемененность различных объектов и воздуха) 1 раз в месяц, а контроль стерильности инструментов, перевязочного материала, операционного белья, рук хирургов и кожи операционного поля (выборочно) - 1 раз в неделю.

59. Методика микробиологических исследований:

А. Исследования микробной обсемененности воздушной среды

Бактериологическое исследование воздушной среды предусматривает:

- определение общего содержания микробов в 1 куб. м воздуха;

- определение содержания патогенных стафилококков в 1 куб. м воздуха.

Отбор проб воздуха для бактериологического контроля проводят в следующих помещениях:

- операционных блоках;

- послеоперационных палатах;

- отделениях реанимации, интенсивной терапии и других помещениях, требующих асептических условий.

Пробы воздуха отбирают аспирационным методом с помощью аппарата Кротова. Скорость протягивания воздуха составляет 25 куб. метров в 1 минуту. Количество пропущенного воздуха - 100 литров для определения общей обсемененности и 250 литров - для определения наличия патогенной микрофлоры.

Для определения общей бактериальной обсемененности воздуха забор проб производят на 2 процента мясо-пептонный агар. Инкубируют посевы при температуре 37 °C в течение 24 часов, затем посевы оставляют на 24 часа при комнатной температуре, после чего подсчитывают количество выросших колоний и производят пересчет на 1 куб. м воздуха. Если на чашках мясо-пептонного агара выросли колонии плесневых грибов, последние подсчитывают и пересчитывают на 1 куб. м воздуха. В протоколе количество плесневых грибов указывают отдельно.

Учет результатов при посеве на кровяную среду производят через 24 часа, при использовании солевых сред посевы после термостатирования в течение 24 часов выдерживают 48 часов при комнатной температуре.

Культуры стафилококка на кровяном агаре могут давать очень слабую зону гемолиза, нередко видимую только после снятия культуры петлей. Подобные культуры стафилококка подлежат обязательной микроскопии и дальнейшей идентификации. Если на чашках с кровяным агаром не выделен стафилококк, то проводят выделение колоний с солевых сред.

На молочно-солевом агаре изучению подлежат колонии, которые образуют золотистый, палевый или белый пигмент. С желточно-солевого агара снимают колонии, которые образуют мутную зону и радужный венчик вокруг колонии. Подозрительные колонии пересевают секторами на чашку с кровяным агаром и дальнейшее изучение их проводят по вышеприведенной схеме.

Подлежат учету те культуры стафилококка, которые коагулируют нитратную плазму, при бактериоскопии имеют вид характерных мелких кокков в виде типичных гроздеподобных колоний, окрашенных грамм-положительно и обладают гемолитическими свойствами.

КРИТЕРИЙ ОЦЕНКИ МИКРОБНОЙ ОБСЕМЕНЕННОСТИ ВОЗДУХА

В ХИРУРГИЧЕСКИХ КЛИНИКАХ

┌─────────────────────────┬──────────────────┬─────────────┬──────────────┐

│ Операционные │ Условия работы │ Количество │ Количество │

│ │ │ колоний в │ патогенного │

│ │ │ 1 куб. м │стафилококка в│

│ │ │ воздуха │250 л воздуха │

│ ├──────────────────┼─────────────┼──────────────┤

│ │до начала операции│ не выше 500 │не должно быть│

│ │ после операции │не выше 1000 │не должно быть│

├─────────────────────────┼──────────────────┼─────────────┼──────────────┤

│Послеоперационные палаты,│до начала работы │не выше 750 │не должно быть│

│отделения реанимации, │ │ │ │

│интенсивной терапии │ │ │ │

└─────────────────────────┴──────────────────┴─────────────┴──────────────┘

Б. Исследования микробной обсемененности

объектов внешней среды

Бактериологическое исследование микробной обсемененности предметов внешней среды предусматривает выявление патогенных стафилококков, синегнойной палочки и бактерий кишечной группы. Забор проб с поверхностей различных объектов осуществляют методом смывов.

Взятие смывов производят стерильными ватными тампонами на палочках, тампоны монтируют в пробирки. Можно брать смывы марлевыми салфетками размером 5 x 5 см, простерилизованными в бумажных пакетах или чашках Петри. Для увлажнения тампонов в пробирки с тампонами наливают по 0,2 мл 6,5-процентного солевого бульона. Тампоны увлажняют непосредственно перед взятием смывов. При использовании салфеток 6,5-процентный солевой бульон разливают в стерильные пробирки по 2 мл. Салфетку захватывают стерильным пинцетом, увлажняют солевым бульоном из пробирки и после протирания исследуемого объекта помещают в ту же пробирку.

При контроле мелких предметов смывы производят с поверхностей всего предмета. При контроле предметов с большой поверхностью смывы производят в нескольких местах исследуемого предмета площадью примерно в 100-200 кв. см.

Примечание. При использовании свиной желчи для приготовления желчного бульона концентрация желчи должна быть в 20 раз меньше.

Для выделения стафилококков производят посев непосредственно на чашку Петри с молочно-солевым или желточно-солевым агаром. В качестве среды накопления используют бульоны с 6,5-процентным NaCl и 1 процентом глюкозы, разлитые в пробирки по 5 мл.

Для выявления бактерий кишечной группы производят посев на среду обогащения, для чего тампон (марлевую салфетку) погружают в 10-20-процентный желчный бульон или среду Кесслера или другую среду накопления. Через сутки инкубирования при температуре 37 °C делают пересев на среду Эндо. Подозрительные колонии на среде Эндо микроскопируют и пересевают на 2-ю бродильную пробу - среду Гисса с глюкозой, посев выдерживают 24 часа при температуре 43°.

Если на кровяном агаре или среде Эндо вырастает культура, подозрительная на синегнойную палочку, ее пересевают на скошенный агар. Колонии синегнойной палочки дают на поверхности косяка обильный рост с зеленоватым оттенком маслянистой консистенции с характерным медовым запахом.

ОРИЕНТИРОВОЧНЫЙ ПЕРЕЧЕНЬ ОБЪЕКТОВ,

ПОДЛЕЖАЩИХ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОМУ КОНТРОЛЮ

А. Наркозная комната

1. Интубационная трубка

2. Маска наркозного аппарата

3. Тройник наркозного аппарата

4. Гофрированная трубка

5. Ларингоскоп

6. Роторасширитель

7. Дыхательный мешок

8. Руки врача, сестер анестезистов, врачей-анестезиологов-реаниматологов.

Б. Предоперационная

1. Тазы для мытья рук хирургов

2. Чистые щетки для мытья рук

3. Фартуки (клеенчатые или полиэтиленовые)

В. Операционная

1. Рабочий стол анестезиологов

2. Операционный стол

3. Шланг вакуум-насоса

4. Шланг кислородной подводки

5. Смывы с рук всех участвующих в операции

6. Кожа операционного поля

Г. Послеоперационные палаты, отделения

реанимации и интенсивной терапии

1. Кровать, подготовленная для больного

2. Полотенце для рук персонала

3. Щетка на раковине

4. Шланг кислородной подводки

5. Запасная наркозная аппаратура (набор реанимационной укладки).

6. Шланг вакуум-отсоса

7. Внутренняя поверхность холодильника (для хранения лекарств или градусников)

8. Градусники

Д. Перевязочные комнаты

1. Кушетка для перевязок

2. Полотенце для рук персонала

3. Щетка на раковине

4. Халат медицинских сестер

5. Руки медицинских сестер

6. Рабочий медицинский стол

7. Внутренняя поверхность холодильника для хранения лекарств.

В. Исследование на стерильность

хирургического материала

Исследование хирургического материала на стерильность производят с целью лабораторного контроля за эффективностью стерилизации перевязочного, шовного материала и инструментария.

Объектами бактериологического контроля являются:

- перевязочный материал (марлевые салфетки, ватные шарики, тампоны, др.), подвергавшийся стерилизации в лечебно-профилактическом учреждении;

- шовный материал - кетгут, шелк (подвергают проверке каждую партию шовного материала);

- хирургический инструментарий непосредственно после стерилизации и подготовленный к использованию;

- шприцы и иглы к ним.

Забор проб на стерильность проводит операционная сестра под руководством сотрудника бактериологической лаборатории.

ПРАВИЛА ОТБОРА ПРОБ НА СТЕРИЛЬНОСТЬ

- перевязочный материал для исследования отправляют в биксах, в которых проводили его стерилизацию.

Отбор проб производят в специально подготовленном боксе лаборатории непосредственно перед посевом;

- шовный материал - кетгут и шелк - отбирают из банок с приготовленным для операции материалом в количестве 1-2 мотков из каждой банки. Каждую пробу помещают у пламени горелки в сухую стерильную посуду (колбу или пробирку), фламбируя край колб или пробирок;

- хирургический инструментарий, ножницы, иглы - забор проб производят из биксов после стерилизации инструментария, подготовленного к операции (на стерильном столе). Инструментарий, подлежащий исследованию, опускают в колбу или пробирку с питательной средой, соблюдая правила асептики, и ополаскивают. Посевы этикируют и отправляют в бактериологическую лабораторию.

Для посева материала на стерильность используют:

- тиогликолевую среду - для выявления анаэробных и аэробных бактерий или мясо-пептонный бульон с 0,5 процентами глюкозы для выявления аэробных бактерий, среду Тароцци с 0,15 процентами агар-агара для выявления анаэробов.

Примечание. Тиогликолевую среду нельзя до использования выдерживать при повышенной температуре. Поэтому от каждой серии среды отбирают 1% пробирок среды и выдерживают при 37 °C двое суток. При проросте хотя бы части сред в пробирках, инкубируемых при 37 °C, бракуют всю партию сред. Пробирки с тиогликолевой средой, выдержанные 2 суток, для проверки на стерильность в дальнейшей работе не используют.

Питательные среды разливают в колбы по 50 мл, инкубируют посевы при температуре 37 °C 7 суток.

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Материал стерилен при отсутствии роста во всех посевах.

Материал нестерилен при росте микрофлоры.

Г. Бактериологический контроль эффективности обработки

кожи операционного поля и рук хирургов

Смывы с кожи операционного поля и рук хирургов производят стерильными марлевыми салфетками, размером 5 x 5 кв. см, смоченными в растворе нейтрализатора (если таковой имеется) или в физиологическом растворе. Марлевой салфеткой тщательно протирают ладони, околоногтевые и межпальцевые пространства обеих рук. После забора проб марлевую салфетку помещают в широкогорлые пробирки или колбы с раствором нейтрализатора (воды или физиологического раствора) и стеклянными бусами, встряхивают в течение 10 минут, производят отмыв марлевой салфетки. Отмывную жидкость засевают глубинным способом по 0,5 мл на 2 чашки Петри с мясо-пептонным агаром, а марлевую салфетку - в 0,5-процентный сахарный бульон. Посевы инкубируют при температуре 37 °C в течение 48 часов.

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Кожа и руки стерильны при отсутствии роста микроорганизмов как на твердой, так и на жидкой питательной среде.

Приложение N 1

РЕЖИМЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ И ДЕЗИНФЕКЦИИ ОТДЕЛЬНЫХ ОБЪЕКТОВ

┌───┬────────────────────┬────────────────┬─────────────────────────────┬────────────────┐

│ N │ Наименование │ Стерилизующий │ Режимы стерилизации │ Примечание │

│п/п│ объектов │ агент ├──────────────────┬──────────┤ │

│ │ │ │ температура │экспозиция│ │

├───┴────────────────────┴────────────────┴──────────────────┴──────────┴────────────────┤

│ I. Стерилизация │

│ │

│1. │Перевязочные мате- │Водяной пар под │а) 132 °C +/- 2 °C│20 минут │Стерилизация в │

│ │риалы, хирургические│давлением │p = 2 ати │ │стандартных │

│ │инструменты, детали │ │б) 126 °C +/- 2 °C│30 минут │биксах, мягкой │

│ │приборов и аппаратов│ │p = 1,5 ати │ │упаковке или │

│ │(соприкасающиеся с │ │в) 120 °C +/- 2 °C│45 минут │пергаментной │

│ │раневой поверхно- │ │p = 1,1 ати │ │бумаге. │

│ │стью), изготовленные│ │ │ │Рекомендован для│

│ │из коррозионностой- │ │ │ │стерилизации │

│ │ких металлов и │ │ │ │перчаток и │

│ │сплавов. Шприцы с │ │ │ │изделий из │

│ │надписью 200 °C, │ │ │ │резины │

│ │стеклянная посуда │ │ │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│2. │Хирургические, │Горячий воздух │а) = 180 °C │45 минут │Стерилизация в │

│ │гинекологические и │ │ │ │крафт-бумаге, │

│ │стоматологические │ │ │ │стандартных │

│ │инструменты, детали │ │ │ │укладках, │

│ │и узлы приборов и │ │ │ │металлических │

│ │аппаратов (соприка- │ │ │ │пеналах, биксах.│

│ │сающихся с раневой │ │ │ │Стерильный мате-│

│ │поверхностью), в том│ │ │ │риал в биксах │

│ │числе изготовленные │ │ │ │или двойной │

│ │из коррозионно- │ │ │ │легкой упаковке │

│ │нестойких материалов│ │ │ │хранят не более │

│ │и сплавов. Шприцы с │ │ │ │3 суток, в │

│ │надписью 200 °C, │ │ │ │пергаменте и │

│ │стеклянная посуда │ │ │ │крафт-бумаге - │

│ │ │ │ │ │не более │

│ │ │ │ │ │3 недель │

│ │ │ │ │ │ │

│3. │Хирургические │6% раствор │а) 18 °C │6 часов │Погружение с │

│ │инструменты, из │перекиси │б) 50 °C │3 часа │последующим │

│ │коррозионностойких │водорода │ │ │промыванием │

│ │металлов и сплавов. │ │ │ │стерильной водой│

│ │Изделия из резины, │ │ │ │ │

│ │пластических масс, в│ │ │ │ │

│ │том числе с метал- │ │ │ │ │

│ │лическими частями из│ │ │ │ │

│ │коррозионностойких │ │ │ │ │

│ │металлов и сплавов │ │ │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│4. │Эндоскопы, изделия │Смесь "ОБ" или │а) 18 °C │16 часов │Упаковка в │

│ │из пластических │"ОКЭБМ" (окись │(при расх. │ │полиэтиленовую │

│ │масс, в том числе с │этилена с │3,5 г/л) │ │пленку, перга- │

│ │металлическими │бромистым │б) 50 °C │6 часов │мент │

│ │частями. │метилом в │(при расх. │ │ │

│ │Изделия из резины и │соотношении │1,6 г/л) │ │ │

│ │пластических масс, │1:1,5, 1:2,8 по │ │ │ │

│ │в том числе │весу соответ- │ │ │ │

│ │однократного │ственно) │ │ │ │

│ │пользования │ │ │ │ │

│ │

│ II. Дезинфекция (обеззараживание) │

│ │

│5. │Отоларингологические│а) Кипячение │2-процентный │30 минут │В воде │

│ │и др. инструменты, │б) "Тройной │раствор формалина,│45 минут │Погружение в │

│ │применяемые для │раствор" │0,3-процентный │ │раствор │

│ │осмотра │ │раствор фенола, │ │ │

│ │ │ │1,5-процентный │ │ │

│ │ │ │раствор │ │ │

│ │ │ │двууглекислой соды│ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│6. │Зеркала зубные, │Перекись │6% │1 час │Погружение в │

│ │гортанные и │водорода │ │ │раствор с после-│

│ │носоглоточные │ │ │ │дующим промыва- │

│ │ │ │ │ │нием водой │

│ │ │ │ │ │ │

│7. │Шпатели │Кипячение │ │15 минут │ │

│ │металлические │ │ │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│8. │Щетки для мытья рук │Автоклавирование│0,5 ати │20 минут │ │

│ │ │ │ │ │ │

│9. │Клеенка с кушетки │Хлорамин │0,5-процентный р-р│ │Протирание │

│ │для осмотра больного│Осветленный │0,2-процентный р-р│ │ветошью │

│ │ │раствор хлорной │ │ │ │

│ │ │извести │ │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│10.│Помещения │Хлорамин │1,0-процентный │ │Протирание │

│ │(операционные, │Осветленный │раствор │ │ветошью │

│ │послеоперационные │раствор хлорной │0,5-процентный │ │ │

│ │палаты), предметы │извести │раствор │ │ │

│ │обстановки │ │ │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│11.│Уборочный инвентарь │Хлорамин │1-процентный │60 минут │Промывают, сушат│

│ │и материал │Осветленный │раствор │60 минут │ │

│ │ │раствор хлорной │0,5-процентный │ │ │

│ │ │извести │раствор │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│12.│Наконечники для │Кипячение │ │15 минут │ │

│ │клизм (стеклянные, │ │ │ │ │

│ │пластмассовые) │ │ │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│13.│Ножницы для стрижки │Формалин │10-процентный │15 минут │ │

│ │ногтей │Кипячение │раствор │10 минут │ │

│ │ │ │ │ │ │

│14.│Безопасная бритва │Формалин │10-процентный │15 минут │ │

│ │ │Кипячение │раствор │10 минут │ │

│ │ │ │ │ │ │

│15.│Резиновый коврик │Хлорамин │5-процентный │ │Орошение │

│ │ │Комплекс переки-│раствор │ │ │

│ │ │си водорода с │6-процентный │ │ │

│ │ │моющим средством│раствор │ │ │

│ │ │ │0,5-процентный │ │ │

│ │ │ │раствор │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│16.│Кровать │Хлорамин │0,5-процентный │ │Протирание │

│ │ │Осветленный │раствор │ │ │

│ │ │раствор хлорной │0,2-процентный │ │ │

│ │ │извести │раствор │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│17.│Постельные │Обеззараживание │см. п. 26 │ │ │

│ │принадлежности │в пароформалино-│ │ │ │

│ │(матрац, подушка, │вых камерах по │ │ │ │

│ │одеяло) │пароформалино- │ │ │ │

│ │ │вому или паро- │ │ │ │

│ │ │воздушному │ │ │ │

│ │ │методу │ │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│18.│Нательное и │Стирка в │ │ │В послеопера- │

│ │постельное белье │прачечной с │ │ │ционной палате, │

│ │ │кипячением │ │ │отделении реани-│

│ │ │ │ │ │мации нательное │

│ │ │ │ │ │и постельное │

│ │ │ │ │ │белье после │

│ │ │ │ │ │стирки автокла- │

│ │ │ │ │ │вируют по │

│ │ │ │ │ │режимам, указан-│

│ │ │ │ │ │ным в п. 26 │

│ │ │ │ │ │ │

│19.│Генеральная уборка │Хлорамин │5-процентный │ │Промывают водой │

│ │операционной и │Комплекс пере- │раствор │ │50 °C с мылом и │

│ │перевязочной │киси водорода с │6-процентный │ │содой, протирают│

│ │ │моющим средством│раствор │ │дезинфицирующим │

│ │ │ │0,5-процентный │ │раствором │

│ │ │ │раствор │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│20.│Тазы для │Хлорамин │0,5-процентный │ │Промывают │

│ │перевязочного │ │раствор │ │ │

│ │материала │ │ │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│21.│Подкладные судна из │Хлорамин │0,5-процентный │ │Погружение │

│ │послеоперационной │ │раствор │ │(после выписки │

│ │палаты │ │ │ │больного) │

│ │ │ │ │ │ │

│22.│Каталки, баллоны с │Хлорамин │0,5-процентный │ │Протирание │

│ │O и CO │Комплекс пере- │раствор │ │ │

│ │ 2 2 │киси водорода с │3-процентный │ │ │

│ │ │моющим средством│раствор │ │ │

│ │ │ │0,5-процентный │ │ │

│ │ │ │раствор │ │ │

│ │ │ │ │ │ │

│23.│Резиновые грелки, │Хлорамин │0,5-процентный │15 минут │Промывают │

│ │пузыри для льда │ │раствор │ │горячей водой, │

│ │ │ │ │ │протирают │

│ │ │ │ │ │дезраствором │

│ │ │ │ │ │ │

│24.│Клеенчатый фартук из│Хлорамин │1-процентный │30 минут │Погружают в │

│ │гнойной перевязочной│ │раствор │ │дезраствор, │

│ │ │ │ │ │промывают │

│ │ │ │ │ │проточной водой │

│ │ │ │ │ │ │

│25.│Уборочный инвентарь │Хлорамин │1-процентный │30 минут │Промывают и │

│ │и материал для │Осветленный │раствор │ │сушат │

│ │туалетных комнат │раствор хлорной │0,5-процентный │ │ │

│ │ │извести │раствор │ │ │

└───┴────────────────────┴────────────────┴──────────────────┴──────────┴────────────────┘

26. Режимы обработки по пароформалиновому методу

┌─────────────┬──────────────┬───────────┬─────────┬────────┬─────────────┐

│ Методы и │Норма загрузки│Температура│ Расход │Экспози-│Ориентировоч-│

│ варианты │ на 1 кв. м │по наруж- │формалина│ция в │ные сроки │

│ дезинфекции │ полезной │ному │ на │минутах │обработки в │

│ │площади камеры│термометру │ 1 кв. м │ │мин.; не счи-│

│ ├───────┬──────┤ │ камеры │ │тая загрузки │

│ │в комп-│ в кг │ │ в мл │ │и выгрузки │

│ │лектах │ │ │ │ │вещей │

├─────────────┼───────┼──────┼───────────┼─────────┼────────┼─────────────┤

│Обычный метод│5 │30 │57-59 │75 │45 │90 │

│Щадящий │4 │24 │49-51 │150 │90 │135 │

│Более щадящий│2,5 │15 │40-42 │200 │180 │225 │

└─────────────┴───────┴──────┴───────────┴─────────┴────────┴─────────────┘

27. Режим обеззараживания по паровоздушному методу: температура 80-90°, норма загрузки 60 кг на кв. м полезной площади камеры, экспозиция 20 минут.

Приложение N 2

МЕТОДИКА

САНАЦИИ НОСИТЕЛЕЙ ПАТОГЕННОГО СТАФИЛОКОККА

Санацию носителей патогенного стафилококка проводят очищенным гексахлорофеном или препаратом трибромсалициланилид (ТриБАСК).

1. Очищенный гексахлорофен

Санацию носителей патогенного стафилококка при локализации патогенного стафилококка в носу проводят 1-процентной гексахлорофеновой мазью на вазелиновой основе (1 г гексахлорофена на 99 г вазелина). Мазь вносят в передние отделы носа стерильным ватным тампоном. Для более равномерного распределения мази производят легкий массаж крыльев носа санируемого в течение 1-2 минут. Санируют 1 раз в сутки в течение 5-6 дней, не допуская перерывов в курсе санации.

2. Препарат (трибромсалициланилид) "ТриБАСК"

Санацию носителей патогенного стафилококка при локализации стафилококка в носу проводят 3-процентной мазью на вазелиновой основе. Мазь закладывают в нос дважды в день в течение 5-6 дней. Приготовление мази: на 100 г вазелина берут 3 г препарата ТриБАСК, тщательно растирают.

Приложение N 3

АППАРАТЫ ДЛЯ СНИЖЕНИЯ МИКРОБНОЙ ОБСЕМЕНЕННОСТИ ВОЗДУХА

В ПОМЕЩЕНИЯХ МАЛОГО ОБЪЕМА

Воздухоочистители передвижные рециркуляционные (ВОПР-0,9 и ВОПР-1,5) предназначены для очистки воздуха от пыли и снижения микробной обсемененности в операционных, перевязочных, палатах и т.д.

Воздухоочистители обеспечивают быструю и высокоэффективную очистку воздуха. Запыленность и бактериальная обсемененность в течение первых 15 минут непрерывной работы снижается в 7-10 раз.

Работа воздухоочистителей основана на непрерывной циркуляции воздуха через фильтр из ультрафиолетовых волокон. Работают в режиме как полной рециркуляции, так и с забором воздуха из смежных помещений или улицы.

Воздухоочистители используют для очистки воздуха во время работы, они не вызывают неприятных ощущений и не оказывают вредного влияния на окружающих. Надежны и просты в эксплуатации и не требуют квалифицированного обслуживания.

ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

ВОПР-20-9 ВОПР-1,5

Производительность М, з/ч 900 1500

Электропитание от сети 220 В, 50 мг

Потребление мощности, Вт не более 300

Габаритные размеры, мм 1150 x 450 x 1470

Выпуск производится Борисоглебским механическим заводом (Воронежская область).

Приложение N 4

НЕКОТОРЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ПАТОГЕННЫХ СТАФИЛОКОККОВ

Элективно-дифференциальная среда - желточно-солевой агар

К растопленному и остуженному агару, содержащему 10 процентов хлористого натрия, добавляют 20 процентов по объему желточной взвеси (1 желток на 150-200 мл стерильного физиологического раствора).

Среду разливают по чашкам, посев прямой. Инкубация посевов при 37° в течение 2 суток. Патогенные стафилококки при росте образуют мутную зону и радужный венчик вокруг колоний (лецитиназная реакция). При отсутствии роста подобных микробов отвивают обычные пигментированные колонии стафилококков и проверяют по коагулазной реакции.

ПОСЕВЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ

ПАТОГЕННЫХ СВОЙСТВ СТАФИЛОКОККОВ

1. Реакция плазмокоагуляции

Микробную взвесь растирают петлей на стекле в капле нитратной человеческой или кроличьей плазмы цельной или разведенной 1:4. Учитывают образование хлопьев в течение 1-2 минут.

2. Коагулазная проба

В стерильные пробирки разливают по 0,2 мл цитратной человеческой или кроличьей плазмы, цельной или разведенной до 1:8. Добавляют 0,1 мл бульонной культуры или взвеси микробов. Инкубация при 37°. Учет свертывания плазмы производят через 2-3 или 24 часа.

3. Реакция "скорой коагуляции"

В стерильные пробирки разливают по 0,5 мл цитратной плазмы, цельной или разведенной до 1:8, и добавляют 0,1 мл взвеси исследуемого материала. Инкубация при 37°. Учет свертывания плазмы через 1-3 часа. Повторный просмотр через 6 и 24 часа.

4. Фибринолитический тест

К расплавленной и остуженной до 50° среде Кристи (мясной экстракт 0,45 г, пептон 0,75 г, хлористый натрий 1,2 г, агар 2,75, вода 133 мл, pH 7,6) добавляют 15-20 процентов стерильной цитратной человеческой плазмы. Смесь прогревают в водяной бане при 65-70° в течение 2-5 минут до появления явной мути, а затем разливают по чашкам. Посев испытуемых культур "пятнами", по 16-20 на одну чашку. Инкубация при 37 °C. Учитывают образование зон просветления вокруг колоний через 14-24-48 часов.

5. Лецитиназная проба

Культуры засевают "пятнами" на питательный агар, содержащий 20 процентов желточной взвеси (1 желток на 150-200 мл стерильного физиологического раствора). Инкубация 37 °C в течение суток. Учет помутнения и образования радужного венчика вокруг микроколоний. На одну чашку засевают 20 и более культур.